不同年龄段 不同病型分类中碱性磷酸酶活力下降规律的研究

碱性磷酸酶又称正磷酸单酯磷酸水解酶（ALP）,广泛存在于人体各脏器中,其中以肝脏最为多见,其次是肾脏、骨骼、肠以及胎盘组织中。临床上通常看重于血清ALP活性增高的疾病的研究,很少注意临床疾病与血清ALP活力降低的关系。因此,我们重点研究血清ALP活力下降的临床意义以及它的发生规律。

狼疮样肾炎小鼠脾细胞钙调磷酸酶活性检测及Th2细胞因子表达变化

目的:检测狼疮样肾炎小鼠脾细胞中钙调磷酸酶(CaN)活性,探讨CaN与肾炎小鼠脾细胞IL-6、IL-10表达的关系。方法:采用慢性移植物抗宿主小鼠(GVHD)模型,CaN活性检测采用发色底物法。结果:(1)模型组血清抗ds-DNA抗体BI值显著升高,与正常组比差异有显著性(P<0.05);FK506组BI值与正常组比较,差异无显著性。(2)狼疮样肾炎小鼠脾脏中CaN活性与血清中抗ds-DNA抗体呈正相关关系(r=0.925,P<0.01)。(3)脾细胞自身增殖反应性模型组明显高于正常组(P<0.05),FK506组与正常组比较,差异无显著性(P>0.05);FK506显著抑制刀豆蛋白(ConA)诱导的脾细胞增殖反应性,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。(4)模型组脾细胞中CaN活性显著增强,与正常组比较差异有显著性(P<0.05);FK506组脾细胞CaN活性明显降低,与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。(5)模型组小鼠脾细胞ConA诱导分泌Th2细胞因子IL-6、IL-10水平显著高于正常组及FK506组。结论:狼疮样小鼠脾细胞存在CaN过度活化,Th2细胞因子高表达与其CaN过度活化密切相关,通过阻断CaN活性可调控狼疮样小鼠脾细胞的活化。

磷酸酶与张力蛋白同源物基因过度表达抑制乳鼠心脏成纤维细胞增殖

目的将携带有张力蛋白同源物基因(PTEN)的重组腺病毒载体转染乳鼠心脏成纤维细胞,观察心脏成纤维细胞过度表达野生型PTEN对其增殖的影响。方法分离培养心脏成纤维细胞,以携带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-PTEN转染上述细胞,荧光倒置显微镜下观察GFP表达情况,确定最佳感染倍数(MOI)。原代心脏成纤维细胞接种至96孔板,转染Ad-PTEN[Ad-PTEN转染组(MOI根据生长曲线确定)],并设正常对照组(加入等体积培养基),以MTT的方法检测其吸光度(A),以反映细胞增殖情况,将转染效率达到90%以上成纤维细胞及正常对数生长期成纤维细胞消化,制成单细胞悬液,流式细胞仪分别检测细胞周期,以吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)法分别检测Ad-PTEN转染组和正常对照组细胞凋亡情况;结果MTT测定的结果:48 h后Ad-PTEN转染组的A显著低于该时间点正常对照组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果发现Ad-PTEN转染的成纤维细胞出现G1期阻滞;AO/EB法检测发现Ad-PTEN转染的成纤维细胞其细胞凋亡率与正常对照组细胞无显著差异;结论PTEN基因过度表达将引起乳鼠心脏成纤维细胞增殖受抑制,该现象与细胞周期G1期阻滞有关。

钙调磷酸酶抑制剂FK506对Tg2576小鼠记忆时间的影响

[目的]探讨钙调磷酸酶（Calcineurin，CaN）抑制剂FK506对Tg2576小鼠记忆时间的影响。[方法]应用新事物再认实验（Norel Object Recognition，NOR）观察在2min，4h及24h时Tg2576小鼠记忆力损害程度及CaN抑制剂FK506对Tg2576小鼠记忆损害的改善作用。[结果]Tg2576小鼠的短时记忆并未受到影响，Tg2576小鼠主要表现出中、长时程记忆损害；且CaN抑制剂FK506能有效改善Tg2576小鼠中时程记忆及长时程记忆损害。[结论]CaN活性异常可影响Tg2576小鼠中时程记忆及长时程记忆功能；推测在阿尔茨海默症病（AD）患者应用CaN抑制剂能有效改善其记忆功能障碍，可成为AD治疗的途径之一。

异硫氰酸苯乙酯对结肠癌细胞PTEN及MMP-9表达的影响

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10、30、50μmol/L PEITC作用24 h,采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)和荧光素酶报告基因分别检测PTEN和MMP-9 mRNA的表达;采用蛋白质印迹法(western blotting)检测MMP-9和PTEN蛋白表达。结果 PEITC可抑制MMP-9蛋白表达,同时能降低MMP-9的转录活性。此外,不同浓度PEITC处理后,可明显诱导细胞内PTEN的表达,其中50μmol/L PEITC处理后,PTEN mRNA含量可增高5.1倍。结论 PEITC能影响结肠癌细胞PTEN和MMP-9的表达。

喉癌中肝细胞再生磷酸酶-3的表达及与微血管密度的相关性

目的：探讨在喉鳞状细胞癌中肝细胞再生磷酸酶-3（PRL-3）和微血管密度（MVD）的相关性。方法：采用免疫组化SABC法检测69例喉鳞状细胞癌组织和25例相应癌旁组织中PRL-3的表达情况,并用CD105标记MVD,研究PRL-3的表达及MVD计数与喉鳞癌临床病理特征的关系,采用Spearman等级相关分析PRL-3表达与MVD的相关性。结果：PRL-3在癌组织中的阳性表达率（65.22%）高于癌旁组织（8%）,差异有统计学意义（P〈0.01）。癌组织中有淋巴结转移患者的PRL-3阳性率和MVD计数明显高于无淋巴结转移患者,病理分期为Ⅲ~Ⅳ期的PRL-3和MVD高于Ⅰ-Ⅱ期,差异均有统计学意义（P〈0.05）。PRL-3的表达与MVD计数呈正相关（r=0.811,P〈0.01）。结论：PRL-3可能作为一种新的肿瘤标志物来监控喉鳞状细胞癌的发生、浸润和转移。

血清脂蛋白相关磷酸酶A2和患者脑梗死后血管性痴呆的关系研究

【目的】探讨血清脂蛋白相关磷酸酶A2(LP-PLA2)和患者脑梗死后血管性痴呆的关系,旨在为临床治疗提供科学依据。【方法】选取2017年1月至2018年12月于本院接受治疗的82例脑梗死患者为研究对象,按照是否发生血管性痴呆将患者分为两组,40例并发血管性痴呆患者为观察组,对照组为未并发血管性痴呆患者,共42例,比较两组患者的LP-PLA2、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)和高敏C反应蛋白(hsCRP)水平。【结果】观察组LP-PLA2水平为(212.54±40.29)ng/mL,明显高于对照组的(136.82±36.07)ng/mL,且差异具有显著性(P<0.05);观察组TG水平、LDL-C水平、hsCRP水平高于,HDL-C水平低于对照组,且两组之间相比较差异均具有显著性(P<0.05)。接收者工作特征曲线(ROC)分析提示:该5指标具有一定的预测血管性痴呆的诊断价值,敏感度和特异度在0.7以上。其中以LP-PLA2的诊断效能最高,曲线下的面积(AUC)为0.825。【结论】LP-PLA2是脑梗死患者血管性痴呆的危险因素,患者LP-PLA2水平升高,提示患者有发生血管性痴呆的风险,临床上应该加以重视。

PI3K/AKT信号通路与PTEN在非小细胞肺癌表达中的相关性

目的研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、磷酸化AKT蛋白(phophorylatedAKT,p-AKT)及PTEN基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome,PTEN)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义。方法 采用免疫组织化学Maxvision法检测EGFR、p-AKT及原位杂交法检测PTEN在66例NSCLC和10例正常肺组织中的表达,并分析两者的相关性及其与临床病理特征的关系。结果 EGFR、p-AKT和PTEN在NSCLC中的阳性率分别为69.7%、75.8%、33.3%,在NSCLC中,EGFR的高表达与分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05);p-AKT的高表达与分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05)。PTEN在NSCLC中的阳性表达率明显下调,其失表达与分化程度、淋巴结转移、TNM分期和病理类型密切相关(P<0.05)。EGFR与p-AKT表达呈正相关(P<0.05),EGFR与PTEN表达呈负相关(P<0.05),p-AKT与PTEN表达呈负相关(P<0.05)。结论 EGFR和p-AKT在NSCLC的高表达和PTEN基因失表达,可能促进了NSCLC的发生、发展及侵袭转移。可为NSCLC基因靶向治疗提供理论依据。

PTEN和p53蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨PTEN和p53蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其在癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组化方法检测40例子宫内膜癌组织和23例正常子宫内膜组织中PTEN和p53蛋白的表达,观察二者与子宫内膜癌临床病理学参数的关系,分析其在肿瘤发生发展中的作用。结果:40例子宫内膜癌组织中,PTEN阳性表达率为52.5%(21/40),与全部为阳性表达的正常子宫内膜相比,子宫内膜癌中PTEN表达明显下降,χ2=15.643,P<0.01。PTEN蛋白表达与子宫内膜癌的分化程度、临床分期、病理类型、肌层是否浸润及有无淋巴结转移均无关,P均>0.05。在正常子宫内膜组织中未见p53阳性染色,而在内膜癌组织中17.5%(7/40)染色呈阳性。p53蛋白的表达与肿瘤分化程度有关,随着分化程度下降,表达增加。在子宫内膜癌中,PTEN和p53蛋白的表达具有相关性,χ2=4.969,P=0.026。结论:与正常子宫内膜相比,子宫内膜癌中PTEN表达明显下降;p53则随着肿瘤细胞分化程度下降而表达增加。PTEN和p53在子宫内膜癌的发生发展过程中,发挥着重要作用。

PTEN及Bcl-2蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨PTEN及Bcl-2蛋白在膀胱移行细胞癌的表达规律及其临床意义。方法:应用免疫组织化学链亲和素-生物素-霉复合物(SP)方法检测43例膀胱移行细胞癌和7例正常黏膜组织中PTEN及Bcl-2蛋白的表达,分析二者的表达与膀胱癌病理参数的关系。结果:(1)G1、G2、G3肿瘤PTEN表达阳性率分别为85.7%、80.4%、73.3%,浸润性肿瘤和表浅性肿瘤表达阳性率分别为70.4%和93.8%,说明PTEN表达阳性率与肿瘤病理分级、临床分期有关。(2)G1、G2、G3肿瘤Bcl-2表达阳性率分别为14.2%、57.14%、66.67%,浸润性肿瘤和表浅性肿瘤表达阳性率分别为59.3%和43.8%,说明Bcl-2表达阳性率与肿瘤病理分级、临床分期有关。(3)随着肿瘤恶性程度的增高和临床分期进展,PTEN蛋白阳性率呈下降,Bcl-2表达呈增高趋势,二者表达呈负相关关系。结论:PTEN的抑癌作用可能与Bcl-2有关,二者的异常表达在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起重要作用。二者同时检测有助于判断预后。

PTEN与缺血性脑损伤的研究进展

第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)作为抑癌基因,可以抑制肿瘤细胞的生长。目前研究发现,它在脑组织中表达,并可与NMDR受体亚单位NR1、NR2B相互结合。在缺血性脑损伤时下调PTEN可保护神经元。现就目前PTEN与缺血性脑损伤的研究作一综述。

PTEN基因在人和树鼠句肝细胞癌组织中低表达

目的:研究人和树鼠句肝癌和癌旁组织中PTEN基因的表达情况以及与肝癌侵袭转移的关系。方法:用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测人肝癌、癌旁组织和正常组织以及树鼠句肝癌和癌旁组织中PTEN mRNA和PTEN蛋白的表达情况。结果:PTEN mRNA在人的正常组织、癌旁组织、肝癌组织中的表达依次降低,差异有统计学意义,t值分别为-0.955和-10.065,P值均<0.001;树鼠句肝癌组织中PTEN mRNA的表达显著低于癌旁组织中的表达,t=-3.25,P=0.004。PTEN蛋白的表达在人的癌旁组织显著高于肝癌组织,t=-2.163,P=0.038;在树鼠句则无差别,t=0.757,P=0.459。结论:PTEN基因的表达缺失可能与肝癌的发生有关;用树鼠句进行肝癌发病学的研究基本上是可行的。

环孢霉素A抑制肾性高血压大鼠心肌肥大的作用机制

目的 观察环孢霉素A对肾性高血压大鼠心肌肥大的抑制作用 ,并探讨其作用机制。方法 2 0只Wistar大鼠随机分为 3组 :两组采用一肾一夹模型制造肾性高血压 ,其中高血压组 (n =7)予生理盐水腹腔注射 ;CsA组 (n =7)给予环孢霉素A(CsA) 5mg·kg- 1 ·d- 1 腹腔注射 ;假手术组 (n =6)只给予生理盐水腹腔注射。称重法测定心重比 ,发色底物法测CaN活性 ;半定量PCR测定各组心肌组织中心房利钠因子 (ANF)及CaNmRNA的水平 ,同时用免疫组织化学染色方法 ,观察心肌中CaN及活化T细胞核因子 (nuclearfactorofactivatedTcell,NFAT)的表达。结果 肾性高血压大鼠经CsA干预 4周 ,其心重比较未干预组明显降低 (P <0 0 5 ) ,ANFmRNA水平较手术组明显降低 (P <0 0 5 ) ,与假手术组水平接近 ,心肌肥大受到抑制 ,同时发现心肌中CaN活性较未干预组显著下降 ,CaNmRNA水平较手术组明显降低 (P <0 0 5 ) ,免疫组化显示CsA干预组心肌中CaN及NFAT表达降低。

PTEN蛋白表达缺失在非小细胞肺癌患者预后中的意义

[目的]探讨PTEN蛋白表达缺失在非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后中的意义.[方法]应用免疫组织化学SP法检测20例正常肺组织和102例NSCLC癌组织中PTEN蛋白的表达,NSCLC患者随访时间3～60个月.[结果]NSCLC癌组织中PTEN蛋白表达缺失率为46.1%(47/102),而正常组织为阳性.PTEN蛋白表达缺失与肿瘤组织分化程度、临床分期以及有无淋巴结和远处转移相关.PTEN蛋白表达缺失者5年生存率和中位生存时间显著低于阳性者(Log rank 检验χ2=21.06,P<0.0001).Cox多因素分析PTEN蛋白表达与患者预后相关.[结论]PTEN蛋白表达缺失与NSCLC发展有关,是预测NSCLC患者不良预后的独立危险因素.

MMP-2和PTEN蛋白在膀胱癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metaloproteinase-2,MMP-2)和PTEN蛋白在膀胱癌组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学PV-6000通用型二步法检测65例膀胱癌及10例正常膀胱组织中MMP-2和PTEN蛋白的表达。结果:MMP-2在正常膀胱组织中不表达,在65例膀胱癌组织中的阳性表达率为56.9%;随着肿瘤细胞病理分级、临床分期的增加,MMP-2阳性表达率逐渐增高,各组间比较差异有统计学意义,P<0.05。PTEN蛋白在正常膀胱组织中均呈阳性表达,在65例膀胱癌组织中的阳性表达率为46.2%;随着癌细胞病理分级、临床分期的增加,PTEN蛋白阳性表达率逐渐减低,各组间比较差异有统计学意义,P<0.05。结论:MMP-2和PTEN蛋白异常表达与膀胱癌的发生发展关系密切,检测两者在膀胱癌组织中的表达,可作为判断膀胱癌发生发展的有用指标。

两种ErbB2/Neu阳性-PTEN缺失乳腺癌基因工程小鼠模型的建立及其生物学特征比较

目的：建立两种ErbB2／Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型并比较其生物学特征。方法：利用先前建立的由鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV）启动子同时驱动活化型ErbB2／Neu基因和重组酶Cre表达的FVB／N—MMTV—NIC小鼠与Flox-PTEN小鼠交配；或将由内源性启动子驱动活化型ErbB2／Neu基因表达的FVB／N-ErbB2^KI、FVB／N—MMTV—Cre及Flox—PTEN三种基因工程小鼠交配；PCR分别扩增Neu、Cre和PTEN基因，对其子代小鼠进行基因型鉴定；免疫组织化学法检测乳腺组织ErbB2／Neu和PTEN蛋白表达。对两种模型的成瘤时间、肿瘤数目、肺转移等生物学特征进行比较，观察肿瘤组织病理学形态，免疫组织化学法检测肿瘤细胞Ki-67表达，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡水平。结果：经基因型鉴定和组织蛋白表达分析，获得了两种ErbB2／Neu阳性-PTEN纯合型缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型；一是由MMTV外源性启动子同时驱动活化型ErbB2／Neu和Cre表达，抑癌基因PTEN条件性敲除的NIC／PTEN^-/-模型；二是由MMTV-Cre使内源性启动子驱动ErbB2／Neu基因表达，PTEN条件性敲除的ErhB2^KI／PTEN^-/-模型。NIC／PTEN^-/-模型的平均成瘤时间低于ErbB2^KI／PTEN^-/-模型（30d与368d，P〈0．01）；肿瘤数目、肺转移率均高于ErbB2^KI／PTEN^-/-模型（分别为10个与1～2个，75．0％与37．5％，均P〈0．01）；两种模型肿瘤呈现不同的组织病理形态，肿瘤细胞凋亡水平相当（P〉0．05）；NIC／PTEN^-/-模型Ki-67阳性细胞百分率高于ErhB2^KI／PTEN^-/-模型（86．9％±2．8％与37．4％±7．2％，P〈0．01）。结论：两种不同表型的ErbB2／Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠为探索ErbB2／HER2阳性乳腺癌的发生、发展规律及更有效的防治方案提供了理想的动物模型。

抗泥型聚羧酸减水剂的研究(Ⅰ)——普通型

利用甲基烯丙基聚氧乙烯醚(HPEG)、丙烯酸(AA)、磷酸类功能性单体(PFM)和β-环糊精马来酸单酯(β-CD-MAH),以过硫酸铵(APS)为氧化剂,化合物C为还原剂,通过自由基共聚反应合成了抗泥型聚羧酸减水剂。研究了掺该减水剂的水泥净浆和混凝土的性能,并采用凝胶渗透色谱(GPC)、X射线衍射(XRD)和总有机碳分析测试(TOC)对减水剂的抗泥机理进行了研究。结果表明,经PFM和β-CD-MAH改性后的减水剂具有明显的抗泥保坍效果,并能有效改善含泥混凝土的工作性和长期性能。

肺癌组织中PTEN P63和P27蛋白的表达及意义

目的检测10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)、P63和P27蛋白在肺癌组织中的表达,分析其与肺癌临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测PTEN、P63和P27蛋白在肺癌组织和正常肺组织中的表达情况。结果PTEN、P63和P27在肺癌组织中的阳性表达率分别为27.3%(18/66)、33.3%(22/66)和21.2%(14/66),与三者在正常肺组织中的阳性表达率90.0%、70.0%和70.0%比较差异有统计学意义(P<0.01)。PTEN和P63在高、中分化鳞癌及低分化鳞癌的阳性表达率分别为55.6%和0.0%(P<0.01)。PTEN和P63、PTEN和P27、P63和P27的共同阳性表达率分别为13.6%、6.1%和9.1%,PTEN与P63表达呈正相关性(P<0.01)。Cox多因素分析显示PTEN和P27在模型中呈负相关,患者的预后危险度相对较小,具有统计学意义。结论PTEN、P63和P27蛋白在肺癌组织中较肺正常支气管黏膜上皮表达率低,显示其失表达可能在肺癌的发生中起一定作用。PTEN和P63表达率在高、中分化鳞癌显著高于低分化鳞癌,显示PTEN和P63的表达与肺鳞癌的分化程度有关。PTEN和P63的表达呈正相关性,二者可能有协同作用。PTEN、P63和P27蛋白检测有可能作为诊断肺癌和评价肺癌恶性程度及预后的重要指标。

PTEN蛋白在肺癌中的表达及意义

目的:探讨肺癌中PTEN蛋白表达与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学PV-9000通用型二步法检测65例肺癌组织、10例癌旁肺组织、8例肺良性病变组织中PTEN蛋白的表达情况。结果:PTEN蛋白在肺癌中的阳性表达率为49.23%(32/65),在癌旁肺组织阳性表达率为90%(9/10),在肺良性病变组织阳性表达率为100%(8/8),肺癌PTEN蛋白阳性表达率显著低于癌旁肺组织及肺良性病变组织(P<0.05)。PTEN蛋白表达与非小细胞肺癌的组织分化程度及有无淋巴结转移有关。结论:PTEN蛋白的表达缺失在肺癌发生中可能起重要作用,并可能影响肿瘤的分化和预后。