高效液相示差折光法测定保健食品中水苏糖的含量

目的创建测定保健食品中水苏糖的含量方法。方法色谱柱AgilentzorbaxNH2(4.6mm×250mm,5μm),柱温25℃;流动相乙腈-水(69:31),流速1.0mL·min-1;示差折光检测器,内部温度35℃。结果水苏糖的线性范围为2.06-20.6μg;加样回收率(n=5)为97.68%。结论本方法简便、灵敏、准确,可用于保健食品中水苏糖的含量测定和产品质量控制。

液相色谱示差折光法测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖

本实验对反相高效液相色谱示差折光检测法测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的方法进行了详细地探讨,结果表明:均匀称取约2.5g样品,加30ml水溶解后,再用乙腈定容至50ml,既能够有效地提取蜂蜜中的糖类物质,又保证了和流动相的相对一致性。同时对样品溶解时的分层机理作了初步推测。用该方法处理所得的样品稳定性高,测试结果重复性好。该法加标回收率均在97%～103%之间,相对标准偏差均在0.8%～1.6%之间。采用本研究方法测试了8种不同蜂蜜样品,均获得满意结果。

高效液相色谱示差折光法测定食品中的乳果糖

食品(本实验以强化奶粉和乳果糖浆为试验品)经称量、溶解、过滤等简单预处理,水作为流动相,在 Beckman 碳水化合物分离柱中分离,柱温90℃,经示差折光检测器检测定量。本法的最低检测限为10μg/ml(n/s=3),在0.10～10mg/ml(绝对进样量为2～200ng)的浓度范围内具有良好的线性关系,r=0.9997,精密度小于1.42%,样品回收率在95.50%～97.70%范围内。本方法预处理简单、方便、分离时间短、结果准确,是测定食品中乳果糖含量的好方法。

高效液相色谱-示差折光法测定饲料中低聚果糖含量

本实验建立了饲料中低聚果糖的高效液相色谱分离检测方法。试样用水超声萃取,以乙腈-水作为流动相,使用示差折光检测器进行检测。结果表明：蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖在0.1～5 mg/m L具有良好的线性关系,且相关系数均为1.0000;蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖检出限分别为0.03、0.04、0.05 g/kg,定量限分别为0.10、0.13、0.15 g/kg;方法的回收率为94.1%～108.1%,相对标准偏差为0.8%～5.1%。该方法定量准确可靠,重复性好,回收率高,适用于饲料中低聚果糖的日常检测。

高效液相色谱-示差折光法测定饲料中大豆低聚糖含量

本实验建立了饲料中大豆低聚糖的高效液相色谱分离检测方法。试样用50％乙醇超声萃取，以乙腈一水作为流动相，使用示差折光检测器进行检测。结果表明，蔗糖、棉籽糖和水苏糖浓度为0.5-10mg／mL时具有良好的线性关系，相关系数为0．9999—1．0000，蔗糖、棉籽糖和水苏糖检出限分别为0．011％、0．016％和0.020％，定量限为0．036％、0．053％和0．066％，方法的回收率为90．6％-106％，相对标准偏差为1．6％～4．2％。该方法定量准确可靠．重复性好，回收率高，适用于饲料中大豆低聚糖的日常检测。

高效液相-示差折光法同时测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚和盐酸金刚烷胺的含量

目的:建立同时测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚和盐酸金刚烷胺含量的高效液相-示差折光法。方法:采用Waters SunFire C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(10:90),柱温为30℃,进样量为20μL,流速为1.5 mL·min^(-1),检测器为RID,检测池温度为30℃。结果:在选定的色谱条件下,对乙酰氨基酚在0.629 2~5.033 2 mg·mL^(-1)的浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为100.1%,其RSD=1.4%(n=9),盐酸金刚烷胺在0.252 2~2.017 6 mg·mL^(-1)的浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 4),平均回收率为100.4%,其RSD=1.5%(n=9)。结论:本法简便,快速,准确,重现性好,适用于复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚和盐酸金刚烷胺的质量控制。

高效液相-示差折光法同时测定葛根素葡萄糖注射液中葛根素和葡萄糖的含量

目的:建立同时测定葛根素葡萄糖注射液中葛根素和葡萄糖含量的高效液相-示差折光法。方法:采用Agilent ZORBAX NH_2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(80∶20),柱温为30℃,流速为1.2 mL·min^(-1),进样量为20μL,检测器为RID,检测池温度为40℃。结果:在选定的色谱条件下葛根素在0.131 1~1.049 mg·mL^(-1)的浓度范围内与其峰面积呈线性关系(r=0.999 6),葡萄糖在3.126~25.01mg·mL^(-1)的浓度范围内与其峰面积呈线性关系(r=0.999 8),葛根素的平均回收率为100.2%,其RSD=1.0%(n=9),葡萄糖的平均回收率为100.3%,其RSD=1.1%(n=9)。3个批次的样品测定结果为:葛根素含量为99.6%、100.5%和99.8%,葡萄糖含量为101.0%、100.7%和100.3%。结论:经方法学验证,本法适用于葛根素葡萄糖注射液中葛根素和葡萄糖的质量控制。

HPLC示差折光分析法测定乳糖含量

目的建立HPLC示差折光分析法测定乳糖的含量。方法采用Alltima-NH2柱,流动相为乙腈-水(67∶33),流速为1.0mL.min-1,柱温为45℃。结果乳糖在0.22～1.76mg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为99.0%,RSD为1.5%(n=9)。结论该法简便、快速,测定结果准确。

高效液相色谱示差法测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖

对高效液相色谱示差折光检测法测定蜂蜜中糖类组分的方法进行了研究。研究结果表明:蜂蜜不溶于乙腈,却能完全溶解于水中,因此采用纯水对蜂蜜进行溶解,同样能达到测定蜂蜜中各种糖类物质含量的目的,且能避免使用剧毒溶剂乙腈对样品进行提取,也避免了蜂蜜在乙腈-水混合液中出现分层,溶解不完全等现象,安全快捷,经济简便。该方法处理得到的样品溶液稳定性高,测试结果的重现性好,加标回收率为98.9%～102.9%,相对偏差0%～2.42%。该方法是测定蜂蜜中糖类含量的一种简便、安全、快捷的方法。

麦冬亲水成分分析及提取物对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的 分析麦冬亲水成分,并探究提取物对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法 采用超高效反相/亲水色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC/HILIC-Q-TOF-MS)法、分子排阻色谱-示差折光法、网络药理-分子对接技术测定水提冻干粉及多糖、果糖、酚酸提取物中亲水成分,预测解酒护肝活性。大鼠随机分为正常组、模型组、麦冬水提冻干粉组、麦冬多糖提取物组、麦冬果糖提取物组、麦冬酚酸提取物组、3-O-对香豆酰奎宁酸组,每组9只,分别预防性给药14 d后,除正常组外其余各组大鼠给予50%乙醇(14 mL/kg)建立急性酒精性肝损伤模型,根据血清ALT、AST、LDH、TG、VLDL水平结合肝组织病理学变化分析各提取物及3-O-对香豆酰奎宁酸活性作用的强弱。结果 从各提取物中鉴定出103种亲水成分及分子量为6 000、4 000 Da的多糖类成分,并发现3-O-对香豆酰奎宁酸、对羟基肉桂酸甲酯。对大鼠急性酒精性肝损伤保护作用依次为麦冬酚酸提取物=麦冬果糖提取物=3-O-对香豆酰奎宁酸>麦冬多糖提取物>麦冬水提冻干粉。结论 麦冬果糖、酚酸提取物、3-O-对香豆酰奎宁酸对大鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用。

HPLC-RID法测定吸附无细胞百白破联合疫苗中甘油的残留量

目的:建立高效液相色谱-示差折光(HPLC-RID)法测定吸附无细胞百白破联合疫苗中甘油残留量的方法,为其检测提供参考。方法:采用NH;色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(85∶15)为流动相,柱温30℃,RID检测器温度35℃,流速1.0 mL·min^(-1)。结果:甘油在43.5~2 173.0μg·mL^(-1)浓度范围内呈良好的线性关系(R^(2)=1.000),平均回收率为99.98%,RSD为0.65%(n=9)。结论:该方法简便、准确,专属性强,可用于甘油残留量的测定,使产品质量更加有效地得到控制。

示差折光-HPLC法测定复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇的含量

目的建立示差折光-HPLC测定复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇含量的方法。方法采用Rezex RCMMonosaccharide Ca2+色谱柱(300 mm×7.80 mm),以水为流动相,流速为0.5 ml/min,柱温为80℃,在示差折光检测器上检测,温度为55℃。结果山梨醇浓度在968.8μg/ml^8719μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000);平均加样回收率为100.1%(RSD=0.50%,n=9);样品溶液在24 h内基本稳定;最低定量限为9.688μg/ml。结论该方法操作简单,结果准确,重现性好,可用于测定复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇的含量。

HPLC-RID法同时测定复方牛磺酸滴眼液中牛磺酸和氨基己酸的含量

目的:建立同时测定复方牛磺酸滴眼液中牛磺酸和氨基己酸含量的高效液相色谱-示差折光检测器法。方法:采用Waters氨基键合硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-乙腈(40∶60),流速为0.8 ml·min^(-1),柱温为35.0℃,检测器参比池和检测池温度均为35.0℃,进样量为20μl。结果:牛磺酸和氨基己酸质量浓度在0.05~2.00 mg·ml^(-1)(r均为0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.57%(RSD=1.07%,n=9)和100.69%(RSD=0.75%,n=9)。结论:该方法准确、简便、快速,适用于复方牛磺酸滴眼液的质量控制。

HPLC-RID法测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖含量

建立了高效液相色谱-示差折光检测法(High Performance Liquid Chromatography Differential Refractive Detector,HPLC-RID)测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖5种还原糖含量的分析方法。蜂蜜试样用水提取,摇匀过滤后,经Kromasil 100-5-NH_(2)色谱柱分离,用示差折光检测器测定。结果表明,果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖在1.0~10.0 mg/mL线性关系良好,5种还原糖的方法检出限均为0.5 g/100 g,加标回收率为82.4%~109.7%,相对标准偏差RSD为0.87%~3.77%。该方法前处理过程简单、准确度高、精密度好,适用于蜂蜜中5种还原糖的定量检测。

甘油果糖氯化钠注射液含量测定方法的改进

目的:对甘油果糖氯化钠注射液中甘油、果糖、氯化钠3种成分的含量测定方法进行改进。方法:采用AgNO_3滴定法测定氯化钠的含量。采用高效液相色谱-示差折光法测定甘油和果糖的含量;色谱条件:使用5u氨基柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(75∶25)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,流通池温度35℃。结果:氯化钠含量测定滴定终点突跃明显,平均加样回收率(n=9)为99.8%。甘油和果糖进样浓度分别在0.888~4.44和0.488~2.44 mg·mL^(-1)的范围内线性关系良好,检测限(S/N=3)分别为0.042和0.013 mg·mL^(-1),定量限(S/N=10)分别为0.14和0.04 mg·mL^(-1),平均加样回收率(n=9)分别为99.4%和99.5%。10批样品测定结果:氯化钠的含量相对于标示量为98.3%~99.8%,甘油为98.7%~99.6%,果糖为95.2%~96.4%;本方法测定结果与中国药典方法测定结果基本吻合,相对偏差≤1.0%。结论:与中国药典方法相比,本法采用的色谱柱适用面广、便宜易得,待测组分在示差折光检测器上的色谱响应较紫外检测器好。本法可用于甘油果糖氯化钠注射液中甘油、果糖、氯化钠3种成分的含量测定。

糖谱法结合多元色谱分析比较铁皮石斛功能性多糖结构特征

目的:比较不同产地铁皮石斛功能性多糖结构特征,为其质量控制奠定基础。方法:高效凝胶色谱联用多角度激光散射和示差折光仪法(HPSEC-MALLS-RID法)用于测定多糖的重均相对分子质量、回旋半径及含量,色谱柱为TSK-GEL G5000 PWXL串联TSK Gel G3000PWXL,柱温35℃,流动相为9 mg·mL^(-1)氯化钠水溶液,流速0.5 mL·min^(-1)。气相色谱联用质谱法用于分析单糖组成及糖苷键,毛细管色谱柱为Agilent HP-5MS(30 m×0.25 mm×0.25μm),进样量2μL,用于单糖组成分析的程序升温条件为起始温度165℃,保持7 min,以5℃·min^(-1)升温至185℃,保持5 min,以4℃·min^(-1)升温至200℃,以20℃·min^(-1)升至280℃;用于糖苷键分析的程序升温条件为起始温度120℃,以5℃·min^(-1)升温至200℃,以8℃·min^(-1)升温至250℃,以20℃·min^(-1)升至280℃。基于荧光辅助凝胶电泳、高效薄层色谱-糖谱法分析功能性多糖部分酸水解和酶解产物特征,荧光辅助凝胶电泳采用200 V分离10 min,再调整电压至700 V分离40 min,凝胶在UV 365 nm下成像;TLC展开剂为正丁醇-异丙醇-水-醋酸(7∶5∶2∶1),显色剂为苯胺-二苯胺。结果:不同产地铁皮石斛多糖重均相对分子质量、回旋半径和含量分别为0.533×105~4.575×105、19.8~71.7 nm和6.28%~28.72%;铁皮石斛功能性多糖的单糖组成主要为(乙酰)甘露糖和葡萄糖,摩尔比(3.86~6.99)∶1.00,糖苷键类型主要为1,4-Manp和1,4-Glcp,摩尔比(4.51~7.89)∶1.00;不同铁皮石斛多糖的部分酸水解和酶解产物糖谱特征相似。结论:不同产地铁皮石斛功能性多糖结构具有较高的一致性,功能性多糖是铁皮石斛较好的质量控制指标。

RP-HPLC-RID法测定保健食品中大豆低聚糖的含量

目的:建立测定保健食品中大豆低聚糖(包括蔗糖、棉子糖、水苏糖3种成分)的高效液相色谱含量测定方法。方法:色谱柱Agilentzorbax NH2(4.6mm×250mm,5μm),柱温25℃;流动相水-乙腈(30∶70),流速1.2mL·min-1;示差折光检测器,内部温度35℃。结果:蔗糖、棉子糖、水苏糖的线性范围分别为2.38～23.8μg,2.04～20.4μg,2.24～22.4μg;加样回收率(n=5)分别为96.4%,97.5%,97.4%。结论:本方法简便、灵敏、准确,可用于含大豆低聚糖保健食品中以上3种成分的含量测定和产品质量控制。

注射用磷霉素钠中磷霉素钠二醇物含量测定方法的研究

目的:建立液相色谱串联质谱法和高效液相色谱-示差折光法测定注射用磷霉素钠中的磷霉素钠二醇物含量,并与现行中国药典方法比较,提高对药品的质量控制。方法:液相色谱串联质谱法采用Promosil CN(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为5 mmol.L-1醋酸铵-甲醇(82∶18),采用(-)ESI电离源,多反应监测(MRM)扫描方式,用于定量分析的离子分别为m/z 154.9→80.9(磷霉素二醇物)和m/z 120.9→77.1(内标苯甲酸)。高效液相色谱-示差折光法采用Agilent Zorb-ax NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为10.89 g.L-1磷酸二氢钾溶液,流速为1.0 mL.min-1;柱温36℃;检测器温度为35℃。结果:采用液相色谱串联质谱法,二醇物在22.46～359.4 ng.mL-1范围内线性关系良好,定量限为4.492 ng.mL-1,每一样品的分析时间为5 min。采用高效液相色谱-示差折光法,二醇物在0.104～5.205 mg.mL-1浓度范围内线性关系良好,精密度为0.7%,重复性良好。结论:本研究2种方法专属性高、简便、可靠,可用于注射用磷霉素钠的质量研究和质量控制。

霸王花不同部位粗多糖的结构组成及体外抗氧化活性

目的研究霸王花不同部位粗多糖的结构组成和体外抗氧化活性。方法利用水提醇沉法制备霸王花4个不同部位(花瓣、花萼、雌蕊、雄蕊)的粗多糖,通过苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、凝胶排阻色谱联用多角度激光光散射和示差折光仪法[size exclusion chromatography(SEC) coupled with multiangle laser light scattering(MALLS)and refractive index detector(RID),SEC-MALLS-RID]、高效液相色谱法、傅里叶红外光谱法(Fourier transform infrared spectrometer,FTIR)分析比较霸王花不同部位粗多糖结构特征;以对2,2-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用为指标,评价霸王花不同部位粗多糖的体外抗氧化活性。结果霸王花不同部位粗多糖中多糖含量为52.20%~61.52%,蛋白质含量为1.17%~3.21%;霸王花不同部位粗多糖均含有D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、D-阿拉伯糖,但单糖的比例有差异;4个不同部位粗多糖的SEC色谱图、重均分子质量及其分布、FTIR色谱图具有相似性;霸王花不同部位粗多糖具有体外抗氧化活性。结论霸王花不同部位粗多糖结构组成具有较高的相似性,均具有良好的抗氧化活性,在保健食品和药品等领域具有良好的开发利用前景。