皮肤黑色素瘤中神经母细胞瘤大鼠肉瘤基因突变分析

目的:应用癌症基因组图谱(TCGA)数据集,在皮肤黑色素瘤中进行神经母细胞瘤大鼠肉瘤(NRAS)基因突变分析。方法:从TCGA数据库收集471例皮肤黑色素瘤病例数据集,统计患者临床信息、应用c Bio Portal网站、SPSS统计学软件对数据集进行突变分析、基因共表达分析、生存期及基因调控网络等分析。结果:在471个病例中,NRAS基因突变98例(占20.80%),其中Q61R为主41例,占41.84%(41/98),Q61K突变31例,占31.63%(31/98),Q61L突变10例,占10.20%(10/98),Q61H突变4例,G12A突变1例,G12D突变1例,G12R突变2例,G13D突变1例,G13R突变2例,其他突变5例。结论:NRAS基因突变在皮肤黑色素瘤中有较高的发生率,占比20.80%,且以Q61突变为主,占比87.75%(86/98),此位点对黑色素瘤的靶向药物研发有着重要的作用。

大鼠中枢神经系统肾母细胞瘤过度表达基因mRNA神经元的发育——原位杂交与RT-PCR研究

目的研究大鼠ＣＮＳ肾母细胞瘤过度表达基因（ｎｏｖ）ｍＲＮＡ神经元的发育。方法原位杂交组织化学和逆转录ＰＣＲ。结果Ｐ０～Ｐ４：原位杂交方法最早检测到ｎｏｖｍＲＮＡ神经元是Ｐ０，Ｐ０～Ｐ４阳性信号均较弱，分布于脑桥和脊髓等。Ｐ５：丘脑部分核团和海马锥体细胞层观察到阳性神经元。Ｐ８：ｎｏｖｍＲＮＡ神经元数目增多，边缘系统及丘脑明显阳性；大脑皮质和下丘脑阳性较弱。Ｐ１５：丘脑、下丘脑和大脑皮质ｎｏｖｍＲＮＡ神经元增多，其余核团稳定在Ｐ８水平。Ｐ３０：在脑干观察到强烈的阳性信号，大脑皮质强阳性，海马、丘脑和下丘脑标记较强。Ｐ６０：脑桥和延髓的标记仍然很强，大脑皮质、丘脑和下丘脑的阳性信号稳定在Ｐ３０水平。Ｐ３００：ｎｏｖｍＲＮＡ神经元显著减少，阳性信号明显减弱。逆转录ＰＣＲ检测结果与原位杂交所得结果基本相符，在出生前２ｄ检测到ｎｏｖｍＲ－ＮＡ，其表达高峰出现在Ｐ３０～Ｐ６０之间，随之下降，Ｐ１５０和Ｐ３００表达弱。结论ｎｏｖ基因与其他早期反应基因不同，其表达高峰不是在胚胎发育早期，而是在近性成熟时期，提示ｎｏｖ基因主要在神经系统发育、分化及功能活动中起作用。

用免疫组化法检测肾母细胞瘤过度表达基因蛋白在大鼠中枢神经系统的分布

为探讨肾母细胞瘤过度表达基因（ＮＯＶ）在中枢神经系统发育和分化过程中的作用，用免疫组织化学ＡＢＣ方法辅以微波抗原修复技术研究ＮＯＶ原癌基因蛋白的分布和定位。结果发现，ＮＯＶ蛋白在成年大鼠的中枢神经系统中有较为广泛的存在，其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑的部分核团、脑桥及脊髓前角。结果提示：ＮＯＶ基因在中枢神经系统的功能活动中可能起重要作用。

神经母细胞瘤细胞生物学检测和荷瘤鼠模型的建立

目的用新鲜肿瘤组织,建立原发瘤的神经母细胞瘤体外细胞系和不同浓度的细胞悬液,制作荷瘤鼠模型,并建立起鼠神经母细胞瘤体外细胞系。方法取新鲜肿瘤标本,用酶消化法,建立体外细胞系和细胞悬液,进行生物学检测,接种于裸鼠(n=14)和SCID小鼠(n=3)后肢前下方的皮下及腹膜后。结果人神经母细胞瘤原发瘤体外细胞系建立成功。裸鼠(5/11)和SCID小鼠(n=2/3)荷瘤成功。结论建立神经母细胞瘤细胞系和动物模型对于研究其转基因诱导分化、神经母细胞瘤的分子生物学特征及其肿瘤自消机制打下了良好的基础。

人神经母细胞瘤免疫活性小鼠移植瘤模型的建立

目的:探讨建立C57BL/6j小鼠人神经母细胞瘤移植瘤模型可行性。方法:取含1×107个对数生长期SK-N-SH人神经母细胞瘤细胞悬液0.2 ml,接种于C57BL/6j系小鼠右前肢腋窝皮下,观察小鼠成瘤率、相对肿瘤体积(Relative tumor volume,RTV)、相对肿瘤增长速率(K)、相对肿瘤倍增时间(Td)、存活时间及移植瘤病理学情况。结果:C57BL/6j小鼠在3、7 d、3周、4、5、6、7周各年龄段持续成瘤率分别为:100%、100%、90%、70%、60%、0%、0%。成瘤后3～5周内,3周与4周及5周龄接种的肿瘤RTV、K、Td及C57BL/6j存活时间均有差异(P<0.05)。结论:在C57BL/6j小鼠体内成功建立人类异种移植瘤模型。不同年龄段接种的成瘤率有差异,可以根据后期研究目的选择接种建模时间。

高频超声监测SD大鼠肾上腺区人神经母细胞瘤移植瘤模型

目的:探讨高频超声在SD大鼠肾上腺区人神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)移植瘤模型中的应用价值,分析超声测量结果与肿瘤实际生长情况的相关性。方法:建立SD大鼠荷瘤模型53只。肿瘤接种后分别于5 d～6周,每4 d随机选取5只SD大鼠行高频超声检查,观察肿瘤的形态、回声和边界,测量肿瘤大小,彩色多普勒超声观察肿瘤内血流分布情况。每次超声检查后剥离肿瘤,测量肿瘤实际大小,并行病理活检,对比两者的相关性。结果:肿瘤成瘤率为100%;超声观察肾上腺区移植肿瘤呈类椭圆形中低回声团块,5～13 d肿瘤生长旺盛,其内血供丰富,>13～17 d生长速度减缓,>17 d肿瘤开始逐渐缩小,29 d后肿瘤内部出现液化坏死和钙化,血供减少;高频超声测量结果与肿瘤实际生长情况呈高度正相关(r=0.993,P<0.001)。结论:高频超声能较准确监测SD大鼠肾上腺区人NB移植瘤模型的建立及成瘤后肿瘤生长情况,具有较高的实用价值。

儿童神经母细胞瘤的放射治疗

儿童神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）是儿童常见的颅外实体肿瘤，占癌相关死亡的15％，生物学行为多样复杂易转移。据统计，发病部位：肾上腺35％（25％-40％），下胸、腹脊柱周围30％（26％-32％），后纵隔19％（14％-29％），盆腔2％（2．5％-3．0％），颈部1％，其他12％（9％-13％）。转移部位为骨、骨髓、肝、淋巴结、皮肤。原发病灶和转移病灶区均是放射治疗的靶区。NB的病理是小圆细胞肿瘤之一，与非霍奇金氏淋巴瘤、尤文氏肉瘤、未分化软组织肉瘤（如横纹肌肉瘤）同属一类，因此尚属放射敏感或中等敏感类肿瘤。

神经母细胞瘤肾上腺原位移植瘤动物模型的建立

目的建立神经母细胞瘤肾上腺原位移植瘤动物模型,探讨其相对于传统皮下异位肿瘤移植模型的优势。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞,开腹接种于SCID-Beige小鼠左侧肾上腺周围脂肪内,并分别在肿瘤细胞接种后第14、21、28天取瘤组织,与传统皮下异位移植的肿瘤比较成瘤率、肿瘤生长速度及组织病理等指标。结果注射相同数量肿瘤细胞后,原位移植鼠成瘤率在3个取材时间点均为100%,而皮下异位移植鼠成瘤率在3个取材时间点分别为33%、67%、78%,原位移植瘤成瘤率高于皮下异位移植瘤。接种肿瘤细胞的第14、21、28天原位移植瘤肿瘤体积分别为(116.21±78.82)、(245.32±97.31)、(3091.21±2042.39)mm^(3),皮下异位移植瘤肿瘤体积分别为(7.26±6.04)、(41.67±38.52)、(292.14±167.12)mm^(3),与皮下异位移植瘤相比,原位移植瘤生长速度更快、种瘤体积更大。肿瘤组织HE染色提示原位移植瘤肿瘤组织较皮下异位移植瘤肿瘤细胞密度更大。结论神经母细胞瘤肾上腺原位移植瘤动物模型技术可行,与皮下异位移植瘤模型相比具有成瘤率高、肿瘤生长速度快的优势;比皮下异位移植瘤更符合临床神经母细胞瘤生长位置,为深入研究神经母细胞瘤提供更准确和高效的动物模型。

Calretinin免疫染色有助于鼻腔的嗅神经母细胞瘤与其他小圆蓝细胞肿瘤的鉴别

嗅神经母细胞瘤（ONB）是罕见的鼻腔恶性肿瘤,由小圆细胞组成,肿瘤细胞巢位于富于血管的纤维性间质中。在组织学上需与其他发生于鼻窦的小圆蓝细胞肿瘤鉴别诊断,包括黑色素瘤、淋巴瘤、鼻窦未分化癌（SNUC）、垂体腺瘤、横纹肌肉瘤、尤文肉瘤/PNET、高级别神经内分泌癌和非角化型鼻咽癌等。在组织足够大、保存好的活检标本中,低级别ONB和这些肿瘤在光镜下就可鉴别。

15例嗅神经母细胞瘤的病理观察

嗅神经母细胞瘤是异腔及副鼻窦罕见肿瘤,形态学上酷似横纹肌肉瘤、淋巴肉瘤、未分化癌,极易误诊。作者对15例嗅神经母细胞瘤进行光镜、免疫组化及电镜(2例)观察,探讨免疫组化及电镜检查在本瘤诊断及鉴别诊断中的应用价值。一。

小儿神经母细胞瘤误诊原因分析

神经母细胞瘤(亦称成神经细胞瘤),是小儿时期最常见的实质性肿瘤之一。此肿瘤可发生于交感神经组织的任何部位,由于肿瘤大小、原发和转移部位不同。

伴上皮样分化的中枢神经系统胶质肉瘤:病例报告及文献复习

目的探讨中枢神经系统胶质肉瘤的临床表现及病理学特征。方法回顾分析1例伴上皮样分化的中枢神经系统胶质肉瘤患者的临床表现、组织病理学以及免疫表型特点,并复习相关文献。结果临床主要表现为头痛,渐进性加重伴意识障碍;头部CT检查显示左侧颞顶枕叶占位性病变并有出血灶。手术中可见肿瘤位于左侧颞顶枕叶,呈囊实性,大小约6cm×6cm×5cm,呈侵袭性生长,顶部侵及硬脑膜,底部侵及横窦;肿瘤实性区域呈黄白色、质地柔软、血液供应丰富,伴有囊性变,囊内可见出血并形成血肿。光学显微镜观察肿瘤由高级别胶质瘤和纤维肉瘤两种分化成分组成,由胶质分化来源的肿瘤细胞排列成实性片状或乳头状,或被纤维肉瘤成分分割包绕成小巢状,散在单核或多核瘤巨细胞,可见栅栏状坏死,血管增生明显,构成肾小球样结构;纤维肉瘤区域可见纤维细胞样细胞排列成席纹状;两种分化成分的肿瘤细胞均可见明显的异型性、深染的细胞核以及核分裂象。免疫组织化学染色显示胶质分化成分的肿瘤细胞胞质胶质纤维酸性蛋白表达阳性,部分肿瘤细胞胞质表达S-100蛋白、巨噬细胞表面抗原(CD68)及上皮膜抗原,Ki-67抗原标记(MIB-1)指数<5%。纤维肉瘤分化的肿瘤细胞间有丰富的网状纤维穿插,而胶质分化区域未见明显的网状纤维。结论胶质肉瘤为临床少见的原发于中枢神经系统恶性肿瘤,含有向胶质及间叶组织分化的两种成分;好发于中年男性,恶性程度高,预后不良。

miR-145-5p对口腔鳞癌细胞增殖的调控作用及其机制

目的 探究miR-145-5p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及其机制。方法 利用GEO数据库构建OSCC的miRNA差异表达谱;通过生物信息学技术预测miR-145-5p靶基因并对其进行GO、KEGG及PPI分析;以人OSCC细胞株(HSC-3)为实验对象,将实验分为CN组(未做处理)、NC组(转染mimic NC)和miR-145-5p组(转染miR-145-5p mimic),通过CCK-8法检测不同剂量(50、100、200 nmol/L)miR-145-5p对HSC-3细胞增殖的影响;JC-1和Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测miR-145-5p对HSC-3细胞的凋亡诱导情况;RT-qPCR检测miR-145-5p调控神经母细胞瘤鼠肉瘤同系物(NRAS)、C-JUN氨基端激酶(C-JUN)、信号转导和转录激活因子1(STAT1)的表达情况。结果 miRNA差异表达谱显示,miR-145-5p在OSCC中表达下调(P<0.05);GO和KEGG分析显示,miR-145-5p靶基因主要调控MAPK信号通路;PPI蛋白互作显示,NRAS是miR-145-5p的关键靶基因之一;CCK-8结果显示,50、100、200 nmol/L的miR-145-5p转染HSC-3细胞后,细胞活力较CN组降低(P<0.05);JC-1染色结果显示,miR-145-5p组HSC-3细胞线粒体膜电位低于CN组(P<0.05);Annexin V-FITC/PI染色结果显示,miR-145-5p组HSC-3细胞凋亡率较CN组明显增加(P<0.05);RT-qPCR结果显示,与CN组比较,miR-145-5p组NRAS表达降低(P<0.05),而MAPK信号通路关键转录因子C-JUN和STAT1表达升高(P<0.05)。结论 miR-145-5p可通过靶向NRAS,并经过MAPK信号通路诱导细胞凋亡,从而抑制OSCC细胞增殖。

姜黄素-PLGA纳米粒对RG2大鼠神经胶质瘤模型的影响

目的评估姜黄素的PLGA-DSPE-PEG杂化纳米粒(Cur-NP)对大鼠神经胶质肿瘤(RG2)的影响。方法超声乳化法制备Cur-NP,Malvern Zetasizer Nano测量纳米粒的粒径,高效液相色谱(HPLC)法测定药物包载量,透析法考察其体外释药特性;对42只成年雌性Wistar大鼠(250~300g)诱导RG2肿瘤模型,通过磁共振成像和组织病理学评估肿瘤体积的变化。结果瘤内注射Cur-NP 5 d后,肿瘤由(66.6±44.6)mm减小至(34.9±21.7)mm(P=0.028),非处理对照组肿瘤体积由(33.9±21.3)mm增加至(123.7±41.1)mm(P=0.036),其他组差异无统计学意义(P>0.05)。结论在体内实验模型中,肿瘤原位给药Cur-NP对胶质母细胞瘤有明显疗效,提示其可能在胶质母细胞瘤的化学疗法中具有潜在应用。

腺泡状横纹肌肉瘤中上皮及神经内分泌标记物的异常表达:潜在的诊断陷阱(英)

如果缺乏免疫组化和／或遗传学研究，要将腺泡状横纹肌肉瘤与其他原始圆形细胞肿瘤进行区分是极其困难的。尤其在成人头颈部，腺泡状横纹肌肉瘤的鉴别诊断包括小细胞癌和神经上皮源性肿瘤（如视神经母细胞瘤）。作者最近发现一些经遗传学证实的腺泡状横纹肌肉瘤病例由于表达细胞角蛋白和神经内分泌标记物而被误诊。他们从档案中选取44例诊断明确的腺泡状横纹肌肉瘤（其中18例得到遗传学证实）进行免疫组化染色，所选抗体包括广谱CK、

脑内胶质肉瘤合并全身多发性神经纤维瘤

胶质肉瘤（GS）是指包含胶质母细胞瘤与肉瘤两种混合成分的罕见原发中枢神经系统恶性肿瘤。1895年Strobe首先将胶质母细胞瘤与肉瘤混合性肿瘤命名为胶质肉瘤，但当时未得到认可。WHO1979年正式把由胶质和肉瘤成分组成的混合性肿瘤命名为GS，

小细胞恶性肿瘤MyoD1、myogenin的染色敏感性和特异性

目的 :研究肌源性调节蛋白在小细胞恶性肿瘤病理诊断与鉴别诊断中的作用。方法 :应用免疫组化S P法 ,对 5 6例小细胞恶性肿瘤 ,包括 19例的胚胎性横纹肌肉瘤、6例的腺泡状横纹肌肉瘤、3例的Wilm瘤、14例的Ewing肉瘤 /PNETs、14例的神经母细胞瘤以及 4例的多形性横纹肌肉瘤行MyoD1、myogenin、MSA、desmin、myoglobin和CD99染色标记。 结果 :MyoD1和myogenin阳性核染色分别见于 2 1/ 2 9(72 4 1% )和 2 0 / 2 9(6 8 97% )的横纹肌肉瘤。除多形性横纹肌肉瘤外 ,4例MyoD1与5例myogenin核染色阴性者没有重叠。 3例Wilm瘤中 2例幼年型MyoD1核染色阳性 ,而myogenin只有 1例核染色阳性 ,另1例成年型Wilm瘤二者均染色阴性。 14例的Ewing肉瘤 /PNETs和 14例的神经母细胞瘤未见核阳性染色。MyoD1和myo genin核阳性染色与横纹肌肉瘤的分化程度呈负相关 ,在较小的原始肿瘤细胞中MyoD1和myogenin核染色比例较高 ,而具有骨骼肌分化的、较大的横纹肌母细胞核阳性染色比例较低。在横纹肌肉瘤中 ,MyoD1阳性核染色的肿瘤细胞比myogenin多 ,myogenin多在小的肿瘤细胞核上染色 ,而MyoD1无论小的原始肿瘤细胞或是稍大的具有骨骼肌分化的肿瘤细胞均有不同程度的表达。MSA、desmin和myoglobin在小细胞肿瘤中染色的敏感性较低。