Cancer Cell:发现驱动神经内分泌型前列腺癌进展的癌基因与治疗靶点

美国加州大学洛杉矶分校的研究者发现,MYCN在前列腺腺癌转分化为神经内分泌型癌的过程中发挥关键作用,用药物抑制MYCN蛋白表达能明显抑制神经内分泌型前列腺癌的生长,这一发现为去势抵抗型前列腺癌的治疗提供了新的治疗策略,最近该成果发表在《癌细胞》杂志上（LEE JK,PHILLIPS JW,SMITH BA,et al.Cancer Cell,2016,29：536—547）。

前列腺癌内分泌治疗后发生神经内分泌分化的研究进展

绝大部分前列腺癌行内分泌治疗后会逐渐发展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。其中,部分CRPC是因为前列腺癌产生神经内分泌分化(NED)所致,这部分患者最终发展为神经内分泌前列腺癌,此类前列腺癌对内分泌治疗产生耐药,对放化疗效果较差,预后极差。目前对于前列腺癌内分泌治疗后发生NED的确切原因及机制尚未完全明确,针对这一类前列腺癌的治疗仍较困难。未来对前列腺癌内分泌治疗后发生NED进行深入探索,可为延缓内分泌治疗后前列腺癌发生NED进而发展为CRPC提供新思路。

治疗相关神经内分泌前列腺癌机制研究与靶向治疗新进展

前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤,我国前列腺癌新发病例临床分期偏晚,Gleason级别较高,临床上多表现为进展期前列腺癌,已失去手术机会[1]。雄激素剥夺治疗(androgen deprivation therapy,ADT)是进展期前列腺癌的主要治疗手段,可显著抑制前列腺癌的进展,但是几乎所有患者在治疗12~18个月后进展为更具侵袭性的去势抵抗性前列腺癌(castration resistant prostate cancer,CRPC)[2]。

细胞因子对前列腺癌神经内分泌分化的影响

前列腺癌是一种雄激素依赖性癌症,起初通过雄激素剥夺疗法(ADT)可以有效治疗,但在治疗进程中,大多数前列腺癌患者最终会出现药物耐受,逐渐发展为去势抵抗性前列腺癌。其中,神经内分泌型前列腺癌(NEPC)最难处理。随着去势治疗后癌细胞雄激素水平的降低,具有神经内分泌表型的细胞分化增加,以旁分泌的形式促进癌细胞生长。影响该机制的因素有RB1、TP53基因表达缺失,表观遗传因子变化及肿瘤微环境的改变等。在肿瘤微环境内,又以白介素-6、干扰素等细胞因子影响最大,本文作者通过阐述细胞因子在前列腺癌神经内分泌分化中作用机制的最新研究进展,以期寻找延缓NEPC进展的新策略。

MCTP1通过诱导神经内分泌分化和EMT,增加雄激素剥夺的前列腺癌细胞的恶性程度

神经内分泌前列腺癌(PCa)(NEPC),是一种与不良预后相关的侵袭性亚型,可在雄激素剥夺治疗(ADT)后出现。科研人员研究了ADT诱导晚期前列腺癌神经内分泌分化的分子机制。结果发现,跨膜蛋白1(MCTP1)在晚期前列腺癌患者的样本中含量丰富,它具有推定的Ca^(2+)感应功能和多个Ca^(2+)结合的C2结构域。MCTP1与EMT相关转录因子ZBTB46、FOXA2和HIF1A的表达相关。

神经内分泌前列腺癌裸鼠模型肿瘤进展中相关成纤维细胞基因表达变化的测序分析

目的分析动物模型中神经内分泌前列腺癌(NEPC)肿瘤种植后不同时期肿瘤相关成纤维细胞基因表达的变化情况及其潜在意义。方法通过建立NEPC移植裸鼠模型,分别于2周、4周处死后取出裸鼠模型瘤灶,分离培养肿瘤相关性成纤维细胞,利用转录组测序技术(RNA-seq)宏观分析差异表达的基因,运用相关生物信号分析相关差异基因及信号通路,应用定量PCR法对部分差异表达基因进行验证。结果NEPC不同时期相关成纤维细胞出现部分基因表达增强或抑制,主要富集于细胞外环境及肿瘤信号通路,此外肿瘤转录失调通路、肿瘤血管新生、脂蛋白代谢等通路亦有变化。通过qPCR验证部分差异性基因,发现以NKX3-1、ISM1基因为代表的相关通路基因在4周组显著低于2周组,而随着肿瘤进展GREM1基因的表达显著增加(P<0.01)。结论NEPC相关成纤维细胞在不同时象中相关基因的表达存在差异性,其中NKX3-1、ISM1、GREM1基因等可能在肿瘤相关性成纤维细胞促进肿瘤进展病理过程中发挥潜在作用。

去势治疗诱导的神经内分泌前列腺癌的研究进展

转移性前列腺癌行去势治疗(androgen-deprivation therapy,ADT)后将逐渐发展为去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)。神经内分泌前列腺癌(neuroendocrine prostate cancer,NEPC)是CRPC的极差预后亚型,多由前列腺癌细胞发生神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation,NED)引起,放化疗效果较差,平均生存期不到1年,约占因CRPC患者死亡的25%,目前其分子机制研究较有限。进一步研究NEPC发生的分子机制将为NEPC治疗药物的开发与应用提供新的思路。

前列腺原发神经内分泌癌的CT、MR诊断

目的探讨前列腺原发神经内分泌癌CT、MR表现特点。方法回顾性分析经手术病理证实的前列腺神经内分泌癌病例5例,年龄68～78岁。临床症状主要是排尿不畅、尿频、血尿。结果本组前列腺神经内分泌癌瘤灶均呈不规则形,体积较大,无钙化灶,增强后不均匀强化。MRI表现为T1WI等信号,T2WI混杂高信号,DWI稍高信号,ADC值约为(0.8～1.0)×10-3 mm2/s,增强后不均匀强化。5例中2例侵犯膀胱,1例侵犯直肠,骨转移4例,肾上腺转移1例,肺部转移3例,肝转移3例,盆腔、髂窝淋巴结转移3例。免疫组化NSE、Cga、Syn检查有阳性表达。结论前列腺神经内分泌癌CT、MR表现为瘤灶较大,形态不规则,常侵犯邻近组织,常伴有远处转移(特别是骨外转移),PSA水平升高不显著。NSE、Cga、Syn的阳性表达对本病的确诊有决定性意义。

细胞内胆固醇代谢在前列腺癌神经内分泌转化中的变化及意义

目的:建立前列腺癌雄激素非依赖进展过程中的神经内分泌转化(NED)体外细胞模型,分析前列腺癌NE细胞转化时细胞内胆固醇代谢及其调控可能的变化及意义。方法:去雄激素诱导建立前列腺癌LNCaP细胞NE模型,通过细胞形态学观察、蛋白印迹检测多种NE标记物(SgⅢ、NSE、CgA)表达、体外细胞增殖实验检测NE的发生;利用免疫荧光染色检测细胞内胆固醇和SgⅢ的表达及分布;利用半定量RT-PCR检测多种参与胆固醇合成、摄取相关蛋白基因(LDL-R、SREBP-1、SREBP-2)的表达。结果:去除雄激素后体外培养,LNCaP细胞胞体缩小,轴突增长,呈NE样改变;SgⅢ、NSE、CgA等多种NE标记物表达上调,并随着时间延长逐渐增多;同时细胞增殖能力显著降低(P<0.05)。NE转化后的LNCaP细胞内胆固醇分布呈现明显的轴突末端聚集趋势,但表达量并无显著改变,相应的细胞内参与胆固醇合成、摄取相关蛋白基因的表达也无显著性差异(P>0.05)。结论:短期去雄激素体外培养可成功诱导雄激素依赖的前列腺癌LNCaP细胞发生NED,NED后的细胞内胆固醇分布发生显著的轴突末端聚集趋势,以增强细胞内多种神经内分泌颗粒的形成。

microRNA-148a对前列腺癌细胞系LNCaP神经内分泌分化的影响

目的探讨microRNA(miRNA)-148a对前列腺癌细胞系LNCaP神经内分泌分化的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)验证miRNA-148a在雄激素依赖性与雄激素非依赖性前列腺癌细胞系中的差异表达。采用miRNA-148a及其抑制物(anti-miRNA-148a)改变LNCaP细胞中miRNA-148a的表达量,观察LNCaP细胞神经内分泌分化的差异程度,并检测神经内分泌分化标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE)的差异表达。结果 LNCaP-AI细胞中的miRNA-148a相对表达量显著低于LNCaP细胞(P<0.05)。下调miRNA-148a在LNCaP细胞中的表达量,可明显促进LNCaP细胞神经内分泌分化。结论 miRNA-148a可以抑制LNCaP细胞的神经内分泌分化,可能成为前列腺癌生物治疗的新靶点。

神经内分泌分化与前列腺癌进展及预后的关系

目的研究神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation,NED)与前列腺癌(prostate cancer,PCa)发展及预后的关系。方法收集有随访资料的61例PCa穿刺活检标本,采用免疫组化法检测嗜铬素A(chromogranin,CgA)、神经特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、突触素(synaptophysin,Syn)在选定标本中的表达,分析NED与PCa各临床病理参数及患者生存时间的关系,多因素Cox风险模型分析影响PCa患者预后的危险因素。结果 61例PCa患者中有24例伴NED(39.3%),NED表达水平随着Gleason评分增加及穿刺前前列腺特异性抗原(prostatespecific antigen,PSA)水平升高而逐渐升高(P<0.01),Syn分别与NSE及CgA表达水平呈正相关性(P<0.01)。伴NED组PCa患者累积生存率明显低于不伴NED组(P<0.01),多因素Cox回归分析显示Gleason评分、NED是PCa患者生存的独立危险因素(P<0.01)。结论 NED与PCa发展及患者不良预后密切相关,是判断PCa患者预后的独立因素。

前列腺原发小细胞神经内分泌癌10例临床病理分析

目的探讨前列腺原发小细胞神经内分泌癌的临床病理特征、诊断、治疗及预后。方法回顾性分析山西省肿瘤医院诊治的10例前列腺原发小细胞神经内分泌癌的临床资料、病理学特征、免疫表型、治疗及预后,并复习相关文献。结果10例中7例为普通腺癌伴小细胞癌,小细胞癌成分占10%~90%不等,其余3例为纯小细胞癌。镜检:小细胞癌区域细胞排列呈实性片状(5/10)、菊形团样(1/10)、小管状(1/10)及混合型(3/10)。肿瘤细胞体积小且较一致,细胞界限不清,间质血管丰富,部分区域可见坏死。胞质稀少或呈裸核状,核呈圆形、卵圆形或短梭形,深染,核仁不明显,易见核分裂。腺癌成分表现为嗜双色性胞质,细胞核增大,核仁明显,组织结构为筛状、腺体融合及实性片状。部分病例两种成分混杂存在。免疫表型:小细胞癌区域Syn阳性(10/10),CGA阳性(3/10),CD56阳性(10/10),NSE阳性(7/10),Ki-67增殖指数70%~90%,CK(AE1/AE3)点状阳性,PSA及AR均阴性;腺癌区域CK(AE1/AE3)、PSA及AR均阳性,Ki-67增殖指数40%~80%,其余神经内分泌标志物均阴性。结论前列腺原发小细胞神经内分泌癌是一种罕见疾病,病程进展迅速,预后较差,部分为普通腺癌内分泌治疗后转化。

穿心莲内酯对前列腺癌细胞的增殖及神经内分泌分化的抑制作用

目的探讨穿心莲内酯(Andro)对前列腺神经内分泌癌细胞增殖及神经内分泌分化的影响。方法Andro处理前列腺癌细胞(PC3),用MTT法检测48 h时Andro作用的最大效应浓度及对PC3细胞增殖的时间依赖性;进一步提取细胞蛋白,通过Western blotting检测神经内分泌分化标志物(NSE、Cg A)表达情况。结果 Andro作用48 h时7.5μmol/L达到最大效应浓度,且随着时间的延长Andro抑制PC3细胞增殖的作用越显著;Andro能明显抑制PC3细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性。Western blotting检测结果显示,NSE、Cg A是PC3细胞中神经内分泌的标志物,Andro能显著抑制NSE、Cg A的表达。结论Andro可抑制PC3细胞增殖及神经内分泌分化。

前列腺癌神经内分泌分化的研究进展

神经内分泌（neuroendocrine,NE）细胞又称内分泌-旁分泌细胞或amine precursor uptake and decarboxylation（APUD）细胞,正常的前列腺组织中存在着散在的NE细胞,参与构成弥散性神经内分泌调节系统,分泌多种生物活性物质,对前列腺上皮生长、分化及外分泌的调节发挥着重要作用。前列腺癌（PCa）组织内的神经内分泌分化（neuroendocrine differentiation,NED）现象与PCa的进展、雄激素非依赖性转化和不良预后等有重要关系,

前列腺小细胞神经内分泌癌1例并文献复习

目的探讨前列腺小细胞神经内分泌癌的诊断、治疗及预后。方法报告1例前列腺小细胞神经内分泌癌患者,并结合相关文献复习,对前列腺小细胞神经内分癌的诊断、治疗及预后进行分析。结果患者低龄发病,无典型前列腺癌表现,前列腺特异性抗原(PSA)正常,泌尿系CT提示前列腺占位,可疑侵及膀胱及左侧输尿管;前列腺穿刺活检病理结果显示小细胞神经内分泌癌,免疫组化标记白细胞共同抗原(-)、PSA(-)、肌酸激酶(-)、神经黏附分子(+)、神经元特异性烯醇化酶(+)、突触素(+)、增殖细胞核抗原ki-67(+80%);采用顺铂联合依托泊苷方案化疗,已化疗3个周期,效果良好,无不良反应。结论前列腺小细胞神经内分泌癌分化差,较早发生转移,临床症状不典型,易误诊,需行病理检查联合免疫组化确诊;治疗以化疗为主,但效果欠佳,生存期较短,根治性手术及局部放疗可改善生存质量。

老年前列腺小细胞神经内分泌癌的临床特点与预后

目的探讨老年前列腺小细胞神经内分泌癌临床特点及预后。方法回顾性总结5例老年前列腺小细胞神经内分泌癌患者的临床资料,分析免疫组化、前列腺特异抗原(PSA)值、前列腺癌病理(Gleason评分)分级、出现激素非依赖时间等指标的相互关系及与患者生存的关系。结果5例前列腺癌活检标本均有嗜铬素A、神经特异性烯醇化酶、突触素不同程度的表达,符合前列腺小细胞神经内分泌癌诊断;4例患者确诊时有转移;5例中1例1个月死亡,1例6个月死亡,3例3年内死亡。患者5年生存率(0)明显低于同期不伴有神经内分泌分化的前列腺癌患者(67%)。确诊时(未治疗)PSA值(4.10～18.25ng/ml)均高于正常,但并非随疾病进展而升高。患者最初对全雄激素阻断治疗有效,但很快出现激素非依赖情况。小细胞前列腺癌神经内分泌分化表达水平与前列腺癌病理(Gleason评分)分级相关。结论老年前列腺小细胞神经内分泌癌患者预后差,前列腺癌神经内分泌分化相关的免疫组化和Gleason积分等指标有助于早期诊断前列腺小细胞神经内分泌癌及判断预后。

原发性前列腺大细胞神经内分泌癌的临床病理特征和诊治分析

目的总结并探讨原发性前列腺大细胞神经内分泌癌(large cell neuroendocrine carcinoma,LCNEC)的临床病理特征和治疗预后。方法结合我院收治的1例和国外文献报道的14例前列腺LCNEC的资料,回顾性分析其病理、发病机制、临床表现等特征和治疗预后等。结果15例中,12例(80.0%)为混合性(伴腺癌),其中3例为新发;3例(20.0%)为新发单纯性。免疫组化大部分表达神经内分泌指标:CgA阳性12例(80.0%),其中(++)4例(33.3%)、(+)6例(50.0%)、局灶(+)2例(16.7%);CgA(-)3例(20.0%)。Syn阳性11例(73.3%),其中(++)5例(45.4%)、(+)3例(27.3%)、局灶(+)3例(27.3%);Syn(-)4例(26.7%)。CD56/NCAM,除外未做2例,余13例中阳性10例(76.9%),其中(++)7例(53.8%)、(+)3例(23.1%);(-)3例(23.1%)。而PSA,除外未做2例,余13例中(-)8例(61.5%)、(+)2例(15.4%)、局灶(+)3例(23.1%)。采用全身化疗7例;放疗1例;内分泌治疗3例(比卡鲁胺+戈舍瑞林2例,手术去势1例);化疗联合内分泌治疗1例(我院收治的病例);化疗联合内分泌治疗和根治性前列腺切除术1例。我院收治的病例现已存活6个月,另14例中1例随访3个月后失访,2例生存分别超过15和30个月,11例最终均因转移死亡,生存时间从3周到19个月不等。总体预后差,平均生存时间<1年(11.5个月),中位生存时间约8个月。结论原发性前列腺LCNEC临床非常罕见、恶性程度高、预后差,确诊需依靠病理检查,治疗效果不理想,以手术、化疗等为主的综合疗法有利于改善其预后。

乳腺癌高表达基因1对前列腺癌细胞神经内分泌转化的影响

目的观察乳腺癌高表达基因1(BCOX1)在前列腺癌细胞神经内分泌转化中的表达水平和生物功能。方法构建去雄激素诱导的神经内分泌样前列腺癌细胞模型。并检测BCOX1在LNCaP和AI-NEPC细胞中的表达差异。RNA干扰技术下调BCOX1在AI-NEPC细胞中表达后,检测神经内分泌细胞标记物NSE和CHGA的表达,并检测STAT3的表达和磷酸化水平。结果在AI-NEPC中BCOX1蛋白表达水平与LNCaP细胞相比明显增加。BCOX1mRNA水平在AI-NEPC中与LNCaP细胞相比显著增高(P<0.05)。shRNA转染组中NSE和CHGA表达水平与未转染组和空载体转染组比较均明显下降(P<0.05)。shRNA转染组中STAT3和磷酸化STAT3的表达水平较空载体转染组明显下调(P<0.05)。结论 BCOX1在神经内分泌分化的前列腺癌细胞中高表达,下调BCOX1的表达可以影响前列腺癌细胞的神经内分泌样表型,并抑制STAT3的表达和磷酸化。