新疆哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性

目的研究哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(NEDD4L)基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性。方法以哈萨克族自然人群横断面流行病学调查为基础进行病例-对照研究。采用TaqMan PCR技术对rs3865418多态性在哈萨克族自然人群中(共856例,其中男性364例、女性492例;肥胖组478例、对照组378例)进行分型,分析其与哈萨克族人肥胖的相关性。结果共有851例研究对象基因型分型成功,在总体、男性、女性哈萨克族自然人群中,rs3865418多态性的基因型、等位基因在肥胖组及对照组分布差异无统计学意义(P>0.05);男性腰围平均水平有C/C携带者>C/T携带者>T/T携带者的趋势,而女性腰围平均水平有C/C携带者<C/T携带者<T/T携带者的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NEDD4L的rs3865418多态性与新疆哈萨克族中心性肥胖不相关,该变异可能不是哈萨克族人中心性肥胖的易感因素。

上皮细胞钠通道γ亚单位基因和神经前体细胞表达发育调控样基因多态性性与维吾尔族高血压病的相关分析

目的探讨上皮细胞钠通道γ亚单位基因启动子区rs5718多态性及神经前体细胞表达发育调控样基因第一外显子rs4149601多态性同维吾尔族高血压病的关系。方法应用病例对照方法研究新疆吐鲁番地区农村高血压病个体344例及对照组322例。检测所有个体体质指数、空腹血糖、胆固醇、甘油三酯。用Taqman技术进行rs5718及rs4149601多态基因分型。结果rs5718多态及rs4149601多态均符合Hardy-Weinberg平衡。rs5718多态GA基因型、AA基因型和A等位基因的频率在高血压组及对照组中分别为34.6%、5.6%、22.9%及36.6%、4.0%、22.4%;rs4149601多态GA基因型、AA基因型和A等位基因的频率在高血压组及对照组分别为28.9%、1.9%、16.4及30.0%、3.3%、18.3%。rs5718与rs4149601多态基因型及等位基因分布在高血压组与对照组中差异均无显著性;对性别、年龄进行校正后也发现两个位点使高血压病患病风险显著改变。进一步协方差分析发现rs5718与rs4149601多态不同基因型间收缩压、舒张压、体重指数、腰臀比、血糖、甘油三酯、胆固醇水平差异无显著性。结论上皮细胞钠通道γ亚单位基因及神经前体细胞表达发育调控样基因两个重要的多态性(rs5718及rs4149601)同维吾尔族人群高血压病发病无关。

神经前体细胞表达发育调控样基因rs4149601多态性与新疆哈萨克族人群中心性肥胖的关联研究

目的 研究神经前体细胞表达发育调控样基因rs4149601多态性与新疆哈萨克族人群中心性肥胖的相关性.方法 采取以人群为基础的横断面病例-对照研究方法,采用TaqMan聚合酶链反应对新疆哈萨克族856名自然人群（男性364名、女性492名;其中肥胖478例、对照378名）的rs4149601多态性进行分型,分析其与新疆哈萨克族人群肥胖的相关性.结果 共有853名的基因型分型成功,在总体女性新疆哈萨克族自然人群中,rs414960l多态性的基因型、等位基因在肥胖组及对照组分布差异有统计学意义（P＜0.05）.在校正了年龄、吸烟、饮洒和性别等影响因素后,Logistics回归分析显示GG基因型仍与新疆哈萨克族人群中心性肥胖相关（OR=1.479,95%CI：1.103～1.983,P=0.009）;协方差分析结果提示携带GG基因型者的腰围高于AA携带者＋AG携带者（P=0.028）.结论 神经前体细胞表达发育调控样基因的rs4149601多态性与新疆哈萨克族人群中心性肥胖相关,GG基因型可能是哈萨克族人群中心性肥胖的易感因素.

神经前体细胞表达发育调控样基因rs3865418多态性与哈萨克族高血压的相关性

目的:探讨神经前体细胞表达发育调控样基因(NEDD4L)rs3865418多态性与哈族原发性高血压(EH)的相关性。方法:采取以人群为基础的横断面病例-对照研究方法,采用TaqManPCR技术对rs3865418多态性在哈族自然人群中(883例;男性375例,女性508例;EH383例,对照500例)进行分型,分析其与哈族EH的相关性。结果:rs3865418多态性在878例哈族人群中成功分型,其基因型、等位基因的分布符合Hardy-Wein-berg平衡;在总体、男性及女性哈族自然人群中,rs3865418多态性的基因型、等位基因在EH组及血压正常组分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。在校正了年龄、肥胖、吸烟、饮酒等影响因素后,各基因型间收缩压、舒张压比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:rs3865418多态性与哈族EH不相关。

神经前体细胞表达发育调控样基因4在乙型肝炎病毒复制中的作用

目的研究神经前体细胞表达发育调控样基因4(neural precursor cell-expressed developmentally down-regulated gene 4-like,NEDD4L)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响及其可能的分子机制。方法采用Lipofectamine2000分别将靶向NEDD4L的小干扰RNA、NEDD4L的过表达质粒(pcDNA3.1-NEDD4L-HA)、HBV复制质粒(pGEM-HBV1.3)和poly(dAT:dAT)瞬时转染至HepG2细胞,并以可稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测NEDD4L、α干扰素、β干扰素、干扰素刺激基因56(interferon-stimulated gene 56,ISG56)、黏液病毒抗性蛋白A(myxovirus resistance protein A,MxA)、寡腺苷酸合成酶(oligoadenylate synthetase,OAS)等的mRNA水平,以及HBV DNA和3.5 kb HBV RNA的表达水平;采用蛋白质印迹法验证NEDD4L沉默或过表达效果,并检测相关信号分子的蛋白质水平;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中β干扰素产量。统计学方法采用t检验。结果HepG2.2.15细胞中的NEDD4L mRNA和蛋白质水平分别为10.53±0.47和4.17±0.43,分别高于HepG2细胞中的1.00±0.05和1.26±0.25,差异均有统计学意义(t=3.27,P=0.008;t=1.68,P=0.030)。在敲减NEDD4L基因表达的细胞中,上清液HBV DNA表达水平为0.32±0.09,低于对照组的1.00±0.05,差异有统计学意义(t=-0.93,P=0.020);3.5 kb HBV RNA表达水平为0.49±0.11,低于对照组的1.00±0.05,差异有统计学意义(t=-0.68,P=0.040)。与对照组相比,NEDD4L敲减组的β干扰素、ISG56、MxA和OAS的mRNA相对表达水平均上升,差异均有统计学意义(t=4.66、9.38、7.29、7.01,均P<0.01)。NEDD4L敲减组β干扰素含量在poly(dAT:dAT)处理和水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)刺激时分别为(776.41±115.49)ng/L和(961.21±130.19)ng/L,分别高于对照组的(320.15±56.05)ng/L和(440.17±67.82)ng/L,差异均有统计学意义(t=2.43,P=0.020;t=2.85,P=0.030);NEDD4L过表达组β干扰素含量在poly(dAT:dAT)处理和VSV刺激时分别为(156.18±26.47)ng/L和(176.67±34.51)ng/L,分别低于对照组的(320.38±49.39)ng/L和(440.59±68.83)ng/L,差异均有统计学意义(t=-2.03,P=0.040;t=-1.93,P=0.030)。HBV复制下调了β干扰素上游黑色素瘤分化相关蛋白5(melanoma differentiation-associated protein 5,MDA5)的蛋白质水平,而该下调作用在敲减NEDD4L的细胞中并不明显。结论HBV复制能通过促进细胞NEDD4L的表达,下调MDA5而抑制β干扰素的产生,进而辅助HBV的固有免疫逃逸。

神经前体细胞表达发育调控蛋白4与盐敏感性高血压

原发性高血压是一种主要的心血管危险因素,其发病率高,并会导致一系列严重并发症。该病病因复杂,众多遗传和环境因素共同参与发病。与摄盐有关的高血压被称作盐敏感高血压,无关的则称为盐抵抗高血压,二者在基因水平上具有差异。神经前体细胞表达发育调控蛋白4(NEDD4L)可使上皮细胞钠通道被降解,从而参与血压调节。除去上皮细胞钠通道之外,NEDD4L还与其他肾脏钠通道的调节有关。因而可推知,NEDD4L与盐敏感性高血压密切相关,现对近年来这方面的研究证据进行综述。

神经前体细胞表达发育下调蛋白9通过Rac1/Cdc42通路促进鼻咽癌细胞增殖和转移的机制研究

目的探究神经前体细胞表达发育下调蛋白9(neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 9,NEDD9)通过Rac1/Cdc42通路促进鼻咽癌细胞增殖和转移的机制。方法通过qPCR和Western blot检测人鼻咽上皮细胞NP69以及人鼻咽癌细胞系中NEDD9的表达水平。将CNE-1细胞分为NC组、NEDD9组和si-NEDD9组,分别转染空载质粒、NEDD9过表达和NEDD9沉默质粒。通过CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组的细胞生长、迁移和侵袭能力。结果与NP69比较,人鼻咽癌细胞系中NEDD9 mRNA和蛋白的水平均显著上调(P<0.05),其中CNE-1细胞中NEDD9 mRNA和蛋白水平最高。与NC组比较,NEDD9组NEDD9 mRNA和蛋白的水平显著升高(P<0.05),si-NEDD9组NEDD9 mRNA和蛋白的水平显著降低(P<0.05)。NEDD9组细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及Rac1/Cdc42通路水平显著高于NC组(P<0.05),si-NEDD9组的增殖、迁移和侵袭能力以及Rac1/Cdc42通路水平显著低于NC组(P<0.05)。结论 NEDD9在鼻咽癌细胞中过表达,并且NEDD9可能通过促Rac1/Cdc42通路诱导NPC细胞增殖和转移。

神经前体细胞表达发育性下调蛋白4在消化系统肿瘤发生中的作用

神经前体细胞表达发育性下调蛋白4(neural precursor cell expressed,developmentally down-regulated protein 4,NEDD4-1,部分文章也称NEDD4)是近年来才备受关注的肿瘤相关基因,属于E3 HECT(homologous to E6 associated protein C terminus,E6蛋白c端同源基因)泛素连接酶NEDD4样家族成员。泛素连接酶,能够参与多种蛋白质的泛素化、溶酶体及蛋白酶体的降解、胞核-胞质转位等,间接影响不同恶性肿瘤的多种信号通路。随着大量NEDD4-1与肿瘤相关实验的不断深入,目前已发现其可通过调控细胞周期、癌细胞侵袭转移、拮抗耐药性等许多途径影响肿瘤的生物学行为。在消化系统肿瘤中,NEDD4-1主要通过PTEN/PI3K/AKT、TGF-β、Hippo、LDLRAD4等多条通路促进肝细胞癌的增殖、侵袭和迁移能力;在胰腺癌中发现,NEDD4-1在PI3K/AKT信号通路中发挥癌基因作用,但在与Myc-SIRT2所形成的信号环路中,却发挥抑癌基因的作用;在胃癌和结直肠癌中,NEDD4-1所参与的信号通路与其他消化系统肿瘤均不相同,NEDD4-1能独立于PTEN/PI3K/AKT通路而发挥促进胃癌恶化、转移(EGFR信号通路)和抑制结直肠癌肿瘤生长(WNT信号通路)的作用。NEDD4-1已经成为人们治愈肿瘤的热门研究方向。本文通过系统总结NEDD4-1在不同消化系统肿瘤中的功能、信号通路和潜在抑制剂等,进行探讨NEDD4-1与不同信号通路的关系,旨为临床在癌症治疗领域提供重要的参考数据。

前体mRNA剪辑蛋白Tra2基因在神经组织中的表达特征发育调控策略研究

目的分析前体mRNA剪辑蛋白Tra2基因在神经组织中的表达特征发育调控策略。方法使用自制Tra2α1抗血清以及Tra2β蛋白的RA301血清,对不同时期的人类胚胎组织中Tra2蛋白加以检测。分析相关结果。结果从11-16周,Tra2β1蛋白在心脏和肺脏内表达量上升。在11周,Tra2α1在脊髓,延髓和小脑内有表达趋势,肾脏和心脏亦有表达,其余组织无表达。16周,在11周,Tra2α1在神经组织内依然为高水平表达。心脏少量表达,其余组织无表达。结论 Tra2蛋白可经过多方式对某些特异性基因前体mRNA剪辑,对生长发育起到调控作用,心脏以及神经组织的发育依赖于Tra2α1蛋白的调节功能,在11周内,Tra2α1蛋白的剪辑调节功能对于肾脏的发育也存在一定作用。

中枢神经系统少突胶质细胞前体细胞产生的研究进展

少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)在脊椎动物中枢神经系统(central nervous system,CNS)中负责形成包裹神经元轴突的髓鞘,保证神经冲动沿轴突的快速传导,并为其提供营养支持。OLs发育异常及损伤会导致严重的神经系统疾病,比如脑白质营养不良(leukodystrophy)、多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等。少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)在胚胎期由神经前体细胞(neural progenitor cells,NPCs)产生,该过程受到一系列细胞内外因素的调控,对这一问题的研究也是神经系统研究的重要内容。现主要基于遗传学结果,简述关于OPCs产生的调控机制的最新研究进展。

RA—BMPs信号通道对肠神经系统发育调控的研究进展

肠道神经系统是起源于神经嵴的神经元前体细胞迁移至肠道并演化形成，而起源于神经嵴的前体细胞是多潜能干细胞，它们在肠道内所接触的微环境决定了肠道神经系统的独特性。神经营养因子如胶质细胞源性神经生长因子（glial derived neurotrophic factor，GDNF）、营养以及细胞外基质成分在肠道神经元前体细胞迁移增殖分化中起重要作用。

白藜芦醇对人白细胞介素-1受体相关激酶-M基因表达的抑制作用及其机制

目的探讨白藜芦醇对人白细胞介素-1受体相关激酶-M(IRAK-M)基因表达的抑制作用及其分子机制。方法用不同浓度的白藜芦醇分别作用于转染神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(Nedd4L)-HA或IRAK-M-Flag质粒的Hela细胞和人单核细胞株THP1细胞,处理20 h后采用Western印迹法检测其Nedd4L和IRAK-M的表达。在A549和Hela细胞中分别共转染IRAK-M-Flag和不同浓度的Nedd4L-HA表达质粒,36 h后采用Western印迹法检测IRAK-M和Nedd4L的表达。用IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA表达质粒分别单独转染、共同转染至Hela细胞,36 h后用细胞裂解液处理细胞,采用免疫共沉淀法检测IRAK-M与Nedd4L的相互作用。在A549细胞中分别共转染IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA表达质粒,36 h后采用免疫荧光法检测IRAK-M和Nedd4L的共定位情况。结果 Hela细胞中分别转染2μg外源Nedd4L-HA或IRAK-M-Flag质粒24 h后,0、10、20μmol/L白藜芦醇处理20 h,Western印迹法检测结果显示,10、20μmol/L白藜芦醇处理组的Nedd4L-HA蛋白质相对表达量均显著高于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.01),而10、20μmol/L白藜芦醇处理组IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.05),且20μmol/L白藜芦醇处理组显著低于10μmol/L白藜芦醇处理组(P<0.01)。0、10、20μmol/L白藜芦醇处理THP1细胞20 h,Western印迹法检测结果显示,10、20μmol/L白藜芦醇处理组的Nedd4L蛋白质相对表达量均显著高于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.01),而IRAK-M蛋白质相对表达量均显著低于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.05)。在A549和Hela细胞中分别转染1μg的IRAK-M-Flag和不同质量(0、0.5、1μg)的Nedd4L-HA表达质粒,Western印迹法结果显示,在A549细胞中,0.5、1μg Nedd4L-HA转染组的IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μg Nedd4L-HA转染组(P值均<0.01);在Hela细胞中,0.5、1μg Nedd4L-HA转染组的IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μg Nedd4L-HA转染组(P值均<0.01)。用IRAK-M-Flag、Nedd4L-HA表达质粒分别单独转染、共同转染至Hela细胞中,免疫共沉淀检测结果显示,在共表达IRAK-M和Nedd4L的细胞裂解物中,用抗Flag的抗体能将Nedd4L-HA沉淀下来,用抗HA的抗体同样能将IRAK-M-Flag沉淀下来。将表达质粒IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA共同转染至A549细胞中,36 h后免疫荧光检测结果显示,在共转染的细胞中,可观察到绿色荧光和红色荧光以重叠形式分布于细胞膜和细胞质中。结论白藜芦醇可抑制IRAK-M蛋白的表达,其作用机制可能与Nedd4L蛋白的表达上调有关。

皮肤黑色素瘤组织中Nedd4L与Cbl-b蛋白的表达及对患者预后的评估价值

目的探讨皮肤黑色素瘤(CMM)组织中神经前体细胞表达发育调控样蛋白(Nedd4L)和环指型泛素连接酶(Cbl-b)蛋白的表达及对患者预后的评估价值。方法选取40例CMM患者和50例良性痣患者分别作为CMM组和对照组,收集CMM组患者的年龄、性别及临床特征(发生部位、是否发生转移、临床分期及肿瘤是否有溃疡等)信息;取2组患者手术切除组织存档蜡块制作切片,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)法检测2组患者Nedd4L和Cbl-b的表达;随访CMM组患者的3年生存情况,应用Cox单因素分析模型分析评估影响预后的独立因素,采用受试者工作特征(ROC)分析Nedd4L、Cbl-b单一和联合检测对CMM组患者预后的预测价值。结果Nedd4L和Cbl-b蛋白在CMM组中表达水平高于对照组(P<0.05),患者年龄、肿瘤发生转移、肿瘤溃疡、临床分期、肿瘤厚度、Nedd4L及Cbl-b阳性表达是影响CMM预后的关键因素(P<0.05);联合检测Nedd4L和Cbl-b蛋白对CMM患者预后的预测能力高于单个指标检测(P<0.05)。结论CMM患者病变组织中Nedd4L和Cbl-b蛋白呈高表达,2项指标联合检测可提高预后评价的准确性及灵敏性。

骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的体外研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞( marrow stromal stem cells,MSCs)向神经细胞定向分化中神经蛋白分子的表达情况。 方法 取第5～7代体外培养Wistar大鼠MSCs,以0 .5μmol/ L全反式视黄酸( all- trans retinoidacid,ATRA)预诱导2 4 h后,换用改良神经细胞培养基( modified neuronal medium,MNM)继续培养。在ATRA作用2 4 h及MNM作用2、6、9、18及36 h,免疫组织化学检测巢蛋白( Nestin)、神经元特异性核心抗原( neuron- specificnuclear protein,Neu N)、微管相关蛋白2 ( microtubule- associated protein 2 ,MAP- 2 )和胶质纤维酸性蛋白的表达情况。 结果 ATRA和MNM作用后,MSCs呈典型神经元样,伸出较多的突起和分支,形成网络。Nestin最先表达,ATRA作用2 4 h出现,Neu N其次,MNM作用2 h检测到,MAP- 2最晚,MNM作用9h检测到。Nestin在MNM作用18h后表达最强,其阳性率为92 .3%±3.4 % ;36 h后表达明显减弱,阳性率仅为12 .3%±3.4 % ,而其它标志蛋白则持续表达。 结论 ATRA和MNM能促进MSCs向神经前体细胞和神经元转化,神经蛋白分子的表达顺序与神经细胞发育过程一致。

新疆哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控蛋白4基因遗传变异的分布及其与代谢综合征的关系

目的 探讨神经前体细胞表达发育调控蛋白4（NEDD4）基因多态与哈萨克族人代谢综合征（MS）的关系。方法 采取以流行病学调查为基础的病例对照研究，选择923例哈萨克族人（741例对照和182例MS）为研究对象。测序筛查NEDD4基因变异，用Taqman-PCR行代表性变异的基因型鉴定。结果测序发现27个变异，包括6个错义突变。5个常见变异在MS病例和对照组间频率分布差异无统计学意义（P＞0.05），但rs11550869变异与≥40岁哈萨克族人的MS相关（基因型和显性模型中均P=0.024），控制年龄和性别后，0R值1.604 （95％CI 1.061～2.424,P=0.025）、1.681 （95％CI 1.073～2.633，P=0.023）；rs11550869变异不同基因型间MS组分数量性状比较差异无统计学意义（P＞0.05），但3种基因型间（GG＜GC＜CC）腹围、体质量指数、空腹血糖、餐后2h血糖、胰岛素抵抗指数均有逐渐增高趋势；且常见单倍型H5（A-A-T-A-C，包含rs11550869位点C等位基因）频率在病例组较对照组高（P=0.059）。结论 NEDD4基因rs11550869变异位点与新疆哈萨克族40岁以上人群MS可能相关，该结果需进一步验证。

神经前体细胞表达发育下调的蛋白8激活酶抑制剂MLN4924靶向治疗乳腺癌

目的探讨MLN4924抑制乳腺癌细胞增殖的作用及其机制。方法以人乳腺癌细胞MCF-7为模型细胞,采用细胞毒性和细胞的克隆形成实验探讨MLN4924对MCF-7细胞增殖的抑制作用。细胞实验分组:对照组,MLN4924浓度分别为0.1、0.3和1.0μmol/L的实验组。动物实验分组:对照组,给MLN4924药物2.5、5.0及10.0 mg/kg的实验组。通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光考察MLN4924对neddylation修饰的抑制作用、细胞凋亡和DNA损伤。采用GraphPad Prism 8进行统计学分析,通过t检验评价两组数据之间的差异。结果MLN4924显著抑制MCF-7细胞的增殖能力,实验组的细胞集落数量显著少于对照组,可有效抑制cullin-1蛋白的neddylation修饰,实验组NEDD8的表达显著低于对照组(相对灰度值0.42±0.16比1.13±0.22,t=8.03,P<0.01),差异有统计学意义,诱导细胞DNA损伤,实验组γ-H2AX的表达显著高于对照组(相对灰度值0.16±0.03比0.04±0.01,t=9.15,P<0.01),差异有统计学意义,显著上调cleaved Caspase-3的表达,诱导肿瘤细胞凋亡,在体内可有效抑制MCF-7裸鼠移植瘤的增殖,并表现出较低的不良反应。结论靶向neddylation能显著抑制乳腺癌细胞的增殖。

人脑胶质瘤组织中神经前体细胞表达发育下调蛋白8的表达及其意义

目的探讨神经前体细胞表达发育下调蛋白8(NEDD8)在胶质瘤组织中的表达情况及其与临床病理参数间的关系。方法选取2012年3月至2015年3月于该院神经外科手术治疗的89例胶质瘤患者的胶质瘤组织及瘤周组织,通过免疫组织化学法、Western blot检测不同级别胶质瘤患者肿瘤组织和瘤周组织中NEDD8的表达与分布,分析NEDD8水平与临床病理参数之间的关系。结果胶质瘤组织中NEDD8的表达明显高于瘤周组织(t=-9.801,P=0.001),WHO高级别胶质瘤组织中NEDD8的表达明显高于WHO低级别胶质瘤组织(t=-6.684,P=0.003)。NEDD8的表达与肿瘤直径、WHO分级有关(χ^2=5.381、10.186,P<0.05)。结论NEDD8在人脑胶质瘤组织中呈高表达,且与肿瘤WHO病理分级相关。

敲减NEDD1表达抑制肺腺癌细胞增殖与迁移

目的:探讨神经前体细胞表达发育下调蛋白1(NEDD1)在肺癌发生和发展中的作用。方法:采用免疫组化实验检测NEDD1在肺癌组织中的表达情况,结合数据库资料分析NEDD1在肺癌组织与癌旁正常组织中的表达有无差异,并分析NEDD1的表达水平与肺癌预后的相关性;敲减NEDD1在A549细胞的表达后用平板集落形成实验检测集落形成能力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布的情况,Transwell小室实验检测对细胞的迁移能力的影响,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达,并分析NEDD1与周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)表达的相关性。结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中NEDD1表达水平升高,Kaplan-Meier曲线预后分析显示NEDD1高表达者预后差,NEDD1低表达者预后较好;光镜下观察可见敲减NEDD1表达的A549细胞增殖速度明显减慢,平板集落形成能力降低(P<0.05);与对照组相比,敲减NEDD1表达促进A549细胞凋亡,抑制细胞的迁移;与对照组相比,敲减NEDD1表达后G 1期细胞的比例增加,细胞阻滞于G 1/S期,Western blot检测周期相关蛋白水平可见p-Rb和cyclinD1蛋白表达水平降低,p-Chk1、p-Chk2和p-p53蛋白表达水平升高(P<0.05);数据库分析结果示NEDD1与CDK2的表达呈正相关。结论:NEDD1具有抑制肺癌细胞凋亡、加速细胞周期进程从而促进细胞增殖的能力,且其在肺腺癌组织中的高表达与患者预后不良相关,因此可以作为肺腺癌诊断和预后新的标志分子。

NEDD9在原发性肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的:探讨神经前体细胞发育下调表达蛋白9(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated 9,NEDD9)在肝脏良恶性组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学检测NEDD9在肝脏良恶性组织中的表达,并用单因素分析法研究其与临床病理因素的关系。NEDD9表达水平与肝癌患者TNM分期两因素相关性用Spearman等级相关分析。并对肝癌患者进行5年生存随访,采用Kaplan-Meier生存曲线分析。结果:肝癌组织中NEDD9表达水平比正常肝组织高(P<0.05);NEDD9在肝癌中的表达与年龄、性别、甲胎蛋白水平、乙肝表面抗原无关(P>0.05),而与TNM分期、肿瘤大小、是否有脉管侵犯、有无肿瘤包膜有关(P<0.05)。NEDD9表达水平与肝癌TNM分级间呈正相关,即肝癌TNM分级越晚期所对应的NEDD9表达水平越高越强(rs=0.304,P<0.05)。NEDD9强阳性表达患者的5年生存率明显低于NEDD9阴性及弱阳性表达患者(χ2=7.848,P=0.005)。结论:神经前体细胞发育下调表达蛋白高表达可能在肝癌进展中发挥重要作用,预示预后不良,为临床治疗及预后提供新的靶点。

神经前体细胞表达发育下调蛋白-8在肝脏疾病中的研究进展

神经前体细胞表达发育下调蛋白-8(NEDD8)是类泛素家族的重要成员之一,通过与底物共价结合(又称neddylation修饰),在维持细胞稳态及调节细胞周期、信号转导、转录翻译、DNA修复、肿瘤生成等方面发挥重要的作用。近年研究发现NEDD8及相关酶的功能紊乱在肝脏疾病中普遍存在,广泛参与肝炎、肝纤维化以及肝癌细胞的增殖、侵袭、凋亡与自噬等生物学过程。现重点就NEDD8在肝脏疾病中的研究进展进行综述。