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家蚕磷酸甘油醛异构酶Tpi基因的克隆 被引量:5
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作者 牛宝龙 孟智启 +2 位作者 翁宏飙 沈卫锋 吕顺霖 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期47-52,共6页
利用生物信息学方法成功地克隆了家蚕磷酸甘油醛异构酶 (triosephosphate isomerase Tpi) 基因 (GenBank登记号为AY734490).该基因全长为2 875 bp;含有5 个外显子、4个内含子,所有内含子/外显子边界都符合典型的GT/AG剪切模式;cDNA 序... 利用生物信息学方法成功地克隆了家蚕磷酸甘油醛异构酶 (triosephosphate isomerase Tpi) 基因 (GenBank登记号为AY734490).该基因全长为2 875 bp;含有5 个外显子、4个内含子,所有内含子/外显子边界都符合典型的GT/AG剪切模式;cDNA 序列全长1 051 bp,并经RT-PCR克隆和序列分析进行了验证;具有完整的开放阅读框架(ORF,95~839 bp),可编码248个氨基酸的蛋白.通过与NCBI蛋白数据库的比对表明,该基因编码的蛋白为磷酸甘油醛异构酶(EC 5.3.1.1),参与葡萄糖分解代谢,即将磷酸二羟丙酮转化为3-磷酸甘油醛,在果蝇、蚊子、黄粉虫、美洲淤夜蛾、棉铃虫等昆虫中具有高度的保守性. 展开更多
关键词 EST数据库 PCR 磷酸甘油醛异构酶 家蚕
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棉铃虫磷酸甘油醛异构酶基因Hatpi的克隆及分析(英文)
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作者 刘岩 齐晓朋 +5 位作者 牛宝龙 翁宏飚 陈金娥 何丽华 沈卫锋 孟智启 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期952-958,共7页
棉铃虫Helicoverpa armigera是一种严重危害棉花等经济作物的鳞翅目害虫,开展分子水平研究对防控害虫将具有重要参考意义。本研究利用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆了棉铃虫磷酸甘油醛异构酶(triosephosphate isomera... 棉铃虫Helicoverpa armigera是一种严重危害棉花等经济作物的鳞翅目害虫,开展分子水平研究对防控害虫将具有重要参考意义。本研究利用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆了棉铃虫磷酸甘油醛异构酶(triosephosphate isomerase)基因Hatpi(GenBank登录号为AY736358)。该基因cDNA全长为1149bp,编码248个氨基酸,预测等电点为5.82,分子量为16.4kD。HaTPI含有磷酸甘油醛异构酶类蛋白的典型(βα)8结构、保守的活性位点(Lys12,His94和Glu165)和小肽序列(AYEPVWAIGTG和GGASLKPEF)等。RT-PCR检测分析发现Hatpi在棉铃虫卵巢、幼虫、蛹、成虫均有表达,提示该基因可能在棉铃虫的不同发育阶段均起作用。 展开更多
关键词 棉铃虫 磷酸甘油醛异构酶 基因 RACE 序列分析 表达
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蜜蜂TPI基因克隆与生物信息学预测 被引量:4
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作者 王琦 李玮妮 王荣 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期108-113,共6页
利用电子克隆方法获得蜜蜂(Apis mellifera)磷酸甘油醛异构酶(triosephosphate isomerase,TPI)基因,并采用生物信息学方法对该基因编码蛋白从等电点、疏水性/亲水性、二级结构等进行了预测,以及试验验证,结果表明蜜蜂TPI基因全长为1 768... 利用电子克隆方法获得蜜蜂(Apis mellifera)磷酸甘油醛异构酶(triosephosphate isomerase,TPI)基因,并采用生物信息学方法对该基因编码蛋白从等电点、疏水性/亲水性、二级结构等进行了预测,以及试验验证,结果表明蜜蜂TPI基因全长为1 768 bp,具有完整的开放阅读框架(ORF),并得到了试验证实。 展开更多
关键词 蜜蜂 电子克隆 磷酸甘油醛异构酶 生物信息学
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从琼脂糖凝胶中高效回收DNA技术的探讨 被引量:4
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作者 徐剑 周君 陆小平 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期15-17,共3页
用两只离心管制成的凝胶过滤装置,从电泳后的琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简易方法。它依次包括以下步骤:凝胶过滤装置的制作、凝胶切割、凝胶低温冷冻、低温高速离心、ddH2O洗胶、DNA纯化和回收效果检测等。用此方法回收的DNA片段产率高... 用两只离心管制成的凝胶过滤装置,从电泳后的琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简易方法。它依次包括以下步骤:凝胶过滤装置的制作、凝胶切割、凝胶低温冷冻、低温高速离心、ddH2O洗胶、DNA纯化和回收效果检测等。用此方法回收的DNA片段产率高、质量纯,可直接用于分子生物学实验的后续操作,如载体连接、PCR模板获得、DNA探针制备、基因测序等。其优点是:DNA片段的回收率高(90%以上),质量好;操作简便,耗时短;回收装置简单,成本低廉,可进行商品化开发。 展开更多
关键词 DNA回收 凝胶过滤装置 蜜蜂磷酸甘油醛异构酶基因 桑树低温诱导基因
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cDNA Cloning and Bioinformatic Prediction of TPI Gene from Apis mellifera
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作者 王琦 李玮妮 王荣 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第5期1097-1100,1126,共5页
[Objective] The aim was to clone triosephosphate isomerase (TPI) gene from Apis mellifera, and predict the properties of TPI protein with bioinformatic meth- ods. [Method] The TPI gene was firstly cloned by in silic... [Objective] The aim was to clone triosephosphate isomerase (TPI) gene from Apis mellifera, and predict the properties of TPI protein with bioinformatic meth- ods. [Method] The TPI gene was firstly cloned by in silico cloning based on the ex- pressed sequence tags (ESTs) from Unigene of NCBI. Some characters of the TPI protein including hydrophobicity or hydrophilicity, isoelectric point (pl) and secondary structure were analyzed and predicted by the tools of bioinformatics. [Result] The TPI gene from A. mellifera was 1 768 bp in full length and it contained a complete ORF which encoded 247 amino acids; the pl of TPI protein was 8.515; the TPI protein was a member of ~13-fold family. [Conclusion] The in silico cloning based on the expressed sequence tags is a efficient method in practice, and this study will provide more references for further study on A. mellifera at molecular level. 展开更多
关键词 Apis mellifera In silico cloning Triosephosphate isomerase (TPI) BIOINFORMATICS
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