地黄饮子含药血清对胎鼠海马神经干细胞迁移的影响

目的:探讨地黄饮子对胎鼠海马神经干细胞迁移的影响。方法:实验采用出生15天的胎鼠,断头后取出脑组织,使用单克隆方法及限稀释法培养神经干细胞,分为治疗组、模型组、空白组。观察地黄饮子含药血清对神经干细胞迁移的影响。结果:地黄饮子含药血清能促进大鼠海马神经干细胞克隆计数,促进神经干细胞迁移数及迁移率,促进神经干细胞迁移至缺血区,分化为神经元。结论:地黄饮子能够调控SDF-1/CXCR4信号通路促进内源性神经干细胞的移行,为中药促内源性神经再生提供新的研究思路。

川芎嗪激活Nrf2/HO-1/CXCR4通路调控神经干细胞迁移干预缺血再灌注大鼠的作用机制

以核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)/趋化因子C-X-C-基元受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)通路为切入点,探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)干预大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠脑内神经干细胞(neural stem cells,NSCs)迁移的作用机制。SD大鼠分为假手术组、模型组、TMP 20 mg·kg^(-1)组和TMP 40 mg·kg^(-1)组;通过神经功能缺失评分评价神经功能损伤;免疫荧光法检测脑组织5-溴脱氧尿苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU)/双皮质素(doublecortin,DCX)双标细胞;观察TMP对C17.2细胞迁移的影响;蛋白免疫印迹法检测脑组织和C17.2细胞中Nrf2、HO-1、p62、醌氧化还原酶1[NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]、基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)、CXCR4蛋白表达。结果显示,大鼠脑缺血7、21 d后,神经功能损伤评分及BrdU+/DCX+细胞显著升高,脑组织中Nrf2及CXCR4表达均显著升高;与模型组相比,TMP 40 mg·kg-1可显著降低神经功能评分,进一步升高BrdU+/DCX+细胞数量及Nrf2、CXCR4及SDF-1表达;此外TMP可以显著促进C17.2细胞迁移,且时间以及剂量依赖性提高p62、Nrf2、HO-1、NQO1表达,TMP 50μg·mL^(-1)给药12 h表达量最高(P<0.01)。综上,TMP可通过活化Nrf2/HO-1/CXCR4通路,促进NSCs迁移从而发挥抗缺血再灌注损伤作用。该研究为TMP在缺血性脑卒中疾病中的应用提供了实验支持。

地黄饮子对急性脑缺血大鼠神经干细胞迁移的影响

目的:探讨地黄饮子对急性脑缺血大鼠神经干细胞迁移的影响。方法:采用大脑中动脉线栓法建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型,将大鼠随机分为模型组、假手术组、中药组、尼莫地平组。假手术组只打开颈部皮肤,毕露颈部血管后不做其他任何处理即缝合;地黄饮子组动物于术后第4天起按4 mL·kg-1灌服地黄饮子药液,每日1次,给药14 d;尼莫地平组每天按1mg·kg-1给予尼莫地平;模型组及假手术组均给予等体积无菌蒸馏水,自由饮食、活动。在第4天至第7天,第18天至第21天肌肉注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)50 mg·kg-1,1次·d-1,之后处死动物取材。治疗第1周、第2周、第3周后进行神经功能评分,并检测细胞基质衍生因子(SDF-1)蛋白含量。结果:在第1周末,与模型组比较,尼莫地平组、地黄饮子组神经功能评分和SDF-1含量均降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。在第2周、第3周末地黄饮子组显著低于模型组和尼莫地平组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:地黄饮子可通过降低脑缺血大鼠脑内SDF-1含量,进一步促进内源性神经干细胞迁移。

神经生长因子诱导神经干细胞定向迁移

目的 探讨体外培养环境中神经生长因子 (NGF)诱导神经干细胞定向迁移的特性。 方法 运用半固体培养法结合单细胞克隆技术动态观察神经干细胞迁移情况 ,采用免疫细胞化学技术鉴定迁移细胞的类别。 结果 在具有NGF浓度梯度的培养体系中 ,克隆细胞迁向高浓度NGF区域。在NGF源附近 ,这种定向迁移更加明显。迁移细胞随时间的延长表达神经元特异性抗原。在含均匀浓度NGF的培养基中细胞从球团向四周短距离的扩散 ,无方向性。所有迁出细胞随时间的延长进一步分化成熟 ,干细胞比率下降。 结论 NGF有诱导神经干细胞定向迁移的作用。