新疆哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性

目的研究哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(NEDD4L)基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性。方法以哈萨克族自然人群横断面流行病学调查为基础进行病例-对照研究。采用TaqMan PCR技术对rs3865418多态性在哈萨克族自然人群中(共856例,其中男性364例、女性492例;肥胖组478例、对照组378例)进行分型,分析其与哈萨克族人肥胖的相关性。结果共有851例研究对象基因型分型成功,在总体、男性、女性哈萨克族自然人群中,rs3865418多态性的基因型、等位基因在肥胖组及对照组分布差异无统计学意义(P>0.05);男性腰围平均水平有C/C携带者>C/T携带者>T/T携带者的趋势,而女性腰围平均水平有C/C携带者<C/T携带者<T/T携带者的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NEDD4L的rs3865418多态性与新疆哈萨克族中心性肥胖不相关,该变异可能不是哈萨克族人中心性肥胖的易感因素。

神经前体细胞表达发育调控蛋白4与盐敏感性高血压

原发性高血压是一种主要的心血管危险因素,其发病率高,并会导致一系列严重并发症。该病病因复杂,众多遗传和环境因素共同参与发病。与摄盐有关的高血压被称作盐敏感高血压,无关的则称为盐抵抗高血压,二者在基因水平上具有差异。神经前体细胞表达发育调控蛋白4(NEDD4L)可使上皮细胞钠通道被降解,从而参与血压调节。除去上皮细胞钠通道之外,NEDD4L还与其他肾脏钠通道的调节有关。因而可推知,NEDD4L与盐敏感性高血压密切相关,现对近年来这方面的研究证据进行综述。

上皮细胞钠通道γ亚单位基因和神经前体细胞表达发育调控样基因多态性性与维吾尔族高血压病的相关分析

目的探讨上皮细胞钠通道γ亚单位基因启动子区rs5718多态性及神经前体细胞表达发育调控样基因第一外显子rs4149601多态性同维吾尔族高血压病的关系。方法应用病例对照方法研究新疆吐鲁番地区农村高血压病个体344例及对照组322例。检测所有个体体质指数、空腹血糖、胆固醇、甘油三酯。用Taqman技术进行rs5718及rs4149601多态基因分型。结果rs5718多态及rs4149601多态均符合Hardy-Weinberg平衡。rs5718多态GA基因型、AA基因型和A等位基因的频率在高血压组及对照组中分别为34.6%、5.6%、22.9%及36.6%、4.0%、22.4%;rs4149601多态GA基因型、AA基因型和A等位基因的频率在高血压组及对照组分别为28.9%、1.9%、16.4及30.0%、3.3%、18.3%。rs5718与rs4149601多态基因型及等位基因分布在高血压组与对照组中差异均无显著性;对性别、年龄进行校正后也发现两个位点使高血压病患病风险显著改变。进一步协方差分析发现rs5718与rs4149601多态不同基因型间收缩压、舒张压、体重指数、腰臀比、血糖、甘油三酯、胆固醇水平差异无显著性。结论上皮细胞钠通道γ亚单位基因及神经前体细胞表达发育调控样基因两个重要的多态性(rs5718及rs4149601)同维吾尔族人群高血压病发病无关。

神经前体细胞表达发育性下调蛋白4在消化系统肿瘤发生中的作用

神经前体细胞表达发育性下调蛋白4(neural precursor cell expressed,developmentally down-regulated protein 4,NEDD4-1,部分文章也称NEDD4)是近年来才备受关注的肿瘤相关基因,属于E3 HECT(homologous to E6 associated protein C terminus,E6蛋白c端同源基因)泛素连接酶NEDD4样家族成员。泛素连接酶,能够参与多种蛋白质的泛素化、溶酶体及蛋白酶体的降解、胞核-胞质转位等,间接影响不同恶性肿瘤的多种信号通路。随着大量NEDD4-1与肿瘤相关实验的不断深入,目前已发现其可通过调控细胞周期、癌细胞侵袭转移、拮抗耐药性等许多途径影响肿瘤的生物学行为。在消化系统肿瘤中,NEDD4-1主要通过PTEN/PI3K/AKT、TGF-β、Hippo、LDLRAD4等多条通路促进肝细胞癌的增殖、侵袭和迁移能力;在胰腺癌中发现,NEDD4-1在PI3K/AKT信号通路中发挥癌基因作用,但在与Myc-SIRT2所形成的信号环路中,却发挥抑癌基因的作用;在胃癌和结直肠癌中,NEDD4-1所参与的信号通路与其他消化系统肿瘤均不相同,NEDD4-1能独立于PTEN/PI3K/AKT通路而发挥促进胃癌恶化、转移(EGFR信号通路)和抑制结直肠癌肿瘤生长(WNT信号通路)的作用。NEDD4-1已经成为人们治愈肿瘤的热门研究方向。本文通过系统总结NEDD4-1在不同消化系统肿瘤中的功能、信号通路和潜在抑制剂等,进行探讨NEDD4-1与不同信号通路的关系,旨为临床在癌症治疗领域提供重要的参考数据。

皮肤黑色素瘤组织中Nedd4L与Cbl-b蛋白的表达及对患者预后的评估价值

目的探讨皮肤黑色素瘤(CMM)组织中神经前体细胞表达发育调控样蛋白(Nedd4L)和环指型泛素连接酶(Cbl-b)蛋白的表达及对患者预后的评估价值。方法选取40例CMM患者和50例良性痣患者分别作为CMM组和对照组,收集CMM组患者的年龄、性别及临床特征(发生部位、是否发生转移、临床分期及肿瘤是否有溃疡等)信息;取2组患者手术切除组织存档蜡块制作切片,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)法检测2组患者Nedd4L和Cbl-b的表达;随访CMM组患者的3年生存情况,应用Cox单因素分析模型分析评估影响预后的独立因素,采用受试者工作特征(ROC)分析Nedd4L、Cbl-b单一和联合检测对CMM组患者预后的预测价值。结果Nedd4L和Cbl-b蛋白在CMM组中表达水平高于对照组(P<0.05),患者年龄、肿瘤发生转移、肿瘤溃疡、临床分期、肿瘤厚度、Nedd4L及Cbl-b阳性表达是影响CMM预后的关键因素(P<0.05);联合检测Nedd4L和Cbl-b蛋白对CMM患者预后的预测能力高于单个指标检测(P<0.05)。结论CMM患者病变组织中Nedd4L和Cbl-b蛋白呈高表达,2项指标联合检测可提高预后评价的准确性及灵敏性。

神经前体细胞表达发育调控样基因rs4149601多态性与新疆哈萨克族人群中心性肥胖的关联研究

目的 研究神经前体细胞表达发育调控样基因rs4149601多态性与新疆哈萨克族人群中心性肥胖的相关性.方法 采取以人群为基础的横断面病例-对照研究方法,采用TaqMan聚合酶链反应对新疆哈萨克族856名自然人群（男性364名、女性492名;其中肥胖478例、对照378名）的rs4149601多态性进行分型,分析其与新疆哈萨克族人群肥胖的相关性.结果 共有853名的基因型分型成功,在总体女性新疆哈萨克族自然人群中,rs414960l多态性的基因型、等位基因在肥胖组及对照组分布差异有统计学意义（P＜0.05）.在校正了年龄、吸烟、饮洒和性别等影响因素后,Logistics回归分析显示GG基因型仍与新疆哈萨克族人群中心性肥胖相关（OR=1.479,95%CI：1.103～1.983,P=0.009）;协方差分析结果提示携带GG基因型者的腰围高于AA携带者＋AG携带者（P=0.028）.结论 神经前体细胞表达发育调控样基因的rs4149601多态性与新疆哈萨克族人群中心性肥胖相关,GG基因型可能是哈萨克族人群中心性肥胖的易感因素.

神经前体细胞表达发育调控样基因rs3865418多态性与哈萨克族高血压的相关性

目的:探讨神经前体细胞表达发育调控样基因(NEDD4L)rs3865418多态性与哈族原发性高血压(EH)的相关性。方法:采取以人群为基础的横断面病例-对照研究方法,采用TaqManPCR技术对rs3865418多态性在哈族自然人群中(883例;男性375例,女性508例;EH383例,对照500例)进行分型,分析其与哈族EH的相关性。结果:rs3865418多态性在878例哈族人群中成功分型,其基因型、等位基因的分布符合Hardy-Wein-berg平衡;在总体、男性及女性哈族自然人群中,rs3865418多态性的基因型、等位基因在EH组及血压正常组分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。在校正了年龄、肥胖、吸烟、饮酒等影响因素后,各基因型间收缩压、舒张压比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:rs3865418多态性与哈族EH不相关。

神经前体细胞表达发育调控样基因4在乙型肝炎病毒复制中的作用

目的研究神经前体细胞表达发育调控样基因4(neural precursor cell-expressed developmentally down-regulated gene 4-like,NEDD4L)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响及其可能的分子机制。方法采用Lipofectamine2000分别将靶向NEDD4L的小干扰RNA、NEDD4L的过表达质粒(pcDNA3.1-NEDD4L-HA)、HBV复制质粒(pGEM-HBV1.3)和poly(dAT:dAT)瞬时转染至HepG2细胞,并以可稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测NEDD4L、α干扰素、β干扰素、干扰素刺激基因56(interferon-stimulated gene 56,ISG56)、黏液病毒抗性蛋白A(myxovirus resistance protein A,MxA)、寡腺苷酸合成酶(oligoadenylate synthetase,OAS)等的mRNA水平,以及HBV DNA和3.5 kb HBV RNA的表达水平;采用蛋白质印迹法验证NEDD4L沉默或过表达效果,并检测相关信号分子的蛋白质水平;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中β干扰素产量。统计学方法采用t检验。结果HepG2.2.15细胞中的NEDD4L mRNA和蛋白质水平分别为10.53±0.47和4.17±0.43,分别高于HepG2细胞中的1.00±0.05和1.26±0.25,差异均有统计学意义(t=3.27,P=0.008;t=1.68,P=0.030)。在敲减NEDD4L基因表达的细胞中,上清液HBV DNA表达水平为0.32±0.09,低于对照组的1.00±0.05,差异有统计学意义(t=-0.93,P=0.020);3.5 kb HBV RNA表达水平为0.49±0.11,低于对照组的1.00±0.05,差异有统计学意义(t=-0.68,P=0.040)。与对照组相比,NEDD4L敲减组的β干扰素、ISG56、MxA和OAS的mRNA相对表达水平均上升,差异均有统计学意义(t=4.66、9.38、7.29、7.01,均P<0.01)。NEDD4L敲减组β干扰素含量在poly(dAT:dAT)处理和水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)刺激时分别为(776.41±115.49)ng/L和(961.21±130.19)ng/L,分别高于对照组的(320.15±56.05)ng/L和(440.17±67.82)ng/L,差异均有统计学意义(t=2.43,P=0.020;t=2.85,P=0.030);NEDD4L过表达组β干扰素含量在poly(dAT:dAT)处理和VSV刺激时分别为(156.18±26.47)ng/L和(176.67±34.51)ng/L,分别低于对照组的(320.38±49.39)ng/L和(440.59±68.83)ng/L,差异均有统计学意义(t=-2.03,P=0.040;t=-1.93,P=0.030)。HBV复制下调了β干扰素上游黑色素瘤分化相关蛋白5(melanoma differentiation-associated protein 5,MDA5)的蛋白质水平,而该下调作用在敲减NEDD4L的细胞中并不明显。结论HBV复制能通过促进细胞NEDD4L的表达,下调MDA5而抑制β干扰素的产生,进而辅助HBV的固有免疫逃逸。

老年垂体瘤患者垂体组织NEDD4-1 mRNA PTEN蛋白的表达及其相关性

目的 探讨老年垂体瘤患者垂体组织中神经前体细胞表达发育进行性下调基因4-1 mRNA、第10号染色体丢失的磷酸酶张力蛋白同源物基因蛋白的表达及其相关性.方法 将手术切除的42例垂体瘤新鲜标本中,22例侵袭性垂体瘤组织设为A组,20例非侵袭性垂体瘤组织设为B组,另将23例正常垂体组织设为对照组,比较3组神经前体细胞表达发育进行性下调基因4-1 mRNA、磷酸酶张力蛋白同源物基因蛋白的水平及阳性率,并进行相关性分析.结果 调基因4-1 mRNA、磷酸酶张力蛋白同源物基因蛋白的水平及阳性率,并进行相关性分析.结果A组神经前体细胞表达发育进行性下调基因4-1 mRNA水平及阳性率显著高于B组、对照组(P<0.05),磷酸酶张力蛋白同源物基因蛋白水平及阳性率显著低于B组、对照组(P<0.05).相关分析显示,神经前体细胞表达发育进行性下调基因4-1 mRNA水平与磷酸酶张力蛋白同源物基因蛋白水平呈显著负相关(P<0.05).结论 神经前体细胞表达发育进行性下调基因4-1mRNA、磷酸酶张力蛋白同源物基因蛋白在老年垂体瘤患者组织中均有表达,且二者呈负相关.

新疆哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控蛋白4基因遗传变异的分布及其与代谢综合征的关系

目的 探讨神经前体细胞表达发育调控蛋白4（NEDD4）基因多态与哈萨克族人代谢综合征（MS）的关系。方法 采取以流行病学调查为基础的病例对照研究，选择923例哈萨克族人（741例对照和182例MS）为研究对象。测序筛查NEDD4基因变异，用Taqman-PCR行代表性变异的基因型鉴定。结果测序发现27个变异，包括6个错义突变。5个常见变异在MS病例和对照组间频率分布差异无统计学意义（P＞0.05），但rs11550869变异与≥40岁哈萨克族人的MS相关（基因型和显性模型中均P=0.024），控制年龄和性别后，0R值1.604 （95％CI 1.061～2.424,P=0.025）、1.681 （95％CI 1.073～2.633，P=0.023）；rs11550869变异不同基因型间MS组分数量性状比较差异无统计学意义（P＞0.05），但3种基因型间（GG＜GC＜CC）腹围、体质量指数、空腹血糖、餐后2h血糖、胰岛素抵抗指数均有逐渐增高趋势；且常见单倍型H5（A-A-T-A-C，包含rs11550869位点C等位基因）频率在病例组较对照组高（P=0.059）。结论 NEDD4基因rs11550869变异位点与新疆哈萨克族40岁以上人群MS可能相关，该结果需进一步验证。

白藜芦醇对人白细胞介素-1受体相关激酶-M基因表达的抑制作用及其机制

目的探讨白藜芦醇对人白细胞介素-1受体相关激酶-M(IRAK-M)基因表达的抑制作用及其分子机制。方法用不同浓度的白藜芦醇分别作用于转染神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(Nedd4L)-HA或IRAK-M-Flag质粒的Hela细胞和人单核细胞株THP1细胞,处理20 h后采用Western印迹法检测其Nedd4L和IRAK-M的表达。在A549和Hela细胞中分别共转染IRAK-M-Flag和不同浓度的Nedd4L-HA表达质粒,36 h后采用Western印迹法检测IRAK-M和Nedd4L的表达。用IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA表达质粒分别单独转染、共同转染至Hela细胞,36 h后用细胞裂解液处理细胞,采用免疫共沉淀法检测IRAK-M与Nedd4L的相互作用。在A549细胞中分别共转染IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA表达质粒,36 h后采用免疫荧光法检测IRAK-M和Nedd4L的共定位情况。结果 Hela细胞中分别转染2μg外源Nedd4L-HA或IRAK-M-Flag质粒24 h后,0、10、20μmol/L白藜芦醇处理20 h,Western印迹法检测结果显示,10、20μmol/L白藜芦醇处理组的Nedd4L-HA蛋白质相对表达量均显著高于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.01),而10、20μmol/L白藜芦醇处理组IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.05),且20μmol/L白藜芦醇处理组显著低于10μmol/L白藜芦醇处理组(P<0.01)。0、10、20μmol/L白藜芦醇处理THP1细胞20 h,Western印迹法检测结果显示,10、20μmol/L白藜芦醇处理组的Nedd4L蛋白质相对表达量均显著高于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.01),而IRAK-M蛋白质相对表达量均显著低于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.05)。在A549和Hela细胞中分别转染1μg的IRAK-M-Flag和不同质量(0、0.5、1μg)的Nedd4L-HA表达质粒,Western印迹法结果显示,在A549细胞中,0.5、1μg Nedd4L-HA转染组的IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μg Nedd4L-HA转染组(P值均<0.01);在Hela细胞中,0.5、1μg Nedd4L-HA转染组的IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μg Nedd4L-HA转染组(P值均<0.01)。用IRAK-M-Flag、Nedd4L-HA表达质粒分别单独转染、共同转染至Hela细胞中,免疫共沉淀检测结果显示,在共表达IRAK-M和Nedd4L的细胞裂解物中,用抗Flag的抗体能将Nedd4L-HA沉淀下来,用抗HA的抗体同样能将IRAK-M-Flag沉淀下来。将表达质粒IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA共同转染至A549细胞中,36 h后免疫荧光检测结果显示,在共转染的细胞中,可观察到绿色荧光和红色荧光以重叠形式分布于细胞膜和细胞质中。结论白藜芦醇可抑制IRAK-M蛋白的表达,其作用机制可能与Nedd4L蛋白的表达上调有关。

胃癌组织中NEDD4L的表达及其临床意义

目的研究胃癌中神经前体细胞表达发育下调样基因4(NEDD4L)的表达及其临床意义。方法分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测25对胃癌组织及其对应癌旁正常胃组织中NEDD4L的mRNA和蛋白表达水平,采用免疫组化方法(IHC)检测NEDD4L在124例胃癌组织和25例癌旁正常胃组织中的表达情况,并统计分析其表达与胃癌患者临床病理参数及预后之间的关系。结果NEDD4L在胃癌组织中的mRNA和蛋白表达水平均显著低于对应癌旁正常组织(P <0. 05)。免疫组化结果显示NEDD4L在胃癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P <0. 05)。NEDD4L的表达与肿瘤组织分化程度(P <0. 05)、浸润深度(P <0. 05)和临床TNM分期(P <0. 05)显著相关,且NEDD4L高表达的胃癌患者其预后较好(P <0. 001)。结论 NEDD4L在胃癌组织中低表达,可能与胃癌的发生发展密切相关,且可能作为判断胃癌预后的潜在指标。

调控Nedd4-2泛素化降解上皮离子通道的研究进展

神经前体细胞表达发育抑制蛋白4-2(Nedd4-2)是一种泛素-蛋白连接酶,属于泛素连接酶E3 HECT家族,主要参与蛋白质降解过程,在细胞分化、凋亡等生命活动中发挥重要作用。上皮钠离子通道(ENaC)是细胞膜上的一种糖基化大分子蛋白,在肾脏、肺等组织中,主要调节机体Na^+的转运、液体的重吸收,其结构、功能异常,与诸多疾病的发生发展有关。相关研究表明,Nedd4-2参与ENaC调节,从而调控机体相关功能。本文通过回顾近几年国内外文献,总结了Nedd4-2、ENaC的结构与功能及调控Nedd4-2泛素化降解ENaC的相关研究进展。

NEDD4在食管鳞癌中的表达及作用研究

目的:检测神经前体细胞表达发育下调蛋白4(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4)在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义,并探讨其过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响。方法:应用组织芯片-免疫组织化学染色技术,检测131例食管鳞癌及配对癌旁正常食管上皮组织中NEDD4蛋白的表达情况,并分析其表达水平与临床病理指标的相关性;同时,使用TCGA和GTEx数据库中的mRNA表达数据,分析食管鳞癌组织中NEDD4 mRNA的表达变化。然后,在NEDD4表达水平较高的食管鳞癌细胞系中用特异性siRNA敲降NEDD4的表达,采用CCK8法检测细胞增殖活力的变化。结果:免疫组化染色结果显示,NEDD4在40%(53/131)的食管鳞癌组织中高水平表达,而在癌旁正常食管上皮组织中不表达或低水平表达。NEDD4蛋白的表达水平与食管鳞癌的浸润深度、病理学分期呈正相关(均为P<0.05)。同时,TCGA及GTEx数据库分析结果显示,NEDD4 mRNA表达水平在食管鳞癌组织中明显升高(P<0.01)。细胞增殖活力检测结果显示,在KYSE30和KYSE150细胞中,转染NEDD4 siRNA的实验组细胞的增殖活力均显著低于对照组细胞(均为P<0.01)。结论:NEDD4在食管鳞癌组织中表达上调,其高表达可增强食管鳞癌细胞的增殖活力,提示NEDD4过表达可能在食管鳞癌的发生发展过程中发挥促癌作用。

miR-1249-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期的影响

目的探讨miR-1249-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期的影响。方法采用OncoMir肿瘤数据库(OMCD)分析miR-1249-5p表达水平与前列腺癌患者总生存期的关系。将人前列腺癌细胞株PC-3分为两组:miR-1249-5p组和阴性对照组。以Lipofectamine 2000为介导,将miR-1249-5p拟似物脂质体复合物或阴性miRNA脂质体复合物转染入对数生长期的PC-3细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组PC-3细胞miR-1249-5p的表达水平,采用集落形成实验检测两组PC-3细胞增殖能力的变化,采用Transwell实验检测两组PC-3细胞侵袭变化,采用流式细胞仪检测两组PC-3细胞周期变化。通过miRNA预测软件miRGator预测miR-1249-5p的靶基因。RT-qPCR和Western blotting法分别检测miR-1249-5p的靶基因表达。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验。结果与miR-1249-5p低表达的前列腺癌患者相比,miR-1249-5p表达水平较高的前列腺癌患者总生存期较长,差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组miR-1249-5p表达水平(10.74±1.19)明显高于阴性对照组(1.56±0.27),差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组集落形成数[(35.86±6.94)个/孔]明显少于阴性对照组[(88.94±11.66)个/孔],差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组穿膜细胞数[(25.01±6.83)个/高倍视野]明显少于阴性对照组[(82.76±8.35)个/高倍视野],差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组处于G_(0)~G_(1)期的细胞比例[(50.79±6.61)%]明显高于阴性对照组[(27.09±2.30)%],差异具有统计学意义(P<0.01),PC-3细胞被抑制在G_(0)~G_(1)期。神经前体细胞表达发育调控蛋白9(NEDD9)可能是miR-1249-5p的靶基因。与阴性对照组比较,miR-1249-5p组NEDD9基因表达水平显著低于阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论miR-1249-5p可以抑制前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期,其可能通过负调控原癌基因NEDD9表达实现。

类泛素蛋白与肝癌

类泛素蛋白是一类与泛素有类似空间结构及酶修饰系统的蛋白质,它们在调节蛋白质功能中发挥着重要作用。类泛素蛋白主要通过对底物蛋白进行类泛素化修饰而发挥核质转运、转录调节、稳定蛋白质、应激反应以及细胞周期调控等多种生物学功能。近年来有大量的研究表明类泛素蛋白功能失调与肝癌的发生、增殖、凋亡以及血管新生等过程密切相关;并且在抗肿瘤药物的研究中也发现,通过调控类泛素化修饰过程可以改变化疗药物的抗肿瘤作用,进而影响肝癌的化疗敏感性,这表明类泛素蛋白可能成为一个新的肿瘤防治靶点。探究类泛素蛋白在肝癌发生、发展中的作用机制对诊断和治疗肝癌有着重要作用。

Nedd4L与肝纤维化发生关系的研究进展

神经前体细胞表达发育调控样基因(Nedd4L)所编码蛋白属于泛素连接酶E3,其对胞内蛋白的泛素化和降解过程至关重要,涉及到Nedd4L的作用方式以及活化与调节。越来越多的研究提示Nedd4L与癌症、肥胖、高血压以及纤维化发生过程息息相关,但其具体机制不甚明确。本文将讨论Nedd4L的研究现状,并重点介绍Nedd4L与肝纤维化发生的关系研究进展。

姜黄素通过下调FoxM1、NEDD4及β-catenin抑制黑素瘤细胞增殖、迁移及侵袭

目的研究姜黄素对黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法将两种人黑素瘤细胞系(A375和A875)分别用不同浓度的姜黄素处理,应用MTT、划痕、Transwell实验观察姜黄素对黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响,利用蛋白印迹技术测定细胞周期蛋白A2(CyclinA2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,FoxM1)、神经前体细胞表达发育下调蛋白4(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4)、β-连环蛋白(β-catenin)的表达情况。结果MTT与集落形成实验结果显示,姜黄素处理后细胞相对活力下降,细胞增殖能力显著下降,且具有剂量依赖性(P<0.001)。划痕和侵袭实验结果显示,姜黄素处理后黑素瘤细胞迁移相对距离明显增加,侵袭的相对细胞数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.001;P<0.05)。Western blot结果显示,姜黄素处理后Cyclin D1和Cyclin A2、FoxM1表达水平降低(P<0.001;P<0.05);过表达FoxM1促进NEDD4表达,敲减FoxM1则抑制NEDD4表达(P<0.001)。与对照组比较,姜黄素处理后细胞核中β-catenin水平明显降低,而细胞质中β-catenin水平明显升高(P<0.001)。结论姜黄素可通过下调FoxM1/NEDD4和β-catenin抑制黑素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

NEDD4L基因与四川藏族高血压氢氯噻嗪疗效的关联分析

目的:研究四川藏族轻度高血压患者对小剂量氢氯噻嗪治疗的反应和耐受性,并比较神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(NEDD4L)基因SNP位点与降压反应的关联。方法:对符合纳入排除标准的120例初发藏族轻度高血压患者,进行问卷调查、体格检查、血清学检测;提取其外周血白细胞DNA进行PCR扩增,使用分子质谱法对NEDD4L基因3个SNP位点rs2288774、rs3865418和rs4149601进行分型。并对所有入选患者进行为期1个月的小剂量氢氯噻嗪(12.5mg,qd)干预。结果:该群体用药前的平均收缩压为153.73mmHg(1mmHg=0.133kPa),用药后的平均收缩压为143.52 mmHg,显著下降10.21 mmHg;用药前的平均舒张压为90.94mmHg,用药后的平均舒张压为85.16mmHg,显著下降5.78mmHg。40例血压达标,达标率为36.70%。协方差分析未发现上述位点不同基因型携带者的血压下降值有显著差异。多元线性回归也未发现上述位点与血压下降值有显著关联。结论:小剂量氢氯噻嗪可在短期内显著降低藏族轻度高血压患者的血压;但未发现以上SNP位点对降压有显著影响。