钙粘附蛋白N-cadherin基因RNAi质粒载体的构建与鉴定

目的:构建有效的小鼠神经型钙粘附蛋白(N-cadherin)基因RNA干扰质粒载体。方法:在小鼠基因库中选择3个靶序列并设计合成相应3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列,然后将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pSilencerTM 3.1-H1 hygro质粒并分别命名为pSicad1、pSicad2、pSicad3、pSi-control。酶切和测序鉴定后,将以上重组质粒转染MN9D细胞,用Western Blot和半定量RT-PCR方法检测N-cadherin基因mR-NA和蛋白的表达水平。结果:酶切和测序证实目的寡核苷酸片段已被准确克隆到pSilencerTM 3.1-H1 hygro质粒,与对照组相比,pSicad2和pSicad3转染MN9D细胞后,N-cadherin mRNA和蛋白水平的表达均受到明显抑制,其中N-cadherin蛋白水平在pSicad3组下降50%(P<0.01)。结论:结果表明已成功构建了小鼠N-cadherin基因RNAi质粒载体,为N-cadherin功能研究奠定了基础。

卵巢癌患者癌组织中nm23-H1蛋白和N-cad的表达及意义

目的:探讨卵巢癌患者癌组织中nm23-H1、神经型钙粘附蛋白(N-cadherin,N-cad)表达及其临床意义。方法:选取我院2011年1月至2013年12月间收治的118例卵巢癌患者,根据卵巢癌病理分期分为Ⅰ级(n=49)、Ⅱ级(n=40)、Ⅲ级(n=29),采用免疫组化法检测癌组织及癌旁组织中nm23-H1蛋白和N-cad的表达情况,分析癌组织nm23-H1蛋白、N-cad表达阳性率与卵巢癌病理分级、淋巴结转移间的关系。结果:癌组织中nm23-H1蛋白表达阳性率明显低于癌旁组织(P<0.05),而N-cad蛋白表达阳性率明显高于癌旁组织(P<0.05),其中病理分期Ⅰ级的患者卵巢癌组织中nm23-H1表达总阳性率最高(P<0.05),N-cad表达总阳性率最低(P<0.05);转移者nm23-H1蛋白表达阳性率更低(P<0.05),N-cad表达阳性率更高(P<0.05);nm23-H1蛋白低表达组浆液型腺癌比例高(P<0.05),nm23-H1蛋白低表达组和N-cad高表达组病理分级Ⅲ级比例高(P<0.05)、FIGO分期中Ⅲ~Ⅳ比例高(P<0.05)、3年生存率更低(P<0.05)。结论:卵巢癌组织中nm23-H1及N-cad表达与肿瘤细胞分化程度、癌症类型、癌症病情进展及转移均密切相关,可影响卵巢癌患者的生存期。

卵巢癌患者癌组织中nm23-H1和N-cad的表达及临床意义

目的探讨卵巢癌患者癌组织中第23株被检测的基因H1(nm23-H1)蛋白、神经型钙粘附蛋白(N-cad)表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测2011年1月至2013年12月间采集的118例卵巢癌患者组织中nm23-H1、N-cad表达情况。分析nm23-H1、N-cad表达阳性率与卵巢癌病理分级、淋巴结转移间的关系;比较临床病理特征之间的nm23-H1、N-cad表达差异和两组间的生存率。结果转移者nm23-H1表达阳性率低于无转移组(P<0.05)、N-cad表达阳性率高于无转移组(P<0.05);nm23-H1低表达组较高表达组浆液型腺癌比例高、病理分级中Ⅲ级比例高、FIGO分期中Ⅲ~Ⅳ比例高(P<0.05)。N-cad低表达组病理分级中Ⅲ级比例低、FIGO分期中Ⅲ~Ⅳ比例低(P<0.05);nm23-H1低表达组3年生存率低于高表达组(P<0.05),N-cad低表达组3年生存率高于高表达组(P<0.05)。结论卵巢癌组织中的nm23-H1及N-cad表达与卵巢癌发生进展相关,从而可影响卵巢癌患者的生存期。