磷酸肌醇磷脂酶C在DREB2表达调控中的作用

环境胁迫对植物的生长不利。转录因子DREB2对干旱、高温、低温等非生物胁迫应答基因的表达具有重要的调控作用。磷酸肌醇磷脂酶C对DREB2基因有双向调节机制。深入了解DREB2和磷酸肌醇磷脂酶C的研究进展及其在生物工程上的应用,以及磷酸肌醇磷脂酶C对DREB2基因的表达调控机理,可以为磷酸肌醇磷脂酶C和DREB2基因在提高植物胁迫耐受性中的利用提供基础。

杨树磷酸肌醇特异性磷脂酶C基因家族鉴定与分析

为了对已测序杨树Populus trichocarpa Torr.＆Gray中磷酸肌醇特异性磷脂酶C（phosphoinositidespecific phospholipase C,PI-PLC）家族基因进行系统分析,利用杨树基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定杨树PI-PLC家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过蛋白序列比对进行进化和分类分析。结果表明,杨树中含有7个PI-PLC家族基因,含有8-10个外显子,分布于杨树的4条染色体上。MEME和Pfam保守结构域分析显示,杨树PI-PLC蛋白均含有4个保守的EF、X、Y和C2结构域。蛋白质进化树分析结果表明PI-PLC可分为2个亚家族。

桃磷酸肌醇特异性磷脂酶C基因家族鉴定与分析

为了对桃(Prunus persica var.Lovell)中PI-PLC家族基因进行系统分析,利用桃基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定桃PI-PLC家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过序列比对进行进化和分类分析。结果表明,桃中含有5个PI-PLC家族基因,预测他们均含有9个外显子,分布于桃的2条染色体上。保守结构域分析结果显示,桃中PI-PLC蛋白均含有4个保守的EF、X、Y和C2结构域。进化树分析结果表明桃PI-PLC家族基因可分为4个亚家族。

兰花磷酸肌醇特异性磷脂酶C基因家族生物信息学分析

【目的】为研究兰花(Phalaenopsis equestris)中PI-PLC基因家族各成员在兰花中的生理功能。【方法】利用兰花基因组数据库,经过生物信息学分析,获得兰花PI-PLC基因家族成员的基因结构、染色体定位和编码蛋白,经过多重序列比对进行进化和分类分析。【结果】结果表明:兰花基因组中含有3个PI-PLC家族基因成员,分别含有9~13个外显子。TMHMM跨膜区结构分析显示,兰花PI-PLC蛋白均不含有跨膜区;MEME保守结构域分析显示,兰花PI-PLC蛋白均含有4个保守的EF、X、Y和C2结构域。【结论】以上结果对解析兰花PI-PLC蛋白的生物学功能提供重要的线索。

毛白杨(BJHR01)磷酸肌醇特异性磷脂酶C(PLC2)基因生物信息学分析

[目的]用生物信息学手段分析、预测毛白杨PLC2基因/蛋白质的结构与特征,为该基因的克隆及功能研究提供理论参考。[方法]以PLC2基因及对应蛋白质为研究对象,利用各种网上数据库及生物信息学分析软件对其进行相关分析、预测。[结果]PLC2基因的GenBank登录号为JX424764.1,ORF长957bp,编码318个氨基酸,对应蛋白质PLC2的分子量35 999.1D,理论等电点7.07;PLC2与毛果杨(XP_002313726.1)的同源性较高;PLC2属于PI-PLCc_GDPD_SF超家族,无O-糖基化位点,无二硫键,无跨膜区和信号肽,有16个磷酸化位点。[结论]对PLC2基因/蛋白的各级结构及功能进行预测,为下一步试验奠定基础。

基于PLC/IP3通路探讨岩黄连对新生儿高胆红素血症大鼠听觉系统损伤的影响

目的探讨岩黄连Corydalis saxicola对新生儿高胆红素血症(neonatal hyperbilirubinemia,NH)大鼠磷脂酶C(phospholipase C,PLC)/磷酸肌醇(inositoltriphosphate,IP3)通路及听觉系统损伤的影响。方法取7d龄SD大鼠50只,用随机数字表法分为对照组、模型组及岩黄连低、中、高剂量(40、80、160mg/kg)组,每组10只;除对照组ip生理盐水外,其余各组大鼠均按200μg/g的剂量ip胆红素建立NH大鼠模型。造模后,对照组和模型组ig给予10 mL/kg的生理盐水,岩黄连各剂量组ig给予相应剂量的岩黄连提取物,各组均给药1 d,3次/d。末次给药2 h后,观察大鼠一般行为状况,检测脑干听觉诱发电位(auditory brainstem response,ABR)和血清及脑干组织胆红素含量;HE染色观察耳蜗核组织病理变化;免疫组化染色法观察耳蜗核组织钙素(calcium,CaM)活性;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测脑干组织磷酸化PLC(p-PLC)、IP3蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠出现烦躁等神经异常行为,耳蜗核组织可见神经细胞肿胀等病理损伤,ABR阈值、耳蜗核组织CaM阳性表达率、血清及脑干组织胆红素含量升高(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ波潜伏期明显延长(P<0.05),脑干组织p-PLC、IP3蛋白表达降低(P<0.05);与模型组相比,岩黄连低、中、高剂量大鼠上述神经异常行为及耳蜗核组织病理损伤得到缓解,ABR阈值、耳蜗核组织CaM阳性表达率、血清及脑干组织胆红素含量降低(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ波潜伏期明显缩短(P<0.05),脑干组织p-PLC、IP3蛋白表达升高(P<0.05),且岩黄连发挥的作用呈剂量相关性。结论岩黄连可激活NH大鼠耳蜗核组织PLC/IP3通路蛋白表达,减轻胆红素对耳蜗核听力神经系统的毒害,改善NH大鼠听觉。

天香丹胶囊通过调节G蛋白偶联雌激素受体保护心肌缺血再灌注损伤

目的探讨天香丹胶囊(TXD)对预处理去卵巢雌性合并心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用与其可能机制。方法将60只SD雌性大鼠摘去卵巢后随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、低、中、高3个剂量实验组,每组10只。阳性对照组灌胃0.8 mg·kg^(-1)雌二醇溶液,低、中、高剂量实验组分别灌胃给予0.2、0.4和0.8 g·kg^(-1)天香丹溶液,假手术组、模型组灌胃等量双蒸水。连续处理60 d。末次给药12 h后建立心脏缺血再灌注模型;其中假手术组只穿线不结扎,另取10正常SD雌性大鼠为正常组(不做任何处理)。用酶联免疫吸附试验法检测血清中大鼠心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、三磷酸肌醇(IP3)的含量;用微量法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH);用MTB微板法检测心肌组织中Ca^(2+)浓度;用苏木精-伊红染色检测大鼠心肌组织病理变化;用蛋白质印迹法检测心肌组织中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)、磷脂酶C(PLC-β)、三磷酸肌醇受体(IP3R)以及肌浆网钙ATP酶(SERCA2)蛋白表达水平。结果正常组、假手术组、模型组、阳性对照组和高剂量实验组的血清中CK-MB活性表达分别为(64.88±4.70)、(65.86±4.40)、(161.40±10.97)、(78.31±6.64)和(79.62±7.43)pg·mL^(-1);Ca^(2+)浓度分别为(3.20±0.11)、(3.41±0.12)、(5.05±0.15)、(4.10±0.12)和(4.18±0.18)mmol·L^(-1);模型组与假手术组比较,高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。正常组、假手术组、模型组、阳性对照组和高剂量实验组的GPER蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06、0.73±0.04、0.36±0.03、0.67±0.06和0.65±0.05;模型组与假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);阳性对照组、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论TXD对I/R大鼠心肌损伤有保护作用,可能与调节GPER/PLC/IP3R通路有关。