健脾祛痰和血方通过调控铁死亡途径改善氧化低密度脂蛋白诱导的内皮损伤作用机制

目的 探讨健脾祛痰和血方通过调控铁死亡途径改善氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein, ox-LDL)诱导的内皮损伤的作用机制。方法 制备健脾祛痰和血方冻干粉。内皮细胞分为4组:空白组、模型组、健脾祛痰和血方组(JPQTHXD组)与阿托伐他汀组。CCK-8法检测健脾祛痰和血方对细胞的增殖活力;铁离子染色检测细胞内的铁含量;活性氧(ROS)检测不同组别细胞内活性氧的含量;RT-RCR及Western blot检测铁死亡相关蛋白GPX4、SLC7A11与P53的表达情况。结果 健脾祛痰和血方可显著促进ox-LDL诱导的HUVEC细胞生长,且呈一定的浓度依赖性;健脾祛痰和血方可降低细胞内铁离子与ROS含量;健脾祛痰和血方可以显著升高SLC7A11、GPX4 mRNA与蛋白表达水平,并且能够显著降低P53mRNA与蛋白表达水平。结论 健脾祛痰和血方对ox-LDL诱导的内皮损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能是通过铁死亡途径介导。

健脾祛痰和血方通过调控线粒体自噬对氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞损伤保护作用机制

目的探讨健脾祛痰和血方通过线粒体自噬对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞损伤保护作用的机制研究。方法制备健脾祛痰和血方含药血清并进行分组:对照组、ox-LDL组、健脾祛痰和血方(JPQTHXD)低剂量组、JPQTHXD中剂量组与JPQTHXD高剂量组。CCK-8法检测不同处理对RAW 264.7细胞的增殖影响;细胞免疫荧光检测LC3的表达;ROS检测不同组别细胞内活性氧的含量;RT-RCR及Western blot检测PINK1、Parkin、LC3基因及蛋白的表达。结果健脾祛痰和血方可显著减轻ox-LDL诱导后的RAW 264.7细胞损伤,可降低细胞内LC3与ROS含量;健脾祛痰和血方可以显著逆转ox-LDL引起的PINK1、Parkin与LC3 mRNA与蛋白表达的变化。结论健脾祛痰和血方对ox-LDL诱导的巨噬细胞损伤具有一定的保护作用,其机制主要是通过线粒体自噬介导。

基于网络药理学的健脾祛痰和血方治疗冠心病的分子机制研究

[目的]以网络药理学作为研究手段,研究健脾祛痰和血方治疗冠心病的作用靶点及信号通路,揭示健脾祛痰和血方治疗稳定型心绞痛的分子机制。[方法]采用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)、中医药信息数据库(TCMID)、中药潜在药物靶标数据库(TCM-PTD)检索该方剂对应的药物化合物,通过ChemMapper数据库预测药物靶点,通过TTD、disgenet、human phenotype ontology数据库进行检索,获得冠心病相关靶点,以venny图得到疾病及药物的共同靶点,应用功能蛋白结合网络string平台构建蛋白互作模型,采用cytoscape的cluego插件富集分析,得到该方剂治疗冠心病相关靶标基因及代谢通路。[结果]获得药物靶点103个,疾病靶点980个,健脾祛痰和血方42个药物靶点与冠心病相关,通过筛选得到主要药物成分9个,最终预测到25个相关的信号通路,在此基础上构建了主要药物成分-病药共性靶点-信号通路共表达网络。[结论]健脾祛痰和血方可能通过多靶点、多途径干预冠心病稳定型心绞痛,为后续基础及进一步临床研究提供思路和线索。