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利用转座子标签法构建埃氏巨型球菌乙酸生成关键酶基因缺失工程菌 被引量:3
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作者 杨文艳 刘国文 +3 位作者 崔晓霞 逄晓阳 冯海华 王哲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期669-672,共4页
应用转座子标签法,通过转座子供体菌E.coliS17-1/pZJ25∷Tn5对受体菌埃氏巨型球菌进行转座子诱变,采用含卡那霉素和氟乙酸钠的选择性培养基筛选接合子,共筛选出稳定的对卡那霉素和氟乙酸具有抗性的转座工程菌9株。对埃氏巨型球菌的突变... 应用转座子标签法,通过转座子供体菌E.coliS17-1/pZJ25∷Tn5对受体菌埃氏巨型球菌进行转座子诱变,采用含卡那霉素和氟乙酸钠的选择性培养基筛选接合子,共筛选出稳定的对卡那霉素和氟乙酸具有抗性的转座工程菌9株。对埃氏巨型球菌的突变株进行16SrRNA和Tn5的PCR鉴定,及乙酸激酶(AK)和磷酸转乙酰酶(PTA)酶比活力分析,确定突变株属于pta基因缺失型氟乙酸抗性菌株。 展开更多
关键词 埃氏巨型球菌 座子 磷酸转乙酰酶 酸激
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谷氨酸棒状杆菌乙酸盐代谢PTA、AK、ICL和MS酶活性研究 被引量:3
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作者 阮红 宣日荣 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期529-533,共5页
从谷氨酸棒状杆菌乙酸盐代谢中涉及的磷酸转乙酰酶PTA、乙酸盐激酶AK、异柠檬酸裂解酶ICL和苹果酸合成酶MS 4种酶入手,建立了一套稳定的酶活性测定方法,并对这些酶在葡萄糖和乙酸盐不同碳源代谢中的酶活性特征进行了比较分析,发现碳代... 从谷氨酸棒状杆菌乙酸盐代谢中涉及的磷酸转乙酰酶PTA、乙酸盐激酶AK、异柠檬酸裂解酶ICL和苹果酸合成酶MS 4种酶入手,建立了一套稳定的酶活性测定方法,并对这些酶在葡萄糖和乙酸盐不同碳源代谢中的酶活性特征进行了比较分析,发现碳代谢中存在葡萄糖效应;乙酸盐对谷氨酸棒状杆菌PTA、AK、ICL和MS酶活性有明显的诱导作用. 展开更多
关键词 谷氨酸棒状杆菌 酸盐代谢 磷酸转乙酰酶 酸盐激 异柠檬酸裂解 苹果酸合成 活性 测定方法 碳代谢 葡萄糖效应 诱导作用
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克鲁氏梭状芽孢杆菌的研究进展 被引量:5
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作者 丁雪松 赵辉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期401-405,共5页
克鲁氏梭状芽孢杆菌在厌氧条件下产己酸,将其应用于浓香型白酒发酵,可使其主体香己酸乙酯更加突出。克氏梭菌在厌氧条件下代谢产生的心肌黄酶、磷酸转乙酰酶、醛脱氢酶、硫解酶可作为生化试剂、酮体中毒的解毒酶、还可以降解石油烃污染... 克鲁氏梭状芽孢杆菌在厌氧条件下产己酸,将其应用于浓香型白酒发酵,可使其主体香己酸乙酯更加突出。克氏梭菌在厌氧条件下代谢产生的心肌黄酶、磷酸转乙酰酶、醛脱氢酶、硫解酶可作为生化试剂、酮体中毒的解毒酶、还可以降解石油烃污染物,应用于生物燃料电池、生物传感器等。重点阐述克氏梭菌产酸条件及这些酶类在性质及用途等方面的国内外研究进展。 展开更多
关键词 克氏梭菌 心肌黄 磷酸转乙酰酶 醛脱氢 硫解
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Construction of Deficient Strain by Selenomonas ruminantium Mutant with the Acetic Acid and Analysis on Its Related Enzyme Activity
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作者 苑学 逄晓阳 +1 位作者 刘国文 王哲 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第8期1226-1229,共4页
[Objective]The research aimed to construct deficient strain generated by Selenomonas ruminantium mutant with the acetic acid and analyze its fermentation characteristics.[Method]Based on the transposon tagging method,... [Objective]The research aimed to construct deficient strain generated by Selenomonas ruminantium mutant with the acetic acid and analyze its fermentation characteristics.[Method]Based on the transposon tagging method,Selenomonas ruminantium(recipient strain)was carried out the transposon mutagenesis via the transposon donor strain E.coli S17-1/pZJ25∷Tn5.The zygote was screened by using the selective medium which included kanamycin and sodium fluoroacetate.[Result]Seven transposon engineered strains which had the stable resistance to kanamycin and fluoroethanoic acid were screened.Selenomonas ruminantium mutant was carried out 16S rRNA and Tn5 PCR identification.Moreover,the specific activities of AK and PTA were analyzed.The mutant belonged to fluoroethanoic acid resistance strain with pta gene deficiency.[Conclusion]The research laid the foundation for further studying the cellular metabolic network and regulation of acetic acid in rumen microorganism of ruminant animal. 展开更多
关键词 Selenomonas ruminantium TRANSPOSON PTA AK
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amrG1基因在谷氨酸棒杆菌乙酸活化中的作用 被引量:1
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作者 阮红 R.Gerstmeir +1 位作者 S. Schinke B.J. Eikmanns 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2004年第3期223-231,共9页
谷氨酸棒杆菌Corynebacteriumglutamicum可以利用乙酸为碳源和能源进行生长.乙酸代谢中涉及乙酸活化的两个酶为磷酸转乙酰酶PTA和乙酸激酶AK,它们是由pta-ack操纵子经诱导表达产生的.采用转座子挽救法,我们从调控突变株C.glutamicumG25... 谷氨酸棒杆菌Corynebacteriumglutamicum可以利用乙酸为碳源和能源进行生长.乙酸代谢中涉及乙酸活化的两个酶为磷酸转乙酰酶PTA和乙酸激酶AK,它们是由pta-ack操纵子经诱导表达产生的.采用转座子挽救法,我们从调控突变株C.glutamicumG25中获得了amrG1和amrG2两个目标基因.经分析鉴定,amrG1基因(NCBIGenBank接受号为AF532964)可能参与乙酸代谢调控,编码作用于pta-ack操纵子的一个调控因子.该调控因子基因序列全长732bp,开放阅读框含有243个氨基酸,分子量约为27kD.通过基因定点缺失和过量表达技术,在谷氨酸棒杆菌野生型菌株中分别构建了amrG1基因缺失菌株和表达菌株,并研究了它们在含有葡萄糖和/或乙酸不同碳源的基本培养基上生长时产生的PTA和AK酶活性特征.酶活性测定结果发现其中的amrG1基因缺失菌株和表达菌株存在着与野生型菌株不同的一系列酶学特征,分析显示:以野生型菌株为对照,amrG1基因缺失菌株在含有葡萄糖碳源的培养基上生长时表现出较高的PTA和AK酶活性,并且在葡萄糖和乙酸两种碳源上生长时表现出与乙酸碳源上生长时几乎同样的PTA和AK酶活性;amrG1基因过量表达对葡萄糖碳源上生长产生的PTA和AK酶活性有一定程度的抑制,即表现出与基因缺失情况相反的调控效应.根据以上结果分析。 展开更多
关键词 amrGl基因 谷氨酸棒杆菌 酸活化 磷酸转乙酰酶 酸激 氨基酸工业
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