大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的神经型烟碱受体电流(英文)

本实验采用膜片箝技术观察了神经生长因子分化 5～ 10 d的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 (PC12 )细胞上烟碱受体离子通道电流。在全细胞膜片箝条件下 ,当箝制电压为 -80 m V时 ,灌流乙酰胆碱 (ACh,3 0μmol/ L )诱发一内向电流 ,快速始发并衰减。此乙酰胆碱诱发电流 (IAch)随膜去极化和超级化而分别减小和增大 ,且被筒箭毒所阻断 ,可见此电流是由烟碱受体引起的。全细胞IACh呈较强的内向整流。其衰减相可被一双指数函数拟合 ,时间常数 (τ)分别在秒和分级。τf 对浓度的依赖性较τs强。 PC12细胞表面含有与交感神经元相似的烟碱受体 ,因此提供了一个交感神经元样的同源细胞株。

神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因和儿茶酚-O-甲基转移酶基因多态性与精神分裂症的关联研究

目的探讨CHRNA7、COMT基因多态性与精神分裂症的相关关系。方法采用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术,检测粤东地区精神分裂症患者(140例)与正常对照者(100例)CHRNA7基因3个单核苷酸多态性位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个单核苷酸多态性位点(rs4680、rs737865、rs165599),并对分型结果进行测序鉴定。结果所有位点的单核苷多态性与精神分裂症发病风险无关联(均P>0.05)。结论在中国粤东地区CHRNA7基因3个位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个位点(rs4680、rs737865、rs165599)的基因多态性可能与精神分裂症无关,但此结论尚需要进一步扩大样本量进行验证。

杏仁核电点燃大鼠认知功能及海马α7型神经烟碱胆碱能受体的表达

目的：本研究旨在探讨杏仁核电点燃大鼠恐惧状况、学习记忆能力及海马区a7型神经烟碱胆碱能受体（a7nAChR）表达变化。方法：随机将雄性SD大鼠分为手术对照1周组、2周组及电点燃1周组、2周组。实验结束后，用旷场实验检测大鼠的活动水平、探索能力及恐惧状况；Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力；免疫组织化学和免疫印迹检测大鼠海马区a7nAChR表达变化。结果：电点燃组大鼠点燃成功率为91．7％。旷场实验检测结果显示，与手术对照组比较，点燃1周组和2周组大鼠活动的格子数（F1W=24．77，F1W=O．00；F2W=42．86，Pz。：O．00）、站立次数（F1W=56．18，F1W=O．00；F2W=42．25，F2W=O．00）及排出粪便的颗粒数（F1W=10．08，F1W=0．01，F2W=31．22；F2W=0．00）有差异，具有统计学意义；Morris水迷宫检测结果显示，与手术对照组比较，点燃1周和2周组大鼠搜寻平台的潜伏期（F1W=3．139，F1W=0．095；F2W=0．884，F2W=0．361）及在平台所在象限的搜寻时间百分比（F1W=1.907，F1W=0．185；F2W=0．446，F2W=0．513），差异均无统计学意义；免疫组织化学及免疫印迹结果显示，与手术对照组比较，点燃1周组和2周组大鼠脑海马区a7nAChR表达均增高（F1W=15．70，F1W=0．02，F2W=24．61，F2W=0．01）。结论：大鼠杏仁核电点燃1周和2周后，导致了其情感行为异常，增加了脑海马区a7nAChR的表达，但对其学习和记忆能力的影响不明显，可能与点燃部位、发作频率、发作强度及发作的持续时间有关。

全麻药的作用机制与神经元型烟碱受体的关系

神经元型烟碱受体是一种门控的阳离子通道,在中枢神经系统分布广泛。不同的神经元型烟碱受体亚型参与学习记忆、抗伤害、尼古丁成瘾机制,也可通过突触前机制调节其他递质释放。近来研究发现,许多全麻药和神经元型烟碱受体的亲和力较高,在低于临床剂量时就可对神经元型烟碱受体产生抑制作用。因此认为抑制该受体从而抑制中枢的突触传递可能是全麻药发挥效应的机制之一。

α-芋螺毒素特异性结合受体-神经型烟碱乙酰胆碱受体的同源模建及功能预测

目的探讨神经型烟碱乙酰胆碱受体能被其竞争性拮抗剂α-芋螺毒素选择性阻断的机理。方法采用同源模建的方法构建神经型烟碱乙酰胆碱受体α-7亚型的三维空间结构,并利用分子对接的方法与已知空间构像的α-芋螺毒素对接。结果已构建的神经型烟碱乙酰胆碱受体α-7亚型结构合理,并与已知空间构像的α-芋螺毒素对接成功。结论传统的烟碱型乙酰胆碱受体拮抗剂缺乏专一性,而靶向神经元神经型烟碱乙酰胆碱受体的α-芋螺毒素种类多,特异性强,与不同亚单位组成的受体亲和力不同,应用潜力很大。

尼古丁对大鼠中脑α-7型神经烟碱胆碱能受体表达的影响

目的观察大鼠暴露尼古丁对中脑腹侧背盖区(VTA)、黑质(SN)和大脑皮质α-7型神经烟碱胆碱能受体(α-7-nAChRs)表达的影响。方法建立暴露尼古丁的大鼠动物模型,应用免疫组织化学法、原位杂交法分别观察VTA、SN和大脑皮质α-7-nAChRs蛋白和mRNA表达的变化,用Western blotting方法分析尼古丁作用后PC12细胞α-7-nAChRs表达的变化。结果尼古丁上调大脑皮质α-7-nAChRs蛋白表达,也上调VTA和SNα-7-nAChRsmRNA的表达。在PC12细胞中,α-7-nAChRs表达随着尼古丁作用时间和剂量的增加而增加。结论尼古丁在转录水平上调VTA和SNα-7-nAChRs的表达,在翻译水平上调大脑皮质α-7-nAChRs的表达。

重症肌无力AChRAb与培养神经元nAChR免疫结合反应研究

目的 从离体细胞水平对重症肌无力 ( MG)患者伴有中枢神经系统 ( CNS)受损的机制进行探讨。方法 从 MG患者和正常人血中提取 Ig G。体外培养新生 SD大鼠皮层、脑干、海马神经元 ,同时培养 TE-6 71细胞株作阳性对照 ,然后其与神经元特异性抗体及胆碱能神经元特异性抗体进行间接免疫荧光双标记 ,观察其免疫结合反应。结果 MG患者 Ig G可与离体培养的皮层、脑干、海马神经元及 TE6 71免疫结合 ,而正常人血中提取的Ig G则否。结论 MG患者外周 Ig G( ACh RAb)可与离体培养的神经 -烟碱型乙酰胆碱受体 ( n ACh R)结合 ,是MG患者 CNS受损的可能机制。

α7nACh受体竞争性拮抗剂甲基牛扁亭对昆明小鼠认知功能的损伤

目的：探讨α7nAChR竞争性拮抗剂甲基牛扁亭（MLA）对昆明小鼠认知功能的损伤.方法：给予昆明小鼠腹腔注射MLA高、中、低剂量（1 0、 2.4、 4 8μg·g-1） 1、 3、 6d后,观察各实验组小鼠学习行为、脑细胞超微结构改变以及脑细胞α7nAChR免疫组织化学阳性表达的变化.结果：在定位航行实验和空间探索实验中,MLA 1d高、中、低剂量组和3d、 6d中、低剂量组小鼠的逃逸潜伏期、在目标象限的时间分布与对照组比较均无统计学意义,而MLA 3d和6d高剂量组小鼠的逃逸潜伏期较对照组明显延长,其在目标象限的时间分布也较对照组明显减少; 6d高剂量组海马、皮质区神经细胞超微结构损伤比较严重;MLA 3d、 6d高剂量组小鼠脑海马、皮质区α7nAChR阳性表达与对照组比较明显增多.结论：实验小鼠腹腔连续注射MLA 4.8μg·g-1 3d、 6d能够造成实验小鼠学习记忆损伤,其机制可能是通过对脑海马和皮质区神经元超微结构的损伤而实现.

神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因多态性与精神分裂症的传递不平衡研究

目的探讨神经型烟碱乙酰胆碱受体订亚单位基因（neuronal nicotinic acetylcholine receptor α7 subunit gene，CHRNA7）多态性与精神分裂症的关系。方法应用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术检测129个精神分裂症先证者核心家系CHRNA7基因的rs2337980、rsl909884、rs883473三个单核苷酸多态性，并采用基于单倍型的单倍型相对风险检验（haplotype relative risk，HHRR）、传递不平衡检验（transmission disequilibrium test，TDT）及单倍型分析进行统计。结果（1）HHRR分析结果显示rs2337980位点精神分裂症患者组与虚拟对照组之间等位基因频率差异有统计学意义（P=0．017）；（2）TDT分析发现，rs2337980位点与精神分裂症之间可能存在传递不平衡，杂合子父母过多的传递等位基因C给患病子女（P=0．021）。（3）单倍型分析发现，rs2337980、rsl909884及rs2337980、rsl909884、rs883473组成的单倍型与精神分裂症有显著相关（总体P=0.034；global P=0．027），其中T-C，T-C-T两个单倍型与精神分裂症可能存在传递不平衡。结论CHRNA7基因多态性可能与精神分裂症存在关联，rs2337980的变异等位基因T可能是精神分裂症的保护性因子。

靶向神经元nAChRs的α-芋螺毒素

传统的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)拮抗剂缺乏专一性,而靶向神经元nAChRs的α-芋螺毒素种类多,特异性强,与不同亚单位组成的受体亲和力不同,应用潜力极大。为了更好地研究nAChRs亚型和有效治疗神经性疾病,此文对RgIA、Lp1.1、BuIA、PIA、OmIA、Vc1.1(ACV1)等6种靶向神经元nAChRs的α-芋螺毒素进行了综述。

非神经性烟碱型乙酰胆碱受体在直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨非神经性烟碱型乙酰胆碱受体(α7nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)在直肠癌组织中的表达及临床意义。方法直肠癌患者72例,取其手术切除直肠癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组织化学SP法检测α7nAChR阳性表达率,Spearman法分析α7nAChR阳性表达与临床病理特征的相关性。结果肿瘤组织α7nAChR阳性表达率(69.4%)高于癌旁组织(16.7%)(P<0.05);α7nAChR阳性表达率在肿瘤Dukes分期A+B期者(62.0%)低于C+D期者(86.4%),高分化+中分化者(60.4%)低于低分化+未分化者(87.5%),肿瘤直径<5cm者(63.0%)低于≥5cm者(80.8%)(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,Dukes分期C+D期、低分化+未分化、肿瘤直径≥5cm与α7nAChR阳性表达呈明显正相关(r=0.553,P=0.021;r=0.489,P=0.032;r=0.533,P=0.029)。结论α7nAChR在直肠癌组织中呈高表达,且其阳性表达与原发病灶低分化+未分化、肿瘤直径≥5cm、Ducks分期C+D期明显相关。

宁夏枸杞全果对自然衰老小鼠认知及其脑组织中α7nAChR表达的影响

目的观察宁夏枸杞(FL)全果对自然衰老小鼠认知及脑组织中α7型神经烟碱胆碱能受体(α7nAChR)表达的影响。方法将30只15月龄自然衰老ICR小鼠分为NS组和FL高(FL1组)、低剂量组(FL2组);另将10只3月龄ICR小鼠为青年对照组(青年组)。FL1组、FL2组分别用20%、10%FL汁灌胃,0.2 ml/(10 g.d),NS组和青年组灌胃等量NS,连续42 d。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;黄嘌呤氧化酶法测定其血清超氧化物歧化酶(SOD)活性;硫代巴比妥酸法测定其血清丙二醛(MDA)水平;用免疫组化法检测其大脑组织中α7nAChR的表达变化。结果与青年组比较,NS组小鼠的学习记忆能力下降,血清SOD活性降低,MDA水平提高,脑组织中α7nAChR表达下调(P均<0.05)。与NS组比较,FL1、FL2组的学习记忆能力均提高,血清SOD活性均增加,MDA水平均降低,脑组织中α7nAChR表达均上调(P均<0.05)。结论 FL能够改善自然衰老ICR小鼠的学习记忆能力,其机制可能与FL的抗氧化和上调脑组织中α7nAChR表达有关。