抗神经性贝毒素PbTx-2单克隆抗体的制备及鉴定

研究采用混合酸酐法将神经性贝毒素PbTx-2与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联制备完全抗原。用免疫原PbTx-BSA免疫8周龄BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经过4次亚克隆获得一株可稳定分泌抗PbTx-2的杂交瘤细胞株4B5,间接ELISA法测得腹水效价为1:5.12×104,抗体亚类为IgM,亲和常数为2.32×107mol/L。

神经性贝类毒素免疫亲和柱的制备与应用

通过纯化PbTX-2单克隆抗体,以琼脂糖凝胶(sepharose 4B)为载体制备神经性贝类毒素(NSP)免疫亲和柱,并建立NSP的免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱分析方法。样品以含80%甲醇水溶液提取,PBS缓冲液稀释,经过NSP免疫亲和柱净化和富集后进行LCMS/MS测试分析。同时对上样液、淋洗液、洗脱液等亲和柱参数进行优化。结果表明:NSP免疫亲和柱对贝类样品有很好的净化作用,降低了贝类基质中脂肪、蛋白质、色素、分泌黏液等杂质干扰,提高了样品回收率。在40~800μg/kg范围内样品加标平均回收率为82.95%~112.95%,相对标准偏差为1.27%~2.94%。该NSP免疫亲和柱净化效果强、灵敏度高且受基质干扰小,适用于贝类中神经性贝类毒素的分析测定。

神经性贝类毒素小鼠生物分析法中二氯甲烷残留的气相色谱法测定

目的神经性贝类毒素(NSP)目前的检测方法主要为小鼠生物分析法[1]。建议对该方法做适当地修订,明确旋转蒸馏的真空度压强在200 KPa及其以下,或以新建立的气相色谱法测定方法作为评估二氯甲烷溶剂残留对最终结果影响的附属方法,以避免二氯甲烷溶剂对最终结果的影响,保证最终结果的准确性。方法用乙酸乙酯作为样品提取液中二氯甲烷的萃取溶剂,并建立相应的气相色谱方法测定样品中残留的二氯甲烷。结果试验表明采用不同真空度旋转蒸馏提取液时,其二氯甲烷溶剂残留量是明显不同的。当旋转蒸馏的真空度压强在200 KPa及其以下时,提取液中残留的二氯甲烷量才对最终结果影响极小,可以忽略。结论样品中的二氯甲烷残存量与旋转蒸发仪的旋转真空压强有直接关系。这是由于样品对二氯甲烷溶剂存在一定的吸附作用力。当旋转蒸馏真空度没有达到一定要求,仍然会在样品中吸附一定量的二氯甲烷残留,并对结果造成较大影响,直接影响结果的准确性。

贝类怎么吃才安全

最近，国家食品药品监督管理总局发布公告提醒，近期由于我国南方部分海域发生赤潮，食用贝类的安全风险加大，容易发生食物中毒事件。赤潮是海洋中某些微小的浮游藻类、原生动物或细菌，在一定条件下暴发性繁殖（增殖）或高度聚集而引起的一种生态异常现象的总称。有毒赤潮中的赤潮生物能够分泌麻痹性贝类毒素、下痢性贝类毒素、神经性贝类毒素等毒素。