耶氏肺孢子菌对磺胺类药物耐药相关基因突变的研究进展

肺孢子菌肺炎是由耶氏肺孢子菌引起的,发生在免疫功能低下人群中的机会性感染。大量证据表明,耶氏肺孢子菌对磺胺类药物耐药性增加与二氢叶酸合成酶(DHPS)基因和二氢叶酸还原酶(DHFR)基因突变有关,但具体机制尚不清楚。DHPS和DHFR基因突变增加可能是药物选择性压力所致,也可能是耶氏肺孢子菌基因多态性自然发展和传播的结果。本文对耶氏肺孢子菌DHPS和DHFR基因突变产生的原因、分子流行病学研究进展及其与临床结局的关系进行了综述。

塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及血管形成的影响

目的:探讨塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及血管形成的影响。方法:使用对数生长期的人结肠癌细胞(HT-29)于裸鼠皮下接种成瘤后原位种植。术后随机分为对照组(C组)及塞来昔布高、中、低剂量组(H、M、L组)共四组进行研究。结果:24只裸鼠实验期间无1只死亡,成瘤率为100%,比较各组原位移植瘤体积和瘤质量差异有统计学意义,P值均<0·05。L、M和H组的抑瘤率分别为25·30%、38·80%和76·92%,与对照组比较差异有统计学意义,P=0·000,且存在明显的剂量依赖。干预组瘤组织中MVD、VEGFmRNA、MMP-2mRNA和匀浆上清中PGE2含量与对照组相比差异有统计学意义,P值分别为0·050、0·050、0·050和0·010,随着剂量增加,MVD、VEGFmRNA、MMP-2mRNA和匀浆上清中PGE2含量逐渐降低。瘤组织中PGE2含量与瘤质量,以及MVD与VEGFmRNA、MMP-2mRNA均存在显著的正相关性,r=0·8814,P=0·000;r=0·8573,P=0·000;r=0·6427,P=0·001。结论:塞来昔布通过抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤环氧化酶-2活性,抑制PGE2合成、VEGFmRNA和MMP-2mRNA表达,抑制肿瘤的血管形成,从而对结肠癌的生长有抑制作用。

西维来司钠对重症急性胰腺炎大鼠炎性因子及ALT、AST表达的影响

[目的]探讨西维来司钠对重症急性胰腺炎大鼠炎性因子及谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）表达的影响。[方法]选择SD大鼠30只，随机分为对照组、模型组、干预组。对照组经腹正中切口并显露胰腺、十二指肠，不做夹闭操作，模型组及干预组采用经十二指肠乳头逆行胰胆管注射5％牛黄胆酸钠的方法建立急性胰腺炎的模型，对照组和模型组经颈静脉置管微量泵注射生理盐水，干预组给予西维来司钠治疗。干预后6h和12h时，对胰腺组织进行病理评分，检测并比较各组血清中炎性因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）及ALT、AST水平。[结果]建模后6h、12h时，模型组大鼠的胰腺组织病理学评分及血清淀粉酶（AMY）、ALT、AST、IL-2、IL-6、IL-8含量均显著高于对照组（t=10．129-21．664，P〈0．01），干预组大鼠的胰腺组织病理学评分以及血清AMY、ALT、AST、IL-2、IL-6、IL-8含量均显著低于模型组（t=6．055-12．551，P〈0．05，P〈0．01）。[结论]西维来司钠能减轻急性胰腺炎大鼠的胰腺病理损伤、抑制炎症反应、保护肝功能。

尼美舒利逆转人胃癌细胞耐药的实验研究

目的:研究环氧化酶 -2 (COX -2)选择性抑制剂尼美舒利(nimesulide,NIM)对丝裂霉素 (mitomycin,MMC)抑制体外培养人胃癌细胞株 SGC 7901 及其耐药亚系 SGC 7901/VCR的细胞增殖及诱导凋亡的影响,初步探讨 NIM逆转人胃癌细胞耐药的机制。方法: 1) MTT比色法及集落形成实验研究 NIM对 MMC抑制人胃癌细胞 SGC 7901,及其耐药亚系 SGC7901/VCR细胞增殖的影响; 2)流式细胞仪技术及吖啶橙(acridine orange, AO)荧光染色研究NIM对 MMC诱导人胃癌细胞 SGC 7901,及其耐药亚系 SGC 7901/VCR 细胞凋亡的影响。结果:1) 联合应用 NIM 与单用 MMC 比较,SGC 7901细胞株中,MMC对 SGC 7901 细胞的半数抑制浓度(IC50 )降低 0. 74μg/mL,集落形成率下降 46 4%。SGC 7901/VCR 细胞株中, IC50 从 > 2. 0 μg/mL 下降到 0 .65μg/mL,集落形成率下降 31%;2) SGC 7901 细胞株及其耐药亚系 SGC 7901/VCR细胞株中,NIM+ MMC 组的染色阳性细胞数分别为47 .00±1 .00、30 .33±4 .16,较其他组别均有显著升高,流式细胞仪分析细胞凋亡结果与其基本一致。结论: 1) COX 2 选择性抑制剂 NIM能增强MMC抑制人胃癌细胞株 SGC 7901,及SGC 7901/VCR的细胞增殖和诱导其凋亡的作用;2)NIM对体外培养的人胃癌细胞株的多药耐药有一定的逆转作用。

NS398抑制肾癌细胞增殖作用的研究

目的:探讨NS398对肾癌细胞增殖作用的影响及作用机制。方法:采用人肾癌786-0细胞系进行细胞培养,将NS398分别以25、50、100、150和200μmol/L的剂量加入细胞中,应用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡。应用RT-PCR和Western blot方法检测COX-2mRNA及其蛋白的表达。结果:NS398对肾癌786-0细胞具有较强的抑制作用,且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增大,呈浓度依赖关系;NS398作用肾癌786-0细胞24h后,在细胞周期G0/G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,随着浓度升高凋亡峰亦越来越增高,P<0.05;RT-PCR和Western blot结果表明,不同浓度NS398作用下的肾癌786-0细胞中,COX-2mRNA及其蛋白的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降,P<0.05。结论:COX-2选择性抑制剂NS398通过生长抑制、诱导调亡来抑制肾癌细胞的增殖。NS398作为治疗和预防肾癌的有效药物值得进一步深入研究。

不同HIV蛋白酶抑制剂对鼠胰岛素瘤细胞功能的影响

目的:探讨不同H IV蛋白酶抑制剂对胰岛beta-细胞功能的影响。方法:体外观察不同浓度ritonav ir或am prenav ir干预48 h对鼠胰岛素瘤IN S-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素释放速率的影响,胰岛素测定采用EL ISA法,并用细胞内DNA含量标准化。用苔盘蓝染色细胞计数、MTT试验评估ritonav ir或am prenav ir对IN S-1细胞活力的影响。结果:R itonav ir治疗可以显著降低基础胰岛素分泌速率及葡萄糖刺激的胰岛素释放速率,并呈剂量依赖关系(r分别为-0.861,-0.839,均P<0.01)。10μm o l/L ritonav ir分别降低基础胰岛素分泌和葡萄糖刺激的胰岛素释放达46%和47%。Am prenav ir对胰岛素释放功能没有影响。结论:不同H IV蛋白酶抑制剂对胰岛beta-细胞功能的影响不同。

NDGA联合塞来昔布对结肠癌细胞诱导凋亡的研究

目的观察5-脂氧合酶（5-lipoxygenase，5-LOX）抑制剂去申二氢愈创木酸（nordi-hydroguaiaretic acid，NDGA）联合选择性环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）抑制剂塞来昔布（Cele-coxib）对结肠癌细胞株HT-29细胞凋亡的影响。方法用不同浓度NDGA及塞来昔布处理HT-29细胞，应用甲基偶氮唑蓝（MTT）法、倒置相差显微镜观察、AnnexinV／PI法和RT-PCR方法，研究其抑制HT-29细胞增殖，诱导凋亡的作用。结臬M1丫r法显示，与对照组相比，NDGA和塞来昔布及两药联用组细胞活性下降（0．432±0．024、0．425±0．013、0．303±0．014VS0．693±0．018itz18．79，25．75，37．64，P〈0．01）。NDGA联合塞来昔布组与单独应用NDGA或塞来昔布差异有统计学意义（t=10．21，14．14，P〈0．01）。倒置相差显微镜下显示两种药物都能使体外培养的结肠癌HT-29细胞的形态发生明显变化，而两种药物联合应用后变化更明显。激光共聚焦显微镜下显示应用NDGA及塞来昔布后可以引起HT-29细胞凋亡。RT—PcR检测发现药物作用后Caspase-3表达上调，两种药物联合应用后上调最多。结论MDGA联合塞来昔布较之单独应用可以更强抑制体外培养的HT09细胞增殖，并诱导凋亡，其抑制HT-29细胞诱导凋亡机制与激活Caspase-3途径有关。

瑞舒伐他汀对人单核-巨噬细胞组织因子表达的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对氧化修饰低密度脂蛋白（OX-LDL）诱导的人单核-巨噬细胞组织因子（TF）表达影响及可能机制。方法据实验要求分空白对照组、OX-LDL组、多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组。RT-PCR检测各组血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）mRNA，TFmRNA表达，ELISA检测各组TF蛋白表达。结果OX-LDL组与空白对照组比较，LOX-1mRNA、TFmRNA表达增加[（3．25156±0．15772）VS（1±0）；（2．522451±0．138967）VS（1±0）]，其差异均有统计学意义（P〈0．01）。多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组与OX-LDL组比较，LOX-1mRNA、TFmRNA表达减少[（2．95139±0．157253）VS（3．25156±0．15772）、（2．877343±0．156558）VS（3．25156±0．15772）；（1．811956±0．169699）VS（2．522451±0．138967）、（1．687701．4-0．174647）vs（2．522451±0．138967）]，其差异均有统计学意义（P〈0．05）。ox-LDL组与空白对照组比较，TF蛋白表达增加[（207．7233±1．154701）VS（184．8467±0．871799）]，差异有统计学意义（P〈0．01）。多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组与OX-LDL组比较，TF蛋白表达均减少[（197．8733±1．505003）vs（207．72334-1．154701）、（202．95674-2．722744）VS（207．7233±1．154701）]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论LOX-1可能介导OX-LDL诱导的人单核-巨噬细胞TF表达增加。瑞舒伐他汀可通过下调单核-巨噬细胞LOX．1mRNA的表达下调TFmRNA表达，从而下调TF蛋白表达。

瑞舒伐他汀联合氯沙坦对ox-LDL诱导的人单核巨噬细胞小凹蛋白-1表达的影响

目的 探讨瑞舒伐他汀、氯沙坦以及二者联合对氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人单核巨噬细胞小凹蛋白-1表达的影响.方法 分离培养人单核细胞并诱导转化为巨噬细胞,建立动脉粥样硬化模型,分别以不同剂量瑞舒伐他汀（0.1、1.0、5.0 μmol/L）、氯沙坦（10、50、100μmol/L）以及联合两药最适剂量（5.0 μmol/L＋ 100 μmol/L）干预细胞,以RT-PCR检测各组小凹蛋白-1的mRNA表达.结果 与空白对照组比较,ox-LDL组小凹蛋白-1 mRNA表达显著减少[（0.2533±0.00973） vs （0.9410 ±0.03677）],其差异有统计学意义（P＜0.01）;与ox-LDL组比较,随着瑞舒伐他汀及氯沙坦浓度的升高,小凹蛋白-1 mRNA表达均逐渐升高[（0.5198±0.04840）、（0.6183±0.06740）、（0.7257±0.03052） vs（0.2533±0.00973）;（0.3350 ±0.04177）、（0.4428 ±0.03804）、（0.6049 ±0.02627） vs （0.2533 ±0.00973）],各组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;最适剂量瑞舒伐他汀及氯沙坦联合组与单药组比较,小凹蛋白-1 mRNA表达显著升高,各组间比较差异均有统计学意义（F =59.119,P＜0.01）.结论 瑞舒伐他汀及氯沙坦均可以通过ox-LDL途径上调人单核巨噬细胞小凹蛋白-1 mRNA表达,且呈一定的剂量依赖趋势;两药以最适剂量联合应用后,小凹蛋白-1 mRNA表达较单药更为显著.