白芍总苷对脑缺血再灌注大鼠缺血区神经元再生的保护作用

目的探讨白芍总苷对中动脉缺血大鼠缺血区神经元再生的保护作用机制。方法将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注组(MCAO组)、白芍总苷组(TGP200mg/kg)、白芍总苷+抑制剂组(TGP+PD173074组,TGP200 mg/kg+PD1730742 mg/kg),每组10只。制备中动脉栓塞大鼠缺血模型,2 h后拔除线栓恢复供血。脑损伤后14 d,各组给予药物治疗,并进行行为学训练与测定。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定大鼠脑梗死情况,免疫印迹法(Western Blotting)与免疫荧光双染测定大鼠神经元再生。结果行为学研究结果显示,与Sham组比较,MCAO组大鼠神经功能评分增加,局部梗死面积且参考记忆与工作记忆错误次数增加(P<0.05)。与MCAO组比较,TGP组大鼠神经功能评分降低,局部梗死面积减少且参考记忆与工作记忆错误次数减少(P<0.05)。与TGP组比较,血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂升高TGP干预MCAO大鼠的神经功能评分,增加局部梗死面积(P<0.05),且参考记忆与工作记忆错误次数(P<0.05)。分子水平结果显示,与Sham组比较,MCAO组大鼠海马组织细胞质膜微囊蛋白-1(Caveolin-1)蛋白、脑源神经元营养因子(BDNF)抗体蛋白和BDNF蛋白表达增加。与MCAO组比较,TGP组大鼠海马组织Caveolin-1蛋白、VEGF蛋白和BDNF蛋白表达进一步升高(P<0.05)。免疫荧光结果显示,与神经元再生相关的5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)+/双皮质素(DCX)+与BrdU+/神经元核抗原抗体(NeuN)+免疫阳性细胞数量表达增加(P<0.05)。与TGP组比较,TGP+PD173074组大鼠海马组织Caveolin-1蛋白(P<0.05)、VEGF蛋白和BDNF蛋白表达减少,且NeuN与DCX表达降低(P<0.05)。结论白芍总苷通过Caveolin-1/VEGF信号通路促进脑缺血再灌注大鼠神经元再生,缓解大鼠神经功能损伤,减少脑部梗死面积,改善学习记忆能力。