磺胺对甲氧嘧啶在猫体内的药代动力学研究——第一报:健康猫单剂量快速静脉注的药代动力学研究

给健康猫单剂量快速静注磺胺对甲氧嘧啶100mg/kg,用(重氮化—偶合比色法)测定不同时间的猫体内的药物浓度(血药),其药物—时间数据和药动学参数用微机非线性最小二乘法程序拟合计算。实验用猫10只,药—时曲线均适合无吸收因素二室模型。用BASIC语言计算出单剂量快速静注给药后的药动力学参数,并推算出多剂量给药有关参数。其主要参数分别为:消除相半衰期(t1/2β)为7.60±1.01h,表现分布容积(Vd)为4.81±0.61L/kg,总清除率(ClB)为0.40±0.15L/kg·h,药—时曲线下面积(AUC)为23.00±3.43mg/100ml·h,有效浓度维持时间(Tcp)为15.53±1.94h。多剂量给药(τ=t1/2β=7.60h的主要参数分别为:稳态下最高血药浓度(Css(max)]为5.27±0.64mg/100ml,稳态下最低血药浓度[Css(min)]为2.09±0.25mg/100ml,稳态下平均血药浓度[Css(ave)]为3.04±0.37mg/100ml,负荷剂量(D)为200mg/kg,维持剂量(D)为100mg/kg。

HPLC同时测定复方二甲硝咪唑可溶性粉中地美硝唑、甲氧苄啶、磺胺对甲氧嘧啶的含量

建立同时测定复方二甲硝咪唑可溶性粉中地美硝唑、甲氧苄啶、磺胺对甲氧嘧啶含量的高效液相色谱法。采用Discovery C18色谱柱(250 mm×4.60 mm,5μm);以0.1%磷酸溶液-乙腈(90∶18)为流动相;检测波长为230 nm;流速为1.0 mL/min;进样量为10μL。地美硝唑在20μg/mL^100μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=1,n=5),平均回收率为99.87%(RSD=0.73);甲氧苄啶在5μg/mL^30μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=6),平均回收率为99.83%(RSD=1.46);磺胺对甲氧嘧啶在20μg/mL^100μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=1,n=5),平均回收率为99.57%(RSD=0.85)。该方法简便可行、准确、快速,可用于复方二甲硝咪唑可溶性粉中上述3种成分的含量测定。

酶联免疫吸附法检测磺胺对甲氧嘧啶残留

用戊二醛法将磺胺对甲氧嘧啶 (SMD)与载体蛋白牛血清白蛋白 (BSA)偶联制备合成抗原 SMD- BSA用作免疫原 ,同法合成包被抗原 SMD- OVA(卵清蛋白 ) ,免疫家兔获得抗血清 ,用双向琼脂扩散试验和 EL ISA法对抗血清进行了定性定量测定。结果表明 ,抗血清特异性地针对 SMD,其效价为 1∶ 2 5 6 0。用所制备的抗血清建立了间接竞争EL ISA法。优选的 EL ISA的工作条件 :包被抗原最佳包被质量浓度为 5 0 mg/ L ,抗血清最佳稀释度为 1∶ 10 0 ,酶标抗体的最适工作稀释度为 1∶ 5 0 0。标准工作曲线表明 ,抗血清检测在 10～ 2 0 0 0 μg/ L 范围内呈良好的线性关系 ,超过2 0 0 0μg/ L则线性关系较差 ;该法检测底限为 6 3μg/ L ,低于国际规定残留限量 (10 0μg/ kg)和国内规定残留限量 (30 0μg/ kg)的要求。按建立的 EL ISA法测定了方法的回收率 ,无基础本底的牛奶样品回收率为 94 .7%。按药典剂量给鸡肌肉注射 SMD,连续注射 3d,在第 0～ 7天分别采血 ,按建立的 EL ISA方法测定了血清中的

磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶在肉鸡体内的残留消除

采用高效液相色谱-串联质谱法研究磺胺对甲氧嘧啶（SMD）和二甲氧苄啶（DVD）预混剂在白羽肉鸡体内各组织中的残留消除规律。对48只健康白羽肉鸡连续饲喂添加1 000mg/kg磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂（含SMD 200mg,DVD 40mg）的全价饲料10d,在停药后4h,1、3、6、9、12、15d分别宰杀6只鸡,采集各组织进行药物残留测定。通过空白样品添加回收试验,所有基质中SMD和DVD的定量限分别为10μg/kg和5μg/kg,SMD和DVD分别在50、100、200μg/kg和25、50、100μg/kg 3个添加水平下的平均回收率为71.7%~102.3%,相对标准偏差为1.0%~11.9%。结果表明,磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂在肾脏中残留量最高,肝脏其次;肌肉和皮脂中的残留量显著低于肝脏和肾脏,停药9d时,残留量低于药物残留限量。综合各组织中总残留量和最高残留限量规定,建议磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂在鸡的休药期为7d。

酶免疫法测定磺胺对甲氧嘧啶残留的研究──抗磺胺对甲氧嘧啶抗体的制备

ＳＭＤ常用于治疗畜禽细菌性疾病及球虫病。为了检测动物组织中的ＳＭＤ残留物，将ＳＭＤ的芳香胺基与兔血清白蛋白偶联形成全抗原。经此全抗原高免的兔子血清中含有高滴度抗半抗原ＳＭＤ的琼脂扩散和ＥＬＩＳＡ的特异性抗体。相信以此种特异性抗血清为基础的检测方法可以检出组织中的ＳＭＤ残留。

鸡组织中磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶残留的HPLC-MS/MS测定

建立了同时测定鸡组织中残留的磺胺对甲氧嘧啶(SMD)和二甲氧苄啶(DVD)了的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。样品经乙腈提取,取部分提取液用正己烷脱脂后于氮气吹干,残渣用流动相溶解并定容后上机检测,外标法定量。采用C18色谱柱,流动相为乙腈和1mL/L甲酸水溶液。选择1个母离子和2个子离子进行反应监测,对磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶残留进行定性,选择信号最强的子离子进行定量。结果显示,SMD和DVD分别在1ng/mL^200ng/mL和0.5ng/mL^100ng/mL范围内呈良好线性关系,相关系数R2>0.992。通过空白样品添加回收试验,所有基质中SMD和DVD的定量限分别为10μg/kg和5μg/kg,SMD和DVD分别在50、100、200μg/kg和25、50、100μg/kg 3个添加水平下的回收率为71.7%~115.0%,相对标准偏差为1.8%~13.2%,该方法定量限低,灵敏度高,重现性好,符合相关研究的要求。

HPLC法测定复方磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶的含量

建立了兽药复方磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶含量的高效液相色谱测定法。以C18为固定相，0．1％磷酸溶液-乙腈（80∶20）为流动相，流速为1．0 mL/min，柱温40℃，检测波长为270 nm，采用外标法进行定量。磺胺对甲氧嘧啶的线性范围为5．0～100μg/mL，回归方程为Area＝33．56＆#215;Amt-12．15（n＝5），相关系数大于0．999。从高（0．25 g）、中（0．20 g）和低（0．15 g）三个添加水平的检测结果可以看出，磺胺对甲氧嘧啶的回收率为97．9％～100．6％。该方法简单，准确，精密度好，回收率高，可以用于测量复方磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶的含量。

磺胺对甲氧嘧啶在肉鸡组织中的残留研究

将艾维茵肉鸡100羽随机分成4组,在基础日粮中分别添加不同水平的磺胺对甲氧嘧啶(从第Ⅰ到第Ⅳ组分别添加0、500、1000、2000mg/kg),连喂3d后停药,并于停药后第1、2、3、5、10d时每组各捕杀鸡10只,迅速取出肝脏、肾脏、肌肉组织,用高效液相色谱法测定这些组织中磺胺对甲氧嘧啶的残留。结果表明,停药后10d内,肌肉、肝脏和肾脏中均有浓度不一的残留,其检测限达0.005mg/kg,回收率在87%以上。

水中磺胺对甲氧嘧啶抗生素的平面波导免疫传感器检测

为满足对水中磺胺类抗生素磺胺对甲氧嘧啶(SMD)快速灵敏检测的需求,本研究基于间接竞争免疫反应原理,结合本课题组自主研发的平面波导免疫传感器,建立了快速检测水环境中的磺胺对甲氧嘧啶(SMD)抗生素的方法.研究结果表明,当抗体浓度优化为1.50μg·mL^-1、溶液pH值为中性时,磺胺对甲氧嘧啶(SMD)的检测限可至5.24 ng·L^-1,定量检测区间为0.03—1.37μg·L^-1,满足水中SMD抗生素的检测需求;四环素、林可霉素及双酚A三类典型污染物对SMD的检测无明显干扰,本方法具有良好的特异性和选择性,检测周期(包括检测及再生)仅20 min.传感芯片再生性研究表明,检测的核心单元免疫芯片可再生后重复使用,其检测性能在运行100个工作周期后无明显衰减.利用本方法对两种实际水样进行加标回收测试,回收率分别在86.3%—93.2%、86.7%—90.5%之间,相对标准偏差均小于10%.结果表明本方法可用于实际水中SMD的快速检测,同时为其它磺胺类抗生素快速灵敏检测方法的建立提供了参考.

系数倍率双波长紫外分光光度法测定复方磺胺对甲氧嘧啶钠注射液中TMP的含量

TMP经稀醋酸溶解，在水溶液中于271nm处存在最大吸收。本试验采用系数倍率双波长紫外分光光度法消除复方制剂中磺胺对甲氧嘧啶测定的影响，该方法操作简便快捷，结果稳定可靠。线性范围5－25μg/mL，相关系数r=1.0002,平均回收率为100．17％，RSD＝0．55％。

黑熊血清蛋白与磺胺对甲氧嘧啶的结合率测定

本文用平衡透析法测定了黑熊血清蛋白与磺胺对甲氧嘧啶（ＳＭＤ）的结合率（ｆｂ）为４１．７７±１１．６６（５．３８～２５．８７）％．数据经Ｗｏｏｌｆ作图法处理、直线回归后，得到结合参数βｐ和Ｋｄｐ分别为：８．８５±１．７８μＭ／ｇ，６４７．２０±２４２．８４μＭ／Ｌ．黑熊的ｆｂ均随药物浓度的增高而降低，高浓度的呈现饱和现象．不同浓度间的ｆｂ差异极显著（Ｐ＜０．０１），不同个体间的ｆｂ差异极显著（Ｐ＜０．０１）．

HPLC法测定磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶的含量

建立了兽药磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶含量的高效液相色谱测定法。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,0.1%磷酸溶液-乙腈（80：20）为流动相,检测波长为270nm,流速为1.0m L/min,柱温40℃,采用外标法进行定量。磺胺对甲氧嘧啶的线性范围0.005~0.10mg/m L,回归方程为Area=71641.62×Amt＋3.01（n=5）,相关系数大于0.99999。磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶三个添加浓度的添加回收率均均在98.2%~103.0%之间,RSD分别为0.51%、1.1%、0.87%。该方法简单,准确,稳定性,精密度好,回收率高,可以用于测量磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶的含量。

3种磺胺类药物在中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)体内的药代动力学特征

采用高效液相色谱法研究了3种磺胺类药物在中国对虾体内的药物代谢动力学特征,这3种磺胺类药物包括磺胺二甲嘧啶(SM2)、磺胺嘧啶(SD)及磺胺对甲氧嘧啶(SMD)。实验期间,中国对虾的养殖水温为(24.6±2.4)℃,单次口服3种磺胺类药物的剂量均为100 mg/kg。结果显示,3种磺胺类药物在中国对虾体内的血药经时过程均符合一级吸收二室开放模型,SM2的主要药动学参数T1/2β、AUC、Vd、CL、Tmax、Cmax分别为25.812 h、34.066 mg/L·h、94.553 L/kg、2.608 L/h·kg、2 h、1.07 mg/L;SD的主要药动学参数T1/2β、AUC、Vd、CL、Tmax、Cmax分别为46.446 h、45.39 mg/L·h、97.207 L/kg、1.504 L/h·kg、1 h、1.17 mg/L;SMD的主要药动学参数T1/2β、AUC、Vd、CL、Tmax、Cmax分别为66.296 h、65.917 mg/L·h、40.015 L/kg、0.763 L/h·kg、2 h、2.00 mg/L。结果表明,SMD在中国对虾体内分布比SM2、SD更广泛;中国对虾体内SM2的消除相半衰期最短,SD次之,SMD消除相半衰期最长;3种磺胺类药物在中国对虾体内72 h药物吸收量SMD最高,SD次之,SM2最低;且SMD药物清除率最低,SD次之,SM2药物清除率最高,所以口服3种磺胺类药物72 h中国对虾体内SMD残留最多,SD次之,SM2残留最少。SMD在中国对虾体内药效更加持久,故在不考虑使用成本及毒副作用等其他因素的前提下,比较这3种磺胺类药物的药物代谢动力学特征,更加推荐使用SMD。

基于碱性磷酸酶-金刚烷体系的化学发光酶免疫分析法对磺胺对甲氧嘧啶的测定

目的用碱性磷酸酶（ALP）-金刚烷（AMPPD）体系,建立化学发光酶免疫分析定量检测磺胺对甲氧嘧啶（SMD）的方法。方法利用重氮化偶联法标记ALP,在优化的实验条件下抗体包被浓度为5.0μg.mL-1,酶标记物工作液稀释度为1∶10,每孔加待测样品或标准品50μL和酶标记物50μL,在37℃下反应l h,洗涤后每孔加发光底物100μL,避光反应25 min后在发光检测仪下检测发光计数。结果该方法检测限为28.0 pg.mL-1,批内变异系数为13.5%~14.6%,批间变异系数为16.1%~17.5%。标准曲线回归方程为Y=-0.021 5X＋5.172 6（r=0.996 1）,线性范围为50~10 000 pg.mL-1。结论首次运用ALP-AMPPD发光体系的化学发光酶免疫分析法实现了对SMD残留的快速检测。

磺胺类药物在中国对虾3种组织中的代谢情况

采用高效液相色谱法测定中国对虾肝胰腺、肌肉及鳃中磺胺类药物的含量,磺胺类药物包括磺胺二甲嘧啶(SM2)、磺胺嘧啶(SD)及磺胺对甲氧嘧啶(SMD)。3种磺胺类药物单次口服剂量均为l00 mg/kg,养殖期间水温为(24.6±2.4)℃,比较3种磺胺类药物在中国对虾鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β、CL、AUC(0—72)和Tmax等各主要参数。SM2在鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β分别为23.067、34.162和16.559 h;SD在鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β分别为29.157、34.272和27.929 h;SMD在鳃、肝胰腺及肌肉中的T1/2β分别为47.657、55.271和32.237 h。在同一组织中,SM2的消除速度最快,SD次之,SMD的消除速度最慢。口服同一磺胺类药物,在肌肉中消除速度最快,鳃次之,肝胰腺中的消除速度最慢。SM2在鳃、肝胰腺及肌肉中的CL分别为0.673、0.171和0.464 L/(h·kg);SD在鳃、肝胰腺及肌肉中的CL分别为0.496、0.214和0.463 L/(h·kg);SMD在鳃、肝胰腺及肌肉中的CL分别为0.29、0.082和0.362 L/(h·kg)。所以,同一组织中SMD的清除率最低,同一种磺胺类药物在鳃中清除最快。SM2在鳃、肝胰腺及肌肉中的AUC(0—72)分别为138.476、493.02和206.572 mg/(L·h);SD在鳃、肝胰腺及肌肉中的AUC(0—72)分别为147.919、379.039和186.495 mg/(L·h);SMD在鳃、肝胰腺及肌肉中的AUC(0—72)分别为218.024、629.311和229.819 mg/(L·h)。口服同一种磺胺类药物在肝胰腺中的药物吸收量是最大的,比较同一组织中的3种磺胺类药物的吸收量,SMD较高一些。综上所述,口服3种磺胺类药物,72 h内中国对虾肝胰腺中的药物残留最为严重。本研究为在中国对虾养殖过程中更加科学和合理地使用磺胺类药物提供了参考。

抗磺胺对甲氧嘧啶单克隆抗体的研制及其特性分析

目的制备针对磺胺对甲氧嘧啶的单克隆抗体,建立对该物质的免疫学检测方法。方法以BSA-磺胺对甲氧嘧啶为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠Sp-2/0骨髓瘤细胞融合后,经筛选和亚克隆,建立杂交瘤细胞株。结果获得2株能稳定分泌抗磺胺对甲氧嘧啶抗体的细胞株。对抗体进行了特性分析,抗体的效价分别为1∶400 000和1∶1 630 000,抗体类型及亚类都为IgG1。其中,单克隆抗体1H10的亲和力为1.4×109L/mol,利用该抗体采用竞争间接ELISA法检测磺胺对甲氧嘧啶的范围是1025～16μg/mL,最低检测浓度是8μg/mL。单抗1H10与其他6种磺胺药(SMM、SMZ、SM2、SD、Sulfaquinoxaline Sodium、Sulfametopyrazine)无交叉反应。结论单克隆抗体1H10可用于研制免疫学方法检测磺胺对甲氧嘧啶残留的产品。

一起肉鸡磺胺类药物中毒的诊治报告

1发病情况 本地区一养殖户共饲养艾维菌肉鸡7000只，养殖户在肉鸡21日龄时，在饲料中拌人复方敌菌净（每片含磺胺对甲氧嘧啶25mg，二甲氧苄氨嘧啶5mg）。该药推荐使用剂量为畜禽一次量每千克体重20-25mg（以磺胺对甲氧嘧啶计），每12h一次。养殖户按推荐剂量每千克体重25mg磺胺对甲氧嘧啶（约每千克饲料2片复方敌菌净）拌料喂鸡。

高效液相法测定复方磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶和甲氧苄啶的含量

建立了兽用复方磺胺对甲氧嘧啶片含量测定的高效液相色谱法(HPLC)。试验采用C18色谱柱,0.1%磷酸-乙腈(85∶15)为流动相,流速为1.0 mL/min,进样量20μL,测定波长240 nm,柱温40℃。采用外标法定量计算磺胺对甲氧嘧啶和甲氧苄啶的含量。结果表明,磺胺对甲氧嘧啶在30~300μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(R^2=1),平均回收率为99.3%;甲氧苄啶在6~60μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(R^2=1),平均回收率为99.0%。HPLC方法有良好的精密度、稳定性,能够用于测定兽用复方磺胺对甲氧嘧啶片各成分的含量,对该片剂的质量控制起到重要作用。