祛痰化瘀中药联合体外反搏治疗冠心病不稳定型心绞痛的临床研究

目的观察祛痰化瘀中药联合增强型体外反搏治疗冠心病不稳定型心绞痛痰瘀互结证的临床疗效。方法选取120例诊断为冠状动脉粥样硬化性心脏病患者,随机分为治疗组和对照组,每组60例。对照组予西药常规治疗加用祛痰化瘀中药治疗,治疗组在常规西药及祛痰化瘀中药治疗基础上联合体外反搏,每日1次,每次60 min。4周后观察治疗前后患者血清肿瘤坏死因子(TNF)水平,同时记录两个组别治疗前后心绞痛发作及症状的变化情况。结果治疗组与对照组心绞痛症状均改善,治疗组心绞痛水平较对照组明显(P<0.05);治疗组与对照组血清TNF水平均改善,治疗组TNF水平改善情况较对照组明显(P<0.01)。结论祛痰化瘀中药联合体外反搏治疗能明显改善冠心病患者心绞痛症状及血清TNF水平。

基于CAV1.2/CaM/CaMKⅡ通路探讨祛痰化瘀中药复治疗心房颤动的作用机制

目的探讨祛痰化瘀中药复方治疗心房颤动的作用机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为空白组和造模组,连续7天尾静脉注射Ach(66μg·mL^(-1))-CaCl_(2)(10 mg·mL^(-1))建立大鼠AF模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、中药复方高、中、低剂量组和维拉帕米组,中药复方高、中、低剂量组给予12.38 mg·kg^(-1)·d^(-1)、6.18 mg·kg^(-1)·d^(-1)、3.10 mg·kg^(-1)·d^(-1)祛痰化瘀中药复方溶液灌胃、维拉帕米组给予维拉帕米溶液8.31 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,空白组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃,期间仍持续尾静脉注射,连续14天。电生理记录仪测量大鼠Ⅱ导联房颤持续时间,透射电镜观察大鼠心房肌超微结构变化,RT-PCR法检测大鼠心房肌CAV1.2、CaM、CaMKⅡmRNA相对表达量,Western blot法检测大鼠心房肌CAV1.2、CaM、CaMKⅡ及下游蛋白RyR2、P-RyR2蛋白表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠均出现典型房颤心电图(P<0.01),心房肌细胞肌丝排列絮乱、线粒体嵴断裂、呈“空泡样”改变,CAV1.2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01),CaM、CaMKⅡmRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01),P-RyR2蛋白表达显著升高(P<0.01),RyR2蛋白表达无差异(P>0.05)。与模型组相比,中药复方组房颤持续时间降低(P<0.05);肌丝排列相对整齐,线粒体结构相对完整;CAV1.2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),CaM、CaMKⅡmRNA及蛋白表达下降(P<0.01),下游蛋白P-RyR2表达降低(P<0.01),RyR2蛋白表达无差异(P>0.05)。结论祛痰化瘀中药复方可缩短大鼠房颤持续时间,抑制心房肌细胞超微结构损伤,其作用机制可能与调控CAV1.2/CaM/CaMKⅡ信号通路表达,改善钙调控紊乱有关。

祛痰化瘀中药复方对心房颤动模型大鼠心电图及黏附分子P-Selectin、E-Selectin的影响

目的:观察祛痰化瘀中药复方对心房颤动(AF)大鼠的疗效并探讨其作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为Control组(10只)和Model组(50只),通过尾静脉注射Ach(66μg/mL)-CaCl_(2)(10 mg/mL)连续7 d,建立大鼠AF模型。将造模成功的大鼠随机分为Model组(生理盐水)、High dose组(41.25 g·kg^(-1)·d^(-1))、Middle dose组(20.63 g·kg^(-1)·d^(-1))、Low dose组(10.31 g·kg^(-1)·d^(-1))、Verapamil组(25 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只,灌胃给药,期间仍持续尾静脉注射。连续灌胃2周后,记录大鼠心电图AF持续时间;透射电镜观察心房肌细胞超微结构的变化;ELISA法检测各组大鼠血清P-Selectin、E-Selectin的含量。结果:与Control组相比,Model组大鼠AF持续时间明显延长(P<0.01);透射电镜显示心房肌细胞肌丝排列絮乱、线粒体嵴断裂、呈“空泡样”改变;大鼠血清P-Selectin、E-Selectin含量均升高(P<0.01)。与Model组比较,所有用药组大鼠AF的持续时间均缩短(P<0.01);心房肌细胞肌丝排列相对整齐,线粒体结构相对完整,以High dose组、Middle dose组及Verapamil组最为明显;High dose组、Middle dose组、Low dose组大鼠血清P-Selectin含量均显著下降(P<0.01),High dose组、Middle dose组较Low dose组降低更明显(P<0.05);而对于E-Selectin,High dose组、Middle dose组、Verapamil组的血清含量显著下降(P<0.01),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:祛痰化瘀中药复方可缩短大鼠心电图AF的持续时间,改善心房肌细胞超微结构的损伤,降低AF大鼠血清中P-Selectin、E-Selectin的含量,抑制炎症反应和血栓前状态,从而拮抗AF的发生发展。

基于“痰瘀生风”理论探讨祛痰化瘀中药复方通过NLRP3炎症小体改善心房颤动的作用机制

目的 基于中医“痰瘀生风”理论,通过NLR家族PYRIN域蛋白3(nod-like receptor pyrin domain containing3,NLRP3)炎症小体研究祛痰化瘀中药复方对心房颤动(atrial fibrillation,AF)模型大鼠的作用机制。方法 60只健康雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,中药低、中、高剂量组和维拉帕米组。除空白组外其余大鼠以尾静脉注射乙酰胆碱-氯化钙(ACh-CaCl2)混合液建立AF模型。造模成功后中药低、中、高剂量组大鼠灌胃祛痰化瘀中药复方,维拉帕米组大鼠灌胃维拉帕米,持续2周,期间除空白组外仍持续尾静脉注射ACh-CaCl2混合液。心电图检测各组大鼠AF持续时间,超微电镜观察大鼠心房肌超微结构变化,Western blot测定大鼠心房肌中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing,ASC)、半胱天冬酶(cysteinyl aspartate specific proteinase, Caspase)-1蛋白表达量。结果 除空白组外,其余各组大鼠均出现典型AF改变。与模型组比较,中药低、中、高剂量组和维拉帕米组大鼠AF持续时间明显缩短(P<0.05,P<0.01)。空白组大鼠心房肌细胞完整清晰、结构完整;模型组大鼠心房肌细胞断裂、模糊、排列不规则,NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达较空白组明显升高(P<0.01)。与模型组比较,中药低、中、高剂量组和维拉帕米组大鼠心房肌受损情况有所改善,NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论NLRP3炎症小体在体内累积引发病理反应与“痰瘀生风”致悸的理论相合。祛痰化瘀中药复方可通过抑制NLRP3炎症小体信号通路减少心房肌细胞损伤,减轻炎症反应,发挥对AF大鼠的调节作用。

祛痰化瘀中药复方对心房颤动模型大鼠心肌超微结构及氧化应激的影响

目的 探讨祛痰化瘀中药复方治疗心房颤动(AF)的可能作用机制。方法 60只雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,维拉帕米组及祛痰化瘀高、中、低剂量组,每组10只。除空白组外其余各组大鼠采用尾静脉注射乙酰胆碱(Ach,66μg/ml)-氯化钙(CaCl2,10 mg/ml)混合液连续7天建立AF大鼠模型。从造模第2天起,祛痰化瘀高、中、低剂量组大鼠分别给予祛痰化瘀中药复方41.25、20.63、10.31 g/(kg·d)灌胃,维拉帕米组给予维拉帕米溶液25 mg/(kg·d)灌胃,空白组和模型组灌服8.93 ml/(kg·d)生理盐水,连续灌胃2周。最后一次灌胃后12 h记录各组大鼠肢体Ⅱ导联心电图,监测AF持续时间;透射电镜下观察各组大鼠心肌超微结构变化;ELISA法检测大鼠血清中晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 空白组大鼠为正常心电图,心房肌细胞的肌小节完整清晰,线粒体结构正常。与空白组相比,模型组大鼠心电图显示为AF心律,血清中AOPP、MDA、ROS含量升高,SOD含量降低(P<0.05或P<0.01),心房肌细胞的肌小节断裂,“Z”带不连续,排列混乱,“I”带模糊不清,线粒体肿胀、增多。与模型组比较,各给药组大鼠AF持续时间明显缩短;祛痰化瘀高、中剂量组大鼠血清AOPP、ROS、MDA含量降低,SOD含量升高(P<0.05或P<0.01),维拉帕米组大鼠血清AOPP、ROS含量降低,SOD含量升高(P<0.05);祛痰化瘀高、中剂量组和维拉帕米组大鼠心房肌细胞的肌小节轻微断裂,排列相对整齐,线粒体稍有肿胀、增多,结构相对完整,而祛痰化瘀低剂量组大鼠心肌超微结果改善不明显。结论 祛痰化瘀中药复方可以缩短心房颤动持续时间,改善心肌损伤,其机制可能与抑制氧化应激有关,且以高中剂量效果为佳。