嗅鞘细胞与神经修复材料共培养的实验研究

探索了一种分离纯化嗅鞘细胞(Olfactory Ensheathing Cells,OECs)的简单易行的新方法,将OECs与合成材料聚羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸(简称PLGK)以及聚乳酸共培养,比较并筛选合适的神经修复材料。通过水接触角测试、材料对细胞黏附率测试、台盼蓝染色,计算材料表面细胞存活率以及扫描电镜观察材料表面细胞生长状况;结果得到了纯度达90%,数量达到3×106的嗅鞘细胞,共培养后测试结果表明PLGK与聚乳酸(PDLLA)比较具有更好的亲水性、细胞黏附能力和存活率以及良好的细胞生长状况。

新型细胞外基质源性神经修复材料的制备与评价

背景周围神经损伤及缺损是临床常见病、多发病,长段缺损的治疗效果并不理想。目的探索新型细胞外基质源性神经修复材料的制备方法并评价其物理化学性质。方法无菌条件下提取新鲜猪坐骨神经,剔除神经外脂肪、血管等结缔组织备用。新鲜组:将剥除好的猪坐骨神经冷冻干燥,作为对照组;0.5%SDS 48 h组:将剥除好的猪坐骨神经置于浓度为0.5%的十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)溶液中,去细胞处理48 h,后冷冻干燥;0.5%SDS 48 h+scCO_(2)组:重复0.5%SDS 48 h组制备后,将获取的神经置于超临界二氧化碳(supercritical carbon dioxide,scCO_(2))中行去除脂肪处理。将制备好的三组神经细胞外基质移植物分别行物理性能测定(外观和规格尺寸)、组织学观察(HE染色、Laminin/DAPI免疫荧光染色和油红O脂肪染色)、DNA含量测定和扫描电镜观察等。结果大体观察,处理后的神经长度稍缩短,直径稍增大,呈乳白色半透明状,大体轮廓仍完整,质地较处理前疏松;HE染色显示,0.5%SDS 48 h组和0.5%SDS 48 h+scCO_(2)组神经均未见细胞核;Laminin(层粘连蛋白)/DAPI染色显示,0.5%SDS 48 h组和0.5%SDS 48 h+scCO_(2)组神经内膜管状结构存在,未见细胞核;油红O脂肪染色显示,0.5%SDS 48h组脂肪未见明显减少;0.5%SDS 48 h+scCO_(2)组脂肪明显减少;DNA含量测定显示,0.5%SDS 48h组DNA含量下降(706.7 ng/mg降至59.6 ng/mg,P<0.01),0.5%SDS 48 h+scCO_(2)组DNA含量下降(59.6 ng/mg降至49.2 ng/mg,P<0.05);扫描电镜观察,0.5%SDS 48 h组和0.5%SDS 48 h+scCO_(2)组内部可见明显的神经内膜管状结构,未见髓鞘和轴突。结论1)本实验制备的新型细胞外基质源性神经修复材料,清除了内部的髓鞘、轴突和脂肪等抑制神经再生的成分;同时保留了层粘连蛋白和神经内膜管状结构等促进神经再生的成分和结构。2)综合评价两组神经修复材料的物理结构和生物化学成分,0.5%SDS 48 h+scCO_(2)组优于0.5%SDS 48 h组。

医院卫生技术评估在医用耗材管理应用中的探索——以某周围神经缺损修复材料为例

目的围绕上海某三级医院在用周围神经缺损修复材料开展HB-HTA研究,探索HB-HTA对医院在用耗材规范管理的作用。方法以欧盟的HB-HTA手册为指导原则,以国家卫生健康委医疗管理服务指导中心HB-HTA试点的评估报告模板为研究框架开展研究。结果神经导管仅在修复短距离周围神经缺损时效果较好,同种异体材料修复长距离周围神经缺损效果较好。评估期间,创伤组进一步严格控制材料适应症,同种异体材料的使用比例有所下降,此类材料总体均价从12996元降到11189元。结论该HB-HTA研究模式可为临床合理使用耗材提供证据,有助于合理控费,能协助耗材管理科进一步规范耗材管理。闭环的HB-HTA评估应用更能提升管理效果。

嗅鞘细胞与神经修复支架材料的相互作用(英文)

目的:探讨一种提取高纯度和一定数量的嗅鞘细胞( OECs)的新方法,并研究其与神经支架修复材料PLGL的生物相容性。方法:从新生的Wister大鼠身上分离制备嗅鞘细胞并与PLGL共同培养。测量其接触角、吸附率、存活率等。结果:PDLLA的接触角( 84.5°±1.5°)明显大于PLGL的接触角(52.6°±0.8°)。PLGL的吸附率(80%)明显高于PDLLA(57%)。PLGL的细胞存活率( 88%)明显高于PDLLA(76%)。结论:PLGL比PDLLA具有更好的亲水性、存活率以及良好的细胞生长状况。