磷酸醇胺的制备及其在低硬度强腐蚀性高温采暖水配方中的应用

低硬度、强腐蚀性高温水的腐蚀问题是一个较难解决的问题。试验发现在一个由ＨＥＤＰ、Ｚｎ２＋等常用水处理剂组成的复合配方中，加入少量的磷酸醇胺能极大地提高复合药剂的缓蚀性能。磷酸醇胺本身亦有很好的缓蚀性能，且与ＨＥＤＰ、Ｚｎ２＋等常用水处理剂有明显的协同缓蚀作用。

植物的磷酸乙醇胺甲基转移酶

磷酸乙醇胺甲基转移酶(PEAMT)是催化磷酸乙醇胺(P-EA)甲基化,最终合成磷酸胆碱(P-Cho)的关键酶。文章就近年来植物中PEAMT的结构、性质、功能、表达特性、分子生物学和基因工程的研究进展作了概述。

海水中磷酸三乙醇胺-磷酸二氢盐对钢铁的缓蚀作用

磷酸三乙醇胺-磷酸二氢盐浓度为135×10-4％～225×10－4％时能在天然海水中的钢铁表面形成一层化学稳定性好的保护膜，能有效地抑制钢铁的海水腐蚀，缓蚀率高达99．49％，具有使用浓度低，缓蚀率高，原材料价廉易得，无毒，无污染等特点。

单乙醇胺磷酸酯的合成

以乙醇胺、磷酸为原料,经酯化反应合成了单乙醇胺磷酸酯。研究了影响反应的因素,优化了反应条件。酯化反应的最优条件为:n(乙醇胺)∶n(磷酸)=1.0∶1.4,回流反应5 h。经减压蒸馏除去溶剂癸烷得粗产品,收率达94.0%。再用90%乙醇纯化得目标产品。回收率95.0%。对目标产品进行熔点测定、元素分析和红外光谱表征,可确认该产品为标题化合物。该产品长期依赖进口,该方法已扩大试验,有待实现工业化。

豚鼠心脏CDP-乙醇胺磷酸转移酶的动力学研究

为探讨不同的二价基甘油对三种乙醇胺甘油磷脂生物合成能力的影响,通过对豚鼠乙醇胺磷酸转移酶动力学研究,发现磷脂酰乙醇胺的合成可被1-烷基-2-脂酰甘油和1-烯醚基-2-脂酰甘油抑制,而缩醛磷脂酰乙醇胺的生成不受1,2-二脂酰甘油影响,并提示不同的二价基甘油对乙醇胺磷酸转移酶的抑制作用呈非竞争性抑制,此有利于对三种乙醇胺磷脂酰甘油生物合成的相互协调作用。

植物磷酸乙醇胺甲基转移酶的生物信息学分析

运用生物信息学的方法,对已在Genbank数据库中注册的菠菜、甜菜、拟南芥、陆地棉和辽宁碱蓬等中磷酸胆碱合成的关键酶磷酸乙醇胺甲基转移酶(PEAMT)的氨基酸序列进行分析。结果显示:植物PEAMT属于稳定蛋白质,含有较丰富的赖氨酸和亮氨酸;不同植物PEAMT的氨基酸序列具有较高的同源性,含有与SAM结合的保守结合域及Tyr-His氨基酸对;植物PEAMT属于胞质酶,不与膜结合;分子进化研究表明PEAMT可作为植物遗传分化和分子进化研究的重要依据;氨基酸序列中不存在信号肽;分子中不存在跨膜结构域,可能受蛋白激酶C的磷酸化;无规则卷曲是多肽链中的主要结构元件;蛋白质保守区域包含两个AdoMet-MTase区域,属于典型的SAM依赖性甲基转移酶功能结构域。本研究还初步构建了菠菜PEAMT的三维模型,能够认识植物中PEAMT的特异性及催化分子机制,并为通过分子改造创造出具有更强抗逆效能的PEAMT提供理论参考。

盐角草磷酸乙醇胺N-甲基转移酶基因(SePEAMT)启动子的克隆及瞬时表达

磷酸胆碱是合成磷脂酰胆碱和甘氨酸甜菜碱的重要前体,磷酸乙醇胺N-甲基转移酶(PEAMT)是磷酸胆碱合成的关键酶。根据已知的SePEAMT cDNA5′端序列设计2个基因特异的反向引物(PP1,PP2),通过锚定PCR获得了PEAMT起始密码子上游1249bp的序列。RLM-RACE反应确定其转录起始位点A位于起始密码子上游301bp处,由此获得了948bp的SePEAMT启动子序列。PlantCARE和PLACE在线启动子预测工具分析表明:该序列除了含有启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box外,还含有一些胁迫诱导元件(如ABRE、HSE、LTR)和花粉特异的激活元件AGAAA。构建了SePEAMT启动子与报告基因GUS融合的表达载体pPro,并通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,染色结果表明SePEAMT启动子可以有效地驱动GUS基因的瞬时表达。

纸用阻燃剂三乙醇胺三(磷酸二苯酯)的合成及其性能研究

以二苯氧基磷酰氯和三乙醇胺为原料,通过一步反应合成纸用阻燃剂三乙醇胺三(磷酸二苯酯),采用单因素法研究了物料比、反应时间对阻燃剂得率的影响,表征了阻燃剂的分子结构,并将其应用于纸张的阻燃。结果表明,原料三乙醇胺和二苯氧基磷酰氯的摩尔比为1∶3.0、反应温度为50℃、反应10 h时,产品总得率为92%。将纸张浸渍在阻燃剂中24 h时,纸张的综合性能最佳:氧指数为26.8%,达到难燃级别;燃烧性能测试达合格标准;阻燃性达防焰2级。

三乙醇胺磷酸酯铵盐阻燃整理织物的性能研究

探讨三乙醇胺磷酸酯铵盐阻燃整理对棉织物性能的影响。采用自制阻燃剂三乙醇胺磷酸酯铵盐对棉织物进行阻燃整理。测定了阻燃整理棉织物的特征红外吸收峰、表面形貌、热稳定性、燃烧性能及耐水洗性。结果表明:与未整理棉织物相比,整理织物的损毁长度下降至3.7 cm,600℃时织物的热解残炭量提高了25.15个百分点,整理织物能明显观察到由阻燃剂引起的新特征峰,整理织物经20次标准洗涤后仍具有较好的热稳定性。认为:三乙醇胺磷酸酯铵盐阻燃整理棉织物具有较好的应用价值。

基于分子对接的虚拟筛选发现磷酸乙醇胺甲基转移酶抑制剂

目的:运用分子对接从生物碱数据库中筛选具有磷酸乙醇胺甲基转移酶(phosphoethanolamine methyltransferase, PEAMT)抑制活性的成分。方法:以PEAMT为药物靶标,利用相似性筛选、分子对接技术、类药性评估等多轮筛选策略,从生物碱化合物数据库中挖掘命中分子,并运用AutoDock Vina、PyMOL及LigPlus软件探索命中分子与靶点蛋白的结合方式和亲和力。结果:通过相似性虚拟筛选,共获得100个小分子,进行分子对接保留了结合能低于阈值的5个分子,其中4个分子符合Lipinski’s Rule,分别为匹格列酮、5’-腺苷酸、异鸟苷和腺苷,其中吡格列酮和5’-腺苷酸与PEAMT具有较高的结合亲和力,且作用方式与原晶体复合物相似,为最佳命中分子。结论:相似性筛选和分子对接的虚拟筛选策略可为松材线虫PEAMT抑制剂的开发提供研究方向。

磷酸乙醇胺转移酶MCR1结构与功能的研究

本实验克隆了来源于E.coli的MCR1基因酶催化结构域,以E.coli表达系统表达蛋白.采用亲和层析、阴离子交换层析、分子筛层析等纯化方法获得纯度高、均一性好的蛋白;采用座滴和悬滴法,获得酶催化区域的蛋白质晶体;收集X射线数据后,分子置换法解析出酶催化区域的结构,其分辨率达到1.63埃.反常散射信号检测到4个锌离子信号,结构分析锌离子与周围Thr285、His465、His466、His395位氨基酸联系紧密,且Thr285被磷酸化.Thr285、His465、His466和His395点突变为丙氨酸后,宿主菌粘菌素抗性显著降低,表明该区域与酶活密切相关.本实验解析出MCR1酶活性区域的结构,鉴定出酶活性中心,为寻找抗MCR1靶向药物提供可用信息.

氨基磷酸盐防火玻璃的研制

设计出一种氨基磷酸盐阻燃聚合物,其组成为乙醇胺磷酸盐、季戊四醇、氯化钠(氯化镁)、丙烯酰胺和耐紫外线交联剂。聚合物固化采用亚硫酸钠、过硫酸铵的氧化还原体系。以此阻燃聚合物研制出一种高透明度、耐热、耐寒、耐紫外线辐照和耐火极限长的防火玻璃。

两种二甲叉磷酸衍生物的合成

以乙醇胺和3-氨甲基吡啶为原料分别与甲醛和亚磷酸通过Manich反应合成了乙醇胺二甲叉磷酸和3-氨甲基吡啶二甲叉磷酸,并对乙醇胺二甲叉磷酸的合成条件进行了探讨研究,最终确定了其最佳合成条件:当乙醇胺:亚磷酸:甲醛=1∶2∶3.5(摩尔比),反应温度为100℃,回流时间为3 h时,产品的收率(以乙醇胺计)为77.3%,以同样方法合成的3-氨甲基吡啶二甲叉磷酸的收率(以3-氨甲基吡啶计)为80.1%.产物通过红外光谱、^(31)P-NMR谱、~1H-NMR谱和元素分析方法进行了表征.

盐穗木HcPEAMT基因的克隆及表达分析

依据盐穗木编码PEAMT的EST序列设计引物,通过快速扩增cDNA末端技术,获得盐穗木磷酸乙醇胺甲基转移酶(phosphoethanolamine N-methyltransferase,PEAMT)全长cDNA,命名为HcPEAMT。序列分析表明HcPEAMT基因开放阅读框为1 482bp,编码494个氨基酸,推测分子量为56.3kD,理论等电点为5.51。保守结构域分析表明,HcPEAMT含有2个独立的S-腺苷甲硫氨酸依赖性甲基转移酶的保守结构域,每个结构域含有4个基序。系统进化树分析确认HcPEAMT与盐生植物盐角草的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析表明,盐胁迫3h时,盐穗木同化枝和根中HcPEAMT基因的表达迅速上调并达到最大值,分别为对照的4.3倍和6.7倍。脱落酸(ABA)胁迫3h时,同化枝中HcPEAMT的表达量达到最高,而根中HcPEAMT的表达在12h才达到最高,表达量分别为对照的2.6和2.5倍。研究结果表明,HcPEAMT基因表达受盐胁迫的强烈诱导,也受ABA胁迫的诱导。该研究结果有助于阐明HcPEAMT基因表达与植物抗逆性的相关性。

纯棉织物的磷氮膨胀型阻燃整理

以双三羟甲基丙烷、三氯氧磷和乙醇胺为原料，合成膨胀型阻燃剂双三羟甲基丙烷磷酸酯乙醇胺盐，并对纯棉织物进行阻燃整理；探讨了阻燃剂质量浓度、整理液pH值、焙烘温度、焙烘时间对纯棉织物阻燃效果和断裂强力、白度的影响。纯棉织物较佳阻燃整理工艺为：阻燃剂质量浓度250gm、整理液pH值6～7、焙烘温度100℃、焙烘时间3min，阻燃棉织物达到阻燃B1级，断裂强力和白度保持较好。经红外光谱、热重、扫描电镜分析表明：阻燃棉的燃烧残余物仍以纤维状态存在，其失重温度降低，残炭量是未整理纯棉的两倍，阻燃剂具有膨胀功能。

福氏志贺菌O-抗原磷酸乙醇胺修饰特异抗血清的制备

目的制备针对福氏志贺菌O-抗原磷酸乙醇胺(PEtN)修饰的抗血清。方法用血清型Yv菌株036_Yv(O-抗原PEtN修饰)免疫兔子制备抗血清,用036_Yv的宿主菌036(O-抗原无PEtN修饰)吸附后,制备针对O-抗原PEtN修饰的特异抗血清,并用135株福氏志贺菌检测血清的特异性。结果制备的血清能够特异地与O-抗原存在PEtN修饰的福氏志贺菌发生凝集,效价为1∶32;除了O-抗原携带PEtN修饰的福氏志贺菌血清型Xv,Yv和4av外,制备的血清不能与其他血清型发生交叉凝集,具有很好的特异性。结论成功制备了针对福氏志贺菌O-抗原PEtN修饰的特异抗血清,可应用于痢疾检测和监测。

枸杞胆碱合成关键酶基因PEAMT的克隆及生物信息学分析

利用RT-PCR和RACE结合的方法,获得了枸杞磷酸乙醇胺N-甲基转移酶PEAMT基因cDNA全序列(命名为LbPEAMT)。LbPEAMTcDNA全长1 863bp,开放读码框1 497bp,编码一个由498个氨基酸构成的多肽,理论分子量为56.53kDa,等电点pI为5.50。通过多种序列比对,该基因编码的氨基酸序列与番茄PEAMT氨基酸的相似性为93%。二级结构预测LbPEAMT蛋白由44.98%的α-螺旋、17.67%的延伸链、6.63%的β-转角和30.72%的不规则卷曲组成。LbPEAMT是一个亲水蛋白。含有2个S-腺苷甲硫氨酸依赖催化活性结构域,分别位于N端65-164aa和C端290-392aa。每个活性区都包含有4个部分基序,分别为I、post I、post II和post III。LbPEAMT的这2个活性区在蛋白、磷脂和小分子甲基转移酶中都是相对保守的。

植物磷酸乙醇胺N-甲基转移酶的研究进展

甘氨酸甜菜碱是一种渗透调节物质,能够维持高盐浓度下细胞的渗透平衡和膜的有序性,并有效地稳定酶的结构;胆碱是甘氨酸甜菜碱生物合成的必要前体物质,而磷酸乙醇胺甲基转移酶(phosphoethanolamine N-methyltransferase,PEAMT)作为甲基转移酶,是催化磷酸乙醇胺三次甲基化生成胆碱的限速酶。近年来研究表明磷酸乙醇胺甲基转移酶不仅在植物生长发育过程发挥作用,而且通过参与渗调物质甜菜碱以及胁迫相关第二信使磷脂酸的合成从而使植物对盐胁迫产生应答反应。本文就植物磷酸乙醇胺甲基转移酶的反应作用机理、生物学功能及表达调控机制进行了归纳总结。

植物甜菜碱合成相关酶及其基因工程研究进展

甜菜碱(Glybet)是植物体中起着无毒渗透保护作用的最主要的细胞相溶性物质,许多高等植物在干旱、盐碱和低温等不利环境下,在细胞中会积累大量甜菜碱,以维持细胞的正常膨压。综述了植物甜菜碱合成途径中磷酸乙醇胺N-甲基转移酶、胆碱单加氧酶和甜菜碱醛脱氢酶的分子生物学特性及其基因工程研究的最新进展。