小鼠脊髓背角Ⅰ层-PAG投射神经元短时程突触可塑性的特征研究

目的:研究小鼠脊髓背角Ⅰ层向中脑导水管周围灰质(periaquaductal gray,PAG)投射神经元在双脉冲刺激下表现出来的短时程突触可塑性的特点。方法:选取18~21 d C57/Bl6小鼠,脑立体定位注射2.5%Di I(100 nl)至PAG,2~3 d后制备400~650μm带背根的脊髓薄片,孵育1 h后用全细胞膜片钳技术记录Di Ⅰ阳性标记的脊髓背角Ⅰ层向PAG投射(spino-PAG)神经元,在判断其为单突触传递后,给予时间间隔为110 ms的双脉冲刺激诱致刺激外周C纤维诱发的C-e EPSCs,观察其短时程突触可塑性的特点。结果:(1)应用脑立体定位注射技术向PAG注射荧光素Di Ⅰ后可在脊髓背角Ⅰ层检测到逆行标记的神经元,提示该神经元为向PAG投射的神经元(spino-PAG投射神经元)。(2)在给予脊神经背根时间间隔为110 ms的双脉冲刺激后,脊髓背角Ⅰ层spino-PAG投射神经元发生不同程度和性质的短时程突触可塑性改变。其中,52.8%(28/53)的神经元表现为短时程的双脉冲易化(paired-pulse facilitation,PPF),其PPR的平均值为1.76±0.18;47.2%(25/53)的神经元表现为短时程的双脉冲抑制(paired-pulse depression,PPD),其PPR的平均值为0.61±0.05。结论:双脉冲刺激脊神经背根诱致C-e EPSCs可使脊髓背角I层spino-PAG神经元呈现短时程易化和短时程抑制的突触可塑性特征,提示这种短时程突触可塑性可能在痛信息的传递和敏化过程中发挥重要作用。

大鼠三叉-小脑投射神经元表达磷酸激活的谷氨酰胺酶——双标法研究(英文)

磷酸激活的谷氨酰胺酶 (phosphateactivatedglutaminase,PAG)可作为谷氨酸能神经元的标志物。采用逆行束路追踪技术和PAG免疫荧光组织化学法 ,研究脑干三叉核团复合体中向小脑袢状小叶Crus1区投射神经元是否呈PAG样免疫反应阳性。结果表明 :将荧光金 (Fluoro Gold ,FG)注入小脑袢状小叶Crus1区后 ,在三叉神经感觉主核 (Pr5 )、三叉神经脊束核极间亚核 (Sp5I)和吻侧亚核背内侧部 (Sp5DM)、三叉间核 (I5 )以及三叉神经运动核与上橄榄核之间的一个小区域 (nucleusJ)中均可见到FG逆行标记细胞。标记细胞出现在上述核团的双侧 ,但以同侧为主。PAG免疫荧光组织化学反应结果显示 :许多FG标记神经元呈强PAG样免疫阳性 ,其中FG/PAG双标神经元占FG逆行标记神经元总数的 73%～ 94 %。结果提示 :脑干三叉神经核团中的谷氨酸能神经元可能参与触觉信息从面口部向小脑的传递。

大鼠脊髓向延髓网状背侧亚核投射神经元的形态及分布

既往的电生理学研究已经证实，位于延髓尾侧部的网状背侧亚核（subnucleusretlcularlsdorsalls．SRD）对伤害性信息的调控具有重要作用j'，SRD神经元可被来自全身各部的AS或C纤维的冲动所兴奋，这种兴奋可被吗啡抑制，又可被纳洛酮所翻转"。。形态学研究也表明，在脊髓和S...

鸡基底前脑胆碱能皮质投射神经元区的ChAT样免疫反应神经元

应用免疫组织化学SP法 ,对 5只产蛋高峰期鸡基底前脑胆碱能皮质投射神经元区的ChAT样免疫反应神经元的分布特征进行了研究。结果发现 :从内侧隔核至Meynert基底核 ,ChAT样免疫反应神经元呈连续性分布 ,且各区神经元的密度、大小及着色强度不均。MS、NDBV/H及旧纹体膨大部的阳性细胞分布密集 ,且突起较明显 ;原始旧纹体部阳性细胞分布稀疏 ,突起明显。结果表明 ,在鸡的基底前脑胆碱能皮质投射神经元区广泛分布着ChAT样免疫反应神经元 ,这为鸡的基底前脑—海马投射系统积累了资料 ,表明该区在鸡的学习、记忆中起着重要的调节作用。

吗啡对神经损伤性大鼠脊髓背角投射神经元的影响

目的:探讨吗啡对神经损伤性大鼠脊髓背角投射神经元诱发放电的影响及其作用机制。方法:采用Chung模型建立慢性神经性疼痛大鼠模型,行为学方法测试机械刺激缩足阈值判断模型是否成功。单个神经元记录法记录脊髓背角投射神经元放电活动。实验分正常大鼠组(N组),假手术组(S)和神经损伤性大鼠组(I组)。3组在脊髓表面予以吗啡、荷包牡丹碱(BIC)和番木鳖碱(STN)前后,以不同级别机械刺激足部感受野,分别记录脊髓背角投射神经元诱发放电活动。结果:脊髓表面用10μmol/L吗啡能显著抑制3组大鼠脊髓背角投射神经元的诱发性放电活动。与基础值相比,N组和S组压力刺激抑制了72%±6%(P<0.05),钳夹刺激抑制了76%±5%(P<0.05),但I组抑制作用显著低于N组和S组,压力与钳夹刺激与基础值比分别抑制32%±4%和26%±3%(P<0.05);而予以BIC阻断GABAA受体后,N组和S组吗啡的抑制作用明显减弱(P<0.05),I组吗啡的抑制作用无明显改变(P>0.05);STN阻断甘氨酸受体后,3组吗啡的抑制作用无明显区别;GABAA受体和甘氨酸受体同时阻断后,吗啡无明显抑制作用。结论:吗啡对慢性神经损伤性大鼠脊髓背角投射神经元诱发性放电活动的抑制作用明显减弱,主要与慢性神经损伤性大鼠脊髓GABA减少有关。

猫丘脑中央外侧核内丘脑皮质投射神经元的超微结构及其突触联系

应用HRP逆行追踪法在电镜水平上对猫丘脑中央外侧核内皮质投射神经元的超微结构及其突触联系首次进行了研究.该核内皮质投射神经元以中型多见,胞核较大,核仁清晰,偏位,核膜有凹陷,常染色质较多,胞质内含丰富的线粒体、游离核糖体和粗面内质网.标记树突直径变化较大,从0.68μm 到 4.4μm,含较多的线粒体、微管及滑面内质网,未见突触小泡.标记的皮质投射神经元胞体和树突做为突触后成分,与非标记的突触前成分形成下列突触:(1)轴-树突触;(2)轴-体突触;(3)树-树突触;(4)轴-轴树突触;(5)突触复合体,许多标记树实做为中央村实参与形成汇聚型突触复合体.

猫颈外侧核内颈丘脑投射神经元的超微结构及其突触联系

猫颈外侧核接受来自同侧脊髓后角的脊颈束 ,其传出纤维投射至对侧的丘脑腹后外侧核。该通路与传导皮肤的伤害性信息有关。本文采用 HRP逆行追踪技术 ,在电镜水平研究了猫颈外侧核内颈丘脑投射神经元的超微结构及其突触联系。将 HRP注入猫左侧丘脑腹后外侧核 ,经颈总动脉灌流固定 ,TMB法呈色反应。选取右侧颈外侧核内有 HRP标记的细胞制备电镜标本 ,透射电镜观察。结果发现 ,颈外侧核内出现大、中型 HRP标记神经元 ,细胞核为卵圆形 ,可见核仁 ,胞浆丰富 ,含有多量的线粒体等细胞内器 ,HRP反应产物散在于其中。在颈丘脑投射神经元胞体的周围见有 HRP标记的树突以及非标记的轴突、神经元胞体及树突。 HRP标记的颈丘脑投射神经元作为突触后成分与其他成分形成轴 -树突触 ,轴 -体突触 ,轴 -轴 -体突触及轴 -树突触复合体。这些结果提示

大鼠三叉神经尾侧亚核丘脑投射神经元与初级传入和中缝大核下行投射纤维间的突触联系

用束路追踪和免疫电镜方法研究了大鼠三叉神经尾侧亚核丘脑投射神经元与初级传入和中缝大核下行投射纤维间的突触联系。光镜观察发现，HRP跨节标记三叉神经传入终末与中缝大核（RMg）顺行追踪的PHA－L标记终末在三叉神经尾侧亚核（Vc）浅层有重叠分布。在Vc浅层丘脑投射神经元与初级传入和RMg下行投射的分布也有重叠。电镜观察发现初级传入终末和丘脑投射神经元树突形成非对称性轴树突触；而RMg下行投射终末与三叉丘脑投射神经元树突形成对称性或非对称性轴树突触，提示RMg下行投射纤维可能通过直接作用于丘脑投射神经元对初级传入的伤害性信息进行调控。

猫丘脑中央外侧核内脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间的突触联系

本实验应用顺行溃变和HRP逆行追踪相结合的方法，首次在电镜水平对猫丘脑中央外侧核内脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间的突触联系进行了研究．在脊髓第4颈段刀切损毁一侧侧索和前索后，将HRP注射于同侧大脑前上薛氏回和中上薛氏回前端。在电镜下于损毁同侧中央外侧核内可见下列突触连结：（1）溃变的脊丘系轴突终末与标记树突形成的轴-树突触；（2）溃变的脊丘系轴突终末与非标记树突形成的轴-树突触，个别非标记树突含有突触小泡；（3）正常的轴突终末与HRP标记树突和胞体形成的轴-树突触和轮一体突触；（4）正常的两个轴突终末与HRP标记树突形成的轴-轴-树连续性突触；（5）非标记的含突触小泡的突触前树突与HRP标记树突形成的树-树突触。同时可见大量汇聚型突触复合体。本文首次报道在丘脑中央外侧核内，脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间存在着直接的突触联系。

躯体与内脏信息在脊髓背角投射神经元上的会聚

躯体与内脏或体表与脏腑之间的相互作用,是祖国医学和现代医学均争相问鼎的一个前沿课题。祖国医学的体表与脏腑相关理论已沿袭几千年,现代医学的躯体内脏相关学说也已经历100多年,但其神经基础,特别是细胞基础一直处于推理阶段,缺少有说服力的实验证据。

大鼠三叉神经本体觉中枢通路上第三级核团内PV样阳性终末与丘脑投射神经元的突触联系(英文)

目的 观察大鼠三叉神经本体觉中枢通路上第三级核团内Parvalbumin样阳性轴突终末与丘脑投射神经元之间是否存在突触联系。 方法 用HRP逆行追踪和包埋前免疫电镜相结合的双重标记法。将WGA HRP注入丘脑腹后内侧核逆行标记投射神经元。 结果 WGA HRP注入丘脑腹后内侧核 (VPM)后 ,WGA HRP标记神经元主要分布在感觉主核背内侧部 (Vpdm)、三叉上核尾外侧部 (Vsup CL)以及三叉神经运动核腹侧区 (AVM)和上橄榄核背侧区 (ADO)。电镜下可见PV样阳性神经元的轴突终末与WGA HRP标记的胞体或者树突形成突触联系。另外PV阴性神经元的轴突终末也与WGA HRP标记的胞体或树突形成突触联系 ,这些胞体或树突偶尔为PV阳性。 结论 在三叉神经本体感觉信息从第三级神经元向丘脑腹后内侧核 (VPM)传递的过程中 ,PV样阳性神经元可能通过突触传递机制而发挥作用。

三种新发现的脊髓背角双投射神经元的特征与意义

198 0年来 ,我室用解剖学和 (或 )生理学方法鉴定出了脊颈束 /背索突触后 (SCT/DCPS) ,脊孤束 /背索突触后 (SST/DCPS)和脊颈束 /脊孤束 (SCT/SST)等三种脊髓背角神经元。这些神经元以经其各自的分叉轴突分别向两个靶核投射为特征。它们的另一特征是具有会聚性躯体 内脏觉传入输入。部分神经元除通过分叉初级传入从外周接受躯体 内脏感觉输入外 ,还从中枢神经系统各自的靶核接受躯体 内脏觉输入。这些发现对牵涉痛和针刺镇痛的发生机制提供新的理解。

雄激素对成年雌性斑胸草雀RA核团投射神经元电生理特性的影响

以成年雌性斑胸草雀为实验材料,利用膜片钳技术,探究埋植睾酮后RA(robust nucleus of the arcopallium)核团投射神经元电生理特性.研究结果显示:埋植组与正常雌鸟组相比,动作电位半宽显著减小,后超极化达峰值时间极显著缩短,膜输入阻抗显著减小,膜电容极显著增大.提示埋植睾酮后RA核团投射神经元的兴奋性提高,趋于雄性化.推测雄激素在一定程度上提高RA核团投射神经元兴奋性,进而使其长鸣趋于雄性化.

对底丘脑核投射神经元的动作电位的仿真

目的:介绍了神经元的间室模型和底丘脑核投射神经元的动作电位的仿真方法。方法:将神经元分成一个个间室,每个间室分列微分方程。具体实验中利用"Neuron"这个神经元仿真计算平台对底丘脑核投射神经元的动作电位进行仿真。结果:当神经元结构比较复杂,膜的特性具有电压依从性,膜上有突触后电流的时候,间室模型能很好地反映了复杂神经元的电学特性。底丘脑核投射神经元的动作电位仿真结果和真正的动作电位结果非常相似。结论:间室模型很好地反映了复杂神经元的电学特性。底丘脑核投射神经元的动作电位仿真结果和真正的动作电位结果非常吻合。

dmPFC-vlPAG投射神经元参与维持疼痛阈值和抗焦虑行为

慢性痛不仅是持续的疼痛感受,还会导致焦虑、抑郁等负性情绪,严重影响慢性痛病人的生活质量。前额叶皮层是疼痛调制的关键皮层,然而慢性痛中前额叶皮层的基本神经通路和特定细胞类型的功能目前仍不清楚。李云庆教授团队结合多种形态学和跨突触病毒示踪的方法,详细阐述了下行疼痛调控神经通路—背内侧前额叶皮质(dorsal medial prefrontal cortex, dm PFC)-腹外侧中脑导水管周围灰质(ventrolateral periaqueductal gray, vl PAG)在慢性痛调控的重要作用。

纹状体多棘投射神经元在运动控制过程中的调控模式研究进展

基底神经节在人体随意运动的控制及精细运动调控中发挥重要作用。纹状体是基底神经节中接受大脑皮层信息输入的主要核团,其背侧部主要参与运动速度、运动方向等指令的发放[1]。大量研究普遍认为基底神经节实现运动控制功能是通过不同神经通路来完成的:①直接通路:纹状体(striatum,Str)→苍白球内侧部(globus pallidus internus,GPi)/黑质网状部(subtantia nigra pars reticulata,SNr),通常认为直接通路与随意运动的执行相关;②间接通路:纹状体→苍白球外侧部(globus pallidus externus,GPe)→丘脑底核(subthalamic nucleus,STN)→苍白球内侧部/黑质网状部,通常认为间接通路与随意运动的抑制相关;③超直接通路:丘脑底核→苍白球内侧部/黑质网状部,超直接通路直接接受来自皮层的信息,通常认为其与抑制无效的随意运动相关[2]。最近研究发现,当运动发起和执行时,直接和间接通路被同时激活,以协同工作的模式发放运动指令,协调配合进行运动控制[3]。

猫后索核内后根初级传入终末与丘脑投射神经元之间的突触联系

用ＨＲＰ逆行追踪与顺行演变相结合的方法，研究了猫后索核内初级传入终末与丘脑投射神经元之间的突触联系形式。在电镜下可见后东核内有５种突触联系形式：１．溃变轴突终末与ＨＲＰ标记树突形成的轴一树突触；２．演变轴突终未与ＨＲＰ标记胞体形成的轴一体突触；３．溃变轴突终末与非标记树突形成的轴一树突触，４．轴－轴－树连续性突触；５．非溃变的含扁平小泡或多形小泡轴突终末与ＨＲＰ标记的神经元胞体形成的轴一体突触。本文首次报道了猫后根初级传入终未与后东核丘脑投射神经元间的直接突触联系形式为轴－树和轴－体突触，同时也报道了以树突为中心的突触复合体。本研究结果为阐明后索核内非伤害性信息传递与整合的作用方式提供了直接的形态学资料。

内侧前额叶皮层-基底外侧杏仁核投射神经元分层亚群的解剖学研究

目的·从脑区特异性和皮层分层特异性水平上精细解析小鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,mPFC)-基底外侧杏仁核(basolateral amygdala,BLA)投射神经元亚群的解剖学结构。方法·给C57BL/6小鼠BLA注射逆向示踪腺相关病毒,21 d后,心脏灌流并取脑。使用冰冻切片机制作mPFC的连续冠状切片,利用荧光显微镜采集脑片图像,选取具有mPFC分区代表性的脑片,统计分析病毒标记的胞体在mPFC内不同亚区的分布情况。采用转基因小鼠(Tbr2-CreER::LSL-Flp小鼠和Rbp4-Cre小鼠)与重组酶(Flp和Cre)依赖的腺相关病毒,特异性地荧光标记小鼠mPFC第2层与第5层投射神经元的胞体及其在BLA内的投射轴突;病毒注射28 d后,同样灌流、取脑,收集BLA的连续冠状切片,免疫荧光染色标记后在荧光显微镜下采集脑片图像;通过测定BLA内不同区域投射轴突的荧光强度,比较mPFC第2层与第5层神经元在BLA投射轴突的空间分布情况。结果·荧光显微镜观察及定量分析结果表明:BLA投射神经元的胞体在包含前扣带回皮层和前边缘皮层的背内侧前额叶皮层(dorsal medial prefrontal cortex,dmPFC)中分布较多,且主要分布在第2层和第5层;而在包含内侧眶额叶皮层和下边缘皮层的腹内侧前额叶皮层(ventral medial prefrontal cortex,vmPFC)中分布较少,且没有观察到明显的分层现象。随后,在研究dmPFC的2个分层投射神经元的轴突分布时发现:在BLA内,第2层投射神经元的轴突分布较为均匀,而第5层投射神经元的轴突则更多分布在背侧区。结论·mPFC-BLA投射神经元的胞体分布具有脑区分布特异性和层分布特异性,dmPFC中不同层神经元的轴突投射在BLA也具有相应的脑区特异性。

猫外侧颈核内脊颈纤维终末与颈丘脑投射神经元间的突触联系

本实验采用顺行溃变和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法研究了猫脊颈丘脑通路在外侧颈核水平的突触联系。在脊髓颈段刀切损毁一侧背外侧索后将ＨＲＰ注射于对侧丘脑腹后外侧核。在电镜下于损毁同侧的外侧颈核内可见到下列突触联系：（１）溃变的轴突终末与ＨＲＰ标记的树突形成的轴—树突触；（２）溃变的轴突终末与标记的神经元胞体形成的轴—体突触；（３）溃变的轴突终末及正常的轴突终末与标记的中央树突形成的汇聚型突触复合体；（４）溃变的轴突终末与非标记的神经元树突和胞体形成的轴—树和轴—体突触；（５）正常轴突终末与标记的神经元树突和胞体形成的轴—树和轴—体突触。此外，在正常的神经元成分之间还可见到许多类型的突触。