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菠菜磷酸丙糖转移蛋白在烟草中正义及反义表达及其对碳水化合物转运的影响 被引量:1
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作者 刘晗 赵恢武 +3 位作者 陈杨坚 胡鸢雷 高音 林忠平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期703-707,共5页
以菠菜 (SpinaciaoleraceaL .)为材料 ,取幼叶分离mRNA ,反转录合成cDNA ,以cDNA第一链为模板 ,通过PCR扩增 ,获得菠菜磷酸丙糖转移蛋白 (Triosephosphatetranslocator,TPT)cDNA目的片段。对其进行序列分析 ,结果表明 ,分离的目的片段... 以菠菜 (SpinaciaoleraceaL .)为材料 ,取幼叶分离mRNA ,反转录合成cDNA ,以cDNA第一链为模板 ,通过PCR扩增 ,获得菠菜磷酸丙糖转移蛋白 (Triosephosphatetranslocator,TPT)cDNA目的片段。对其进行序列分析 ,结果表明 ,分离的目的片段核苷酸序列与文献报道相比同源率为 99 9% ,只有 1个碱基发生改变。将得到的菠菜tptcDNA与CaMV 35S启动子和NOS 3′终止子融合 ,分别构建了正义及反义表达载体。通过根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导转化烟草 (NicotianatabacumL .) ,在含有卡那霉素的抗性筛选培养基上再生的植株经PCR及Southern杂交检测 ,证明tpt基因已整合到烟草基因组上 ,菠菜丙糖磷酸转移蛋白基因导入烟草后使叶绿体中TPT的含量表现出明显差异 ,并导致烟草光合作用产物分配的变化 ,表现在叶绿体中淀粉含量的改变。 展开更多
关键词 磷酸丙糖转移蛋白 转基因植物 碳水化合物 表达
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大河乌猪磷酸酯转移蛋白基因内含子4的SNPs检测及其与生产性能的关联分析
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作者 李福泉 杨文 +2 位作者 郭斌 霍金龙 史宪伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期143-148,共6页
本研究旨在阐明猪磷酸酯转移蛋白(phospholipid transfer protein,PLTP)基因第4内含子多态性及其与生长性状之间的关系。结果表明,该位点具有2种等位基因A/a,F4、F5、F6各群体中的基因频率分别为0.4172/0.5828、0.4155/0.5845、0.4309/0... 本研究旨在阐明猪磷酸酯转移蛋白(phospholipid transfer protein,PLTP)基因第4内含子多态性及其与生长性状之间的关系。结果表明,该位点具有2种等位基因A/a,F4、F5、F6各群体中的基因频率分别为0.4172/0.5828、0.4155/0.5845、0.4309/0.5691。取不同基因型纯合子样品进行测序,共发现4个单核苷酸多态位点(SNPs),其有3个突变为转换,1个为颠换,多态位点分别为1085、1192、1286和1305bp。应用最小二乘模型分析不同基因型对生长性状(初生重、45日龄体重、4月龄体重及6月龄体重、体高、体长、管围、背膘厚)的影响。结果显示,F4代各性状基因型间差异不显著(P>0.05);F5代Aa基因型个体初生重及背膘厚显著高于AA基因型(P<0.05),与aa基因型个体间差异不显著(P>0.05);F6代aa基因型个体4月龄体重及Aa基因型个体6月龄管围都极显著高于AA基因型(P<0.01),aa基因型个体6月龄体高显著高于AA基因型(P<0.05),Aa基因型个体初生重显著高于AA基因型(P<0.05)。另外,Aa基因型的雌性个体对初生重及膘厚性状的影响较AA基因型高(P<0.05);Aa基因型雄性个体对管围性状的影响较AA基因型高(P<0.01)。研究结果提示猪PLTP基因Aa基因型对生长性状有着重要的影响,该SNP可能是改良猪经济性状的重要分子标记位点。 展开更多
关键词 大河乌猪 磷酸转移蛋白 PCR—RFLP 生产性能
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与蓖麻果刺性状连锁的RAPD标记 被引量:4
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作者 黄凤兰 赵永 +5 位作者 彭木 张智勇 陈晓凤 包春光 邹千稳 吴春桃 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期83-88,共6页
为探讨蓖麻果刺性状相关分子机理,以9个果实有刺和5个果实无刺的蓖麻为研究对象,对蓖麻果刺性状进行RAPD分析,结果表明:用单因素法优化后的蓖麻果刺相关性状的RAPD-PCR反应体系为Taq polymerase0.9μL、10×Buffer 2.5μL、dNTP 2.5... 为探讨蓖麻果刺性状相关分子机理,以9个果实有刺和5个果实无刺的蓖麻为研究对象,对蓖麻果刺性状进行RAPD分析,结果表明:用单因素法优化后的蓖麻果刺相关性状的RAPD-PCR反应体系为Taq polymerase0.9μL、10×Buffer 2.5μL、dNTP 2.5μL、Mg2+1.3μL、SBS126号Primer 1.4μL、DNA 1.4μL、ddH2O 15.0μL,Total25μL;优化后的反应条件为94℃4 min 30 s;94℃45 s,38℃45 s,72℃45 s,35个循环;72℃5 min;4℃保存。利用优化后的反应体系与反应条件,在果实有刺材料中得到了约1 800 bp的片段,测序结果表明,9个材料的条带上游同源性非常差,但是距离下游约28 bp之前有长度为112 bp的序列完全相同,推断蓖麻果实有刺性状的发育可能与包含组氨酸的磷酸转移蛋白2有关。 展开更多
关键词 蓖麻 果刺 RAPD 磷酸转移蛋白
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Hepatitis C Virus non-structural 5A abrogates signal transducer and activator of transcription-1 nuclear translocation induced by IFN-α through dephosphorylation 被引量:4
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作者 Guo-Zhong Gong Jie Cao Yong-Fang Jiang Yang Zhou Bo Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第30期4080-4084,共5页
AIM: To study the effect of Hepatitis C virus nonstructural 5A (HCV NSSA) on IFNα induced signal transducer and activator of transcription-1 (STAT1) phosphorylation and nuclear translocation.METHODS: Expression... AIM: To study the effect of Hepatitis C virus nonstructural 5A (HCV NSSA) on IFNα induced signal transducer and activator of transcription-1 (STAT1) phosphorylation and nuclear translocation.METHODS: Expression of STAT1 Tyr701 phosphorylation at different time points was confirmed by Western blot, and the time point when p-STAT1 expressed most, was taken as the IFN induction time for further studies. Immunocytochemistry was used to confirm the successful transient transfection of NS5A expression plasmid. Immunofluorescene was performed to observe if there was any difference in IFNα-induced STAT1 phosphorylation and nuclear translocation between HCV NSSA-expressed and non-HCV NSSA-expressed cells. Western blot was used to compare the phosphorylated STAT1 protein of the cells.RESULTS: Expression of HCV NS5A was found in the cytoplasm of pCNS5A-transfected Huh7 cells, but not in the PRC/ CMV transfected or non-transfected cells, STAT1 Tyr701 phosphorylation was found strongest in 30 min of IFN induction, STAT1 phosphorylation and nuclear import were much less in the presence of HCV NS5A protein in contrast to pRC/CMV-transfected and non-transfected cells under fluorescent microscopy, which was further confirmed by Western blot.CONCLUSION: HCV NSSA expression plasmid is successfully transfected into Huh7 cells and HCV NS5A protein is expressed in the cytoplasm of the cells. IFN-α is able to induce STAT1 phosphrylation and nuclear translocation, and this effect is inhibited by HCV NS5A protein, which might be another possible resistance mechanism to interferon alpha therapy. 展开更多
关键词 Hepatitis C virus nonstructural protein 5A IFN-Α Signal transducer and activator of transcription (STAT1) PHOSPHORYLATION Nuclear translocation
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Phosphatase of Regenerating Liver and Its Association with Tumors
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作者 Yuqiong Liu Huixiang Li 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2007年第3期216-222,共7页
Protein kinases and protein phosphatases play key roles in regulating functions of diverse proteins which control numerous essential events in eukaryotes, such as transcriptional regulation, apoptosis, cell cycle prog... Protein kinases and protein phosphatases play key roles in regulating functions of diverse proteins which control numerous essential events in eukaryotes, such as transcriptional regulation, apoptosis, cell cycle progression, protein degradation and protein trafficking. Protein kinases transfer a phosphate from ATP to a specific residue(s), typically at serine, threonine, or tyrosine, in proteins, while phosphatases remove phosphoryl groups from proteins. Such a phosphorylation-dephosphorylation cycle can be regarded as a molecular "on-off" switch. It is estimated that the human genome contains over 2,000 kinases and 1,000 phosphatases. A very large number of protein kinases has been identified and studied in detail, and more and more, information concerning protein phosphatases has emerged recently. 展开更多
关键词 PHOSPHATASE TUMOR METASTASIS PTP
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