祛痰宁的祛痰抗炎、止咳平喘作用

祛痰宁００５～０４ｇ／ｋｇｉｇ及０１～０２５ｇ／ｋｇｓｃ给药有增强大小鼠气管排泌酚红的作用，其作用随剂量的增加而增强；０２～０８ｇ／ｋｇ能加强毛果芸香碱引起的小鼠流涎作用，作用随着剂量的增加而增强，０４ｇ／ｋｇ与必嗽平的作用相当；祛痰宁油０１０～０４０ｇ／ｋｇｉｇ１ｈ后能显著抑制鸡蛋清引起的足肿胀，其抑制作用随着剂量的增加而增强；０３ｇ／ｋｇｉｇ及００５ｇ／ｋｇｉｐ时对巴豆油致炎引起的鼠耳肿胀有明显的抑制作用；０１０ｇ／ｋｇｉｇ给药时对氨水刺激引起的咳嗽有止咳作用，０４０ｇ／ｋｇ的止咳作用与可待因００６ｇ／ｋｇ相当。实验结果表明祛痰宁的毒副作用小，治疗范围宽。

祛痰宁的抗炎、止咳、平喘作用

祛痰宁0.10—0.40g/kg ig给药能明显抑制鸡蛋清引起的大鼠足肿胀;0.05—0.20g/kg ip及0.10—0.40g/kg ig给药时,对巴豆油引起的小鼠耳肿胀有极强的抑制作用;0.10—0.40g/kg ig给药对浓氨水引起的小鼠咳嗽也有明显的抑制作用,但平喘作用不明显;昆明种小白鼠LD_(50)ig为4.64±0.84g/kg,ip为0.58±1.18g/kg。

祛痰宁对大、小鼠的祛痰作用

祛痰宁０．０５～０．４ｇ／ｋｇｉｇ给药能明显增强小鼠气管排泌酚红的作用，ｓｃ给药时作用更强，各剂量组间有明显的量效关系。排泌酚红的作用强于相同剂量杜鹃素。０．１～０。４ｇ／ｋｇ ｉｇ给药能增加大鼠毛细管排痰法的排痰量，作用优于同剂量的氯化铵。０．２～０．８ｇ／ｋｇ ｉｇ给药时加强毛果芸香碱引起的小鼠流涎作用，作用强度随剂量加大而增强。ＬＤ５０为４．４６±０．８４ｇ／ｋｇ，为上述有效剂量的２０倍以上。祛痰宁有可能成为一种疗效高、毒副作用小的新型祛痰药。

祛痰宁治疗慢性支气管炎痰阻气道症的临床研究

痰是呼吸系统疾病的三大主证之一,痰既是致病因素,又是病理产物。因此,从痰论治是呼吸系统疾病行之有效的治疗方法之一,我们从1993年4月～1995年4月,应用祛痰宁对120例慢性支气管炎热痰证痰阻气道症的患者进行了临床观察,现将结果报告如下。

祛痰宁心法治疗室性早搏的临床研究

笔者自1989年开始用祛痰宁心法制定祛痰定悸片治疗室性早搏,与服慢心律片进行了临床对照研究。一般资料观察对象共90例,男性58例,女性32例;其中年龄最小26岁,最大82岁,平均年龄58.5岁。患室性早搏的病程:最短7天,最长20年。原发疾病:冠心病59例,高血压心脏病9例,病毒性心肌炎14例,肺原性心脏病7例,风湿性心脏病1例。

祛痰宁神解郁方加减治疗失眠疗效观察

目的:探讨中药治疗失眠的方法。方法:以祛痰宁神解郁方加减治疗失眠38例。结果:总有效率为91.9%。结论:结合中医药理论,探讨运用中医药治疗失眠,有非常积极的临床意义。

健脾祛痰法治疗血脂异常研究概况

血脂异常在我国普遍存在,中医药干预血脂异常越来越得到人们的重视。中医学认为脾主运化水谷精微,脂质亦需要脾的运化功能布散周身。脾气虚则脾失健运,清气不升,浊阴独留,生湿生痰;痰湿进一步阻碍气机,影响脾胃运化,使脾虚更甚,加重脂浊,浸润血脉。近年来健脾祛痰法被越来越多地应用于血脂异常的防治中,且在临床中收到不错的疗效。

化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢的影响

目的基于CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢探讨化瘀祛痰方防治血脂异常的机制。方法32只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只。除空白对照组外,其他各组给予高脂饲料喂饲,建立高脂血症模型。于第13周开始,化瘀祛痰方组给予化瘀祛痰方灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀灌胃,空白对照组、模型组给予相应体积的生理盐水灌胃,每日1次,灌胃4周。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平;HE染色观察肝脏组织病理变化;Elisa检测各组大鼠肝脏14,15-环氧二十碳三烯酸(14,15-epoxyeicosatrienoic acid,14,15-EET)水平;Real time RT-PCR检测肝脏组织细胞色素P450表氧化酶2J3(Cytochrome P450 oxidase 2J3,CYP2J3)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(Carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1)mRNA水平;Western blot法检测肝脏组织CYP2J3、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-actived protein kinase,AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACC)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、CPT-1蛋白水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.05);肝脏脂质沉积显著,可见大量脂滴;肝脏组织内14,15-EET含量显著降低(P<0.01);肝脏CYP2J3、CPT-1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC显著降低(P<0.01)。与模型组比较,经化瘀祛痰方及辛伐他汀干预后,大鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著降低(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平显著升高(P<0.05);肝脏脂质沉积情况明显改善,脂滴数明显减少;肝脏组织内14,15-EET水平显著升高(P<0.01);肝脏CYP2J3、CPT-1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01),p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论化瘀祛痰方可有效改善高脂血症大鼠血脂异常,减轻肝脏脂质沉积情况,其机制可能与CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢密切相关。

基于EETs介导的细胞焦亡探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响

目的 探讨化瘀祛痰方对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响及机制。方法 将30只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组[20 g/(kg·d)]和瑞舒伐他汀组[1.55 mg/(kg·d)],每组10只,另取10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。ApoE-/-小鼠喂饲高脂饲料12周复制AS模型。造模成功后,各组小鼠灌胃相应药物或生理盐水,每日1次,连续4周。末次给药后,检测各组小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、5,6-环氧二十碳三烯酸(5,6-EET)、8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18水平,主动脉组织中核因子κB抑制蛋白(IκB)、核因子κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平和IκB、NF-κB、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白质(ASC)、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、IL-1β、IL-18蛋白表达水平,并观察主动脉组织形态学变化。结果 与模型组比较,化瘀祛痰方组及瑞舒伐他汀组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-18水平,主动脉组织中IκB、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平以及IκB、NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),血清中5,6-EET、8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET水平均显著升高(P<0.05);主动脉粥样斑块明显减少。结论 化瘀祛痰方可能通过EETs介导细胞焦亡发挥抗AS作用。

基于FXR-Srebp1c-FAS通路及CD36探讨祛痰活血方抗非酒精性脂肪性肝病的机制

目的 以内源性脂肪酸合成相关法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)-固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-bindingprotein-1c,Srebp1c)-脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)通路及外源性脂肪酸摄入相关的白细胞分化抗原36(cluster of differentiation 36,CD36)为切入点,探讨祛痰活血方抗非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的分子机制。方法 雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、模型组、祛痰活血方组和易善复组,每组各10只。模型组、祛痰活血方组和易善复组给予高脂饲料喂养,4周后祛痰活血方组和易善复组开始给药干预,给药8周后取各组小鼠血清用于生化检测;肝组织用于病理、肝脏总胆固醇(cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)含量及FXR、Srebp1c、FAS、CD36基因及蛋白表达的检测。结果 与对照组比较,模型组小鼠体质量、肝质量明显增加(P<0.05);肝组织病理结果及肝脏TC、TG含量的升高(P<0.01)均提示明显脂肪变性;肝组织FXR、Srebp1c的m RNA表达水平,以及CD36的m RNA和蛋白表达均明显上升(P<0.01),FAS蛋白表达下降(P<0.05);与模型组比较,祛痰活血组小鼠体质量、肝质量均明显降低(P<0.01);肝组织脂肪变性明显减轻;肝组织中FXR m RNA表达明显升高(P<0.01),Srebp1c、FAS、CD36的m RNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论 外源性脂肪酸摄入增加可能是高脂引起的NAFLD的主要成因,祛痰活血方既抑制外源性脂肪酸摄入,亦减少内源性脂肪酸合成,双向调节改善NAFLD。

益气活血祛痰方治疗支气管哮喘合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征气虚痰瘀证的研究

目的评价益气活血祛痰方联合西医治疗慢性持续期支气管哮喘合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征气虚痰瘀证患者的临床疗效。方法选择2016年1月—2021年6月于泰州市第四人民医院就诊的80例慢性持续期支气管哮喘合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征气虚痰瘀证患者,根据随机数字表分成对照组及观察组各40例,对照组给予常规治疗及持续气道正压通气,观察组在对照组治疗基础上给予益气活血祛痰方水煎液口服,2组均持续干预3个月。观察2组患者治疗前后中医证候积分(包括气喘、咳嗽、咳痰、打鼾、憋醒、日间嗜睡、倦怠乏力)、哮喘控制测试问卷(ACT)评分、圣乔治呼吸问卷(SGRQ)评分、Epworth嗜睡量表(ESS)评分、匹兹堡睡眠指数(PSQI)评分、肺功能指标[呼气峰值流速(PEF)、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%预计值)、第一秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV_(1)/FVC)]、多导睡眠图参数[呼吸暂停低通气指数(AHI)、快速眼动睡眠期(REM)、氧减指数(ODI)、动脉血氧饱和度(SaO_(2))、最低SaO_(2)、觉醒指数]、炎症相关指标[血清C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平和呼出气一氧化氮(FeNO)水平]变化,统计2组总体治疗效果及不良反应发生情况。结果2组治疗后中医证候积分、SGRQ评分、ESS评分、PSQI评分、AHI、ODI、觉醒指数及血清CRP、IL-6、TNF-α、VEGF水平和FeNO水平均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组上述各项指标均明显低于对照组(P均<0.05);2组治疗后ACT评分、PEF、FEV_(1)%预计值、FEV_(1)/FVC、REM、SaO_(2)、最低SaO_(2)均较治疗前明显升高(P均<0.05),且观察组上述各项指标均明显高于对照组(P均<0.05)。观察组治疗3个月后的总有效率明显高于对照组[92.5%(37/40)比82.5%(33/40),P<0.05],治疗期间不良反应发生率明显低于对照组[10.0%(4/40)比27.5%(11/40),P<0.05]。结论益气活血祛痰方联合西医治疗支气管哮喘合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征气虚痰瘀证患者的效果优于单纯西医治疗,在减轻患者临床症状,控制哮喘发作,改善肺功能和睡眠质量方面具有明显优势,其作用机制可能与抑制炎症反应相关。

扶正化瘀祛痰方治疗脑卒中恢复期医院获得性肺炎的临床研究

目的:探讨扶正化瘀祛痰方治疗脑卒中恢复期医院获得性肺炎临床治疗效果。方法:选取我院2022年7月—2023年7月收治的57例脑卒中恢复期合并医院获得性肺炎患者为研究对象,采取随机数字表法分为对照组29例和试验组28例,其中对照组实施常规西药治疗,试验组在对照组基础上实施扶正化瘀祛痰方治疗。对比两组临床治疗效率、中医证候积分、炎性指标、血常规、肝肾功能及不良反应发生情况。结果:试验组临床治疗总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后两组中医证候积分以及白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)及白介素-6(IL-6)指标均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);两组治疗前后红细胞压积(HCT)、血红蛋白(HB)、血小板指标(PLT)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血肌酐(SCR)指标均无统计学差异(P>0.05);两组不良反应总发生率对比无统计学差异(P>0.05)。结论:对脑卒中恢复期合并医院获得性肺炎患者积极实施扶正化瘀祛痰方治疗,可取得更为理想的治疗效果,积极改善患者临床症状、炎性指标,且治疗方式相对安全。

健脾祛痰中药对胸腔镜老年肺癌根治术患者排痰效果和细胞免疫功能的影响

研究健脾祛痰中药运用在胸腔镜老年肺癌根治术患者中的排痰效果以及对细胞免疫功能产生的影响。方法 选择2021年7月-2023年12月到柳州市人民医院接受胸腔镜老年肺癌根治术患者共100例,随机分为观察和对照两组,分析治疗效果。结果 观察组总有效率高于对照组,P<0.05;治疗后,观察组免疫功能高于对照组,P<0.05;治疗后,观察组症状积分低于对照组,P<0.05;观察组24h平均排痰量、住院时间低于对照组,P<0.05。结论 运用健脾祛痰中药对胸腔镜老年肺癌根治术患者治疗,可提升排痰效果,改善其细胞免疫功能、症状积分,缩短住院时间,建议运用。

基于网络药理学和分子对接技术探讨止咳祛痰口服液治疗慢性支气管炎的作用机制

目的运用网络药理学和分子对接技术初步揭示止咳祛痰口服液治疗慢性支气管炎的作用机制。方法运用TCMSP数据库,设置口服生物利用度和类药性的数值大小筛选预测止咳祛痰口服液的潜在化学成分和靶点,通过UniProt数据库对靶点进行统一命名,并获得相应基因名称。通过TTD、OMIM和GeneCards获取慢性支气管炎的靶点。将复方靶点和疾病靶点通过Draw Venn Diagram在线工具获取共有靶点。用Cytoscape 3.7.1软件绘制药物-成分-靶点网络和蛋白相互作用网络图,运用Metascape数据库进行KEGG通路和GO功能富集分析。最后用PyMOL和AutoDock Tools软件进行分子对接。结果共筛选得到潜在活性化学成分135种,其中紫菀19种,射干17种,桔梗7种,甘草92种;复方对应靶点335个,疾病对应靶点1145个,复方和疾病的共有靶点208个;止咳祛痰口服液中关联靶点数排名前5位的潜在活性成分为异鼠李素(Isorhamnetin)、甲基鼠李素(Rhamnazin)、山柰酚(Kaempferol)、槲皮素(Quercetin)、豆甾醇(Stigmasterol),蛋白度值排名前5的靶点蛋白质为TP53、AKT1、BEGFA、Caspase-3和CXCL8。通过KEGG通路和GO功能富集分析,推测止咳祛痰口服液可能通过TP53、AKT1、Caspase-3、CXCL8等靶点进一步调控NF-κB和PI3K-Akt等信号通路而发挥治疗慢性支气管炎的作用。结论止咳祛痰口服液能够通过多成分、多靶点、多通路、多机制治疗慢性支气管炎。

温肺扶阳祛痰方治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期的疗效

目的探讨温肺扶阳祛痰方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期疗效。方法选取COPD稳定期患者120例,随机分为两组。对照组应用噻托溴铵吸入粉雾剂^(+)茶碱缓释片,研究组在此基础上应用温肺扶阳祛痰方,对两组的肺功能、免疫、炎症因子指标以及生活质量进行评估,确定其应用价值。结果和对照组比较,研究组治疗后用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)、6 min步行距离(6MWD)均增大(P<0.05),CAT评分降低(P<0.05)。研究组治疗后C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)水平均低于对照组(P<0.05)。研究组治疗后CD4^(+)、CD8^(+)T细胞比例、IgA、IgG水平优于对照组(P<0.05)。结论COPD稳定期患者在常规西药治疗基础上应用温肺扶阳祛痰方治疗效果更佳,可以有效降低机体中的炎症因子水平,提高患者肺功能和免疫功能,值得推广应用。

健脾祛痰方干预血脂异常临床疗效及对肠道菌群的影响

目的通过观察健脾祛痰方对脾虚痰浊型血脂异常患者的血脂水平、中医证候积分的影响,分析正常与高脂人群、中药治疗前后患者肠道菌群的结构变化,以明确健脾祛痰方降脂的临床疗效,探索健脾祛痰法降脂的作用机制。方法在辽宁中医药大学附属医院纳入正常及脾虚痰浊血脂异常受试者共计180例,按照就诊顺序随机分为正常组、模型组、健脾祛痰方组,每组60例。所有组别均予健康宣教,健脾祛痰方组予健脾祛痰方颗粒剂冲服,治疗疗程为2个月。采用全自动分析仪检测所有受试者血清胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High Density Lipoprotein,HDL-C)水平,用中医证候积分量表评定患者中医证候疗效,酶联免疫吸附测定法测定受试者血清人成纤维细胞生长因子19(FGF19)的表达水平,16SrRNA高通量测序技术检测受试者粪便标本肠道菌群的结构变化。结果脾虚痰浊型血脂异常患者经健脾祛痰方治疗后血脂水平,中医证候积分较治疗前明显改善,血清中FGF19含量明显降低;健脾祛痰方组血脂疗效、中医证候积分总有效率显著优于模型组。高脂人群菌群多样性和物种丰度与正常人群相比明显减弱。有益菌减少,肠杆菌过生长,肠道菌群结构被破坏。健脾祛痰方组患者用药后样本间差异明显,各分类水平物种组成比例发生变化,编码胆盐水解酶(Bile Salt Hydrolase,BSH)相关微生物丰度降低。用药后肠道中的有害菌肠杆菌目(Enterobacteriales)减少,肠道菌群平衡有所恢复。结论健脾祛痰法能够显著降低血脂异常患者TC、TG、LDL-C水平,改善中医证候,其机制可能通过调节肠道菌群和胆汁酸代谢抑制FXR信号传导通路以降脂。

皖产桐桔梗祛痰、平喘、止咳、抗炎有效部位筛选

目的:揭示皖产桐桔梗发挥祛痰、平喘、止咳、抗炎活性的有效部位。方法:采用回流提取法和大孔吸附树脂技术制备桐桔梗不同提取分离部位;采用小鼠酚红祛痰模型筛选桐桔梗祛痰有效部位;采用磷酸组胺联合氯化乙酰胆碱致小鼠哮喘模型筛选桐桔梗平喘有效部位;采用浓氨水喷雾致小鼠咳嗽模型筛选桐桔梗止咳有效部位;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎性反应模型筛选桐桔梗抗炎有效部位。结果:桐桔梗乙醇提取物、20%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位均显示出不同程度的祛痰、平喘、止咳、抗炎作用,其中桐桔梗70%乙醇洗脱部位的活性最强,且呈量效关系。桐桔梗70%乙醇洗脱部位可显著增加小鼠气管酚红排泄量(P<0.001),显著延长磷酸组胺联合氯化乙酰胆碱致哮喘小鼠的引喘潜伏期并减少小鼠抽搐跌倒只数(P<0.001),明显延长浓氨水引咳小鼠的咳嗽潜伏期(P<0.001)并改善其肺部组织损伤,显著降低浓氨水引咳小鼠的咳嗽次数及其血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6的水平(P<0.001),显著降低二甲苯致耳廓肿胀小鼠的耳廓肿胀度及其血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平(P<0.01,P<0.001)。结论:70%乙醇洗脱部位是桐桔梗发挥祛痰、平喘、止咳、抗炎作用的主要活性部位,为阐明桐桔梗药效物质基础及作用机制提供数据支撑。

基于网络药理学探讨祛痰合剂祛痰镇咳的作用机制

目的:基于网络药理学方法,探讨祛痰合剂的祛痰镇咳作用机制。方法:从中药系统药理学数据库与分析平台、Symmap数据库和BATMAN数据库获取祛痰合剂的成分,以口服生物利用度≥30%、化合物类药性≥0.18为标准筛选出药物中的有效成分,利用PubChem数据库和SwissTargetPrediction数据库筛选活性成分并预测其作用靶点,通过Cytoscape构建疾病-药物-成分-靶点网络;利用STRING数据库对靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用分析,并通过R语言计算核心靶点,最后采用DAVID数据库对药物作用疾病相关靶点进行基因本体功能富集分析和京都基因与基因组百科全书通路富集分析。结果:通过筛选得到22个主要活性成分、药物-疾病相关靶点298个,提示祛痰合剂可能是通过药物应答、磷脂酶C激活G蛋白偶联受体信号通路及细胞增殖正向调节作用等生物过程,酶结合、蛋白激酶活性及药物结合等分子功能发挥祛痰镇咳的作用,其机制可能与神经活性配体-受体相互作用、环腺苷酸信号途径和钙信号通路等多个通路的调控作用密切相关。结论:祛痰合剂可以通过多成分、多靶点、多通路的方式发挥其祛痰镇咳的作用机制,本研究为进一步探索祛痰合剂祛痰镇咳的机制奠定了研究基础。

基于AMPK调控ACC/CPT1信号通路介导脂肪酸代谢探究化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响

目的 观察化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响,并探究其作用机制。方法 采用1 mmol/L油酸棕榈酸混合液诱导HepG2细胞24 h构建脂质沉积模型,分别给予化瘀祛痰方含药血清、AMP依赖的蛋白激酶[Adenosine 5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase, AMPK]抑制剂及抑制剂+中药联合干预,油红O染色观察脂质沉积情况,试剂盒检测细胞中甘油三酯(triglyceride, TG)含量,蛋白印迹法检测AMPK、p-AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase, ACC)、p-ACC、肉碱棕榈酰基转移酶-1(Carnitine Palmitoyltransferase-1,CPT1)蛋白相对表达量,以及实时荧光定量法检测细胞中AMPK、ACC、CPT1 mRNA相对表达水平。结果 与模型组相比,化瘀祛痰方含药血清组细胞中脂滴数目减少、TG水平降低,细胞中p-AMPK、CPT1蛋白及CPT1 mRNA相对表达量升高,ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量显著降低(P<0.01),AMPK蛋白及基因相对表达水平无明显差别(P>0.05);AMPK抑制剂组细胞中脂滴及TG含量升高,AMPK、CPT1蛋白及mRNA相对表达量降低,ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量升高(P<0.05或P<0.01);与AMPK抑制剂相比,抑制剂+中药含药血清组细胞中脂滴数目减少、TG水平降低,AMPK、p-AMPK蛋白及AMPK mRNA相对表达水平无显著差异(P>0.05),ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量降低、CPT1则相对表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论 化瘀祛痰方含药血清可能通过激活AMPK使其磷酸化,并调控ACC/CPT1信号通路,抑制脂肪酸合成,促进脂肪酸氧化,从而降低HepG2细胞内的甘油三酯水平及脂质沉积。