甲型H1N1流感病毒血凝素和神经氨酰酶基因进化分析

目的：探讨2009年新型甲型H1N1流感病毒血凝素和神经氨酰酶基因的进化规律。方法：通过NCBI数据库下载最新收录的甲型H1N1流感病毒基因序列（中国的北京、四川、山东、福建、台湾,美国的纽约和得克萨斯州,俄罗斯）,采用DNAstar软件排列和修剪病毒各段基因序列并构建进化树。结果：不同地区分离到的2009年新型甲型H1N1流感病毒血凝素和神经氨酰酶编码基因均具有高度同源性（99%~100%）,同一国别的亲缘关系更近,不同国别的亲缘关系稍远,尤其是中国和俄罗斯的关系最远,相近月份亲缘关系近。结论：此次新型甲型H1N1流感病毒来自同一传染源,且病毒到目前没有发生变异。

2009甲型H1N1流感病毒的血凝素和神经氨酰酶基因变异分析

目的探讨2009新型甲型流感病毒H1N1的血凝素和神经氨酰酶基因的进化规律。方法通过NCBI数据库下载最新收录的A/H1N1的基因序列,采用Molecular Evolutionary Genetics Analysis version4.0(MEGA4.0)软件来排列和修剪流感病毒各段基因序列并构建进化树。结果不同地区分离到的2009年新型甲型H1N1流感病毒血凝素和神经氨酰酶编码基因均具有高度同源性,同一国别的亲缘关系更近,不同国别的亲缘关系稍远。结论说明此次新型甲型H1N1流行病毒来自同一传染源,且病毒到目前还没有变异。

血清唾液酸丙酮酸氧化酶测定新法的研究及应用

目的探讨建立一种血清唾液酸测定的新方法以及临床应用。方法应用N-乙酰神经氨酸酶、丙酮酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、N-乙酰神经氨酸醛缩酶、过氧化物酶与色原系统3-甲基-N-乙基(β-羟乙基)苯胺、4-氨基安替比林进行血清唾液酸浓度的酶法测定。结果磷酸盐缓冲液最适浓度为50mmol/L、pH 7.2,最大吸收峰值为510nm,线性范围为0～4 500mg/L,显色稳定。精密度为批内(n=30)变异系数(CV)=1.90%～3.3%,批间(n=30)CV=1.98%～3.5%,回收率为95.2%～105.1%,平均回收率为99.6%。与酶偶联速率法比较,相关系数(r)=0.996,回归方程Y=1.028 X+0.40,两法高度相关,正常参考值范围50～90mg/L。结论该方法具有高度的特异性和准确性,操作简便、灵敏快速、标本用量少、结果稳定,适用于全自动、半自动生化分析仪,更适用于中小型医院,有较高的推广使用价值。

基因筛选克隆表达原花青素降解酶及其酶解条件优化的初步研究

针对化学法制备低聚原花青素存在环保压力和副产物多等问题,研究了通过生物酶法降解高聚原花青素来制备低聚原花青素的方法。首先通过基因筛选方法筛选出SananA和EcnanA基因用于酶法降解高聚原花青素,将SananA和EcnanA基因连接在不同质粒载体表达蛋白的结果表明,SananA基因连接在pETDuet-1载体上时的蛋白表达效果较优。进而,利用纯化的SananA蛋白优化高聚原花青素降解条件,结果显示较优的酶解条件为温度50℃、pH=10、反应时间8 h,在此条件下原花青素单体积累量为35.67 mg/g,二聚体积累量为14.49 mg/g。

通用流感疫苗研究进展

流行性感冒病毒(influenza virus,简称流感病毒)是一种严重威胁人类健康的病毒。全世界每年有上万人死于流感病毒引起的流行性感冒(influenza,简称流感)。同时,流感也对全球经济发展产生严重影响。接种流感疫苗(influenza vaccines)是流感防控的重要手段之一。流感病毒亚型众多、抗原变异较快且因其流行趋势难以预测等因素导致传统流感疫苗接种后免疫效果不佳,研发通用流感疫苗成为预防流感的一种理想策略。现对以流感病毒血凝素(hemagglutinin, HA)、神经氨酸酶(neuraminidase, NA)及流感病毒其他结构蛋白保守区域为免疫原的通用流感疫苗的研究进展作一概述。

2009-2017年河北省廊坊市新甲型H1N1流感病毒基因进化分析

目的了解2009-2017年河北省廊坊市新甲型H1N1流感流行态势,分析H1N1血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酰酶(neuraminidase,NA)基因变异情况及其遗传进化特征。方法选定2009-2017年河北省廊坊市分离的甲型H1N1流感毒14株,使经核酸提取和PCR扩增测序HA和NA基因,采用MEGA version 6.0进行对比分析,采用N-J法构建新甲型H1N1流感病毒HA、NA基因进化树。结果廊坊市2009-2017年新甲型H1N1流感病毒HA基因序列同源性为97.2%~100.0%,NA基因序列同源性为97.7%~100.0%,HA和NA抗原决定簇、受体结合位点、糖基化位点均未发生变异。随着时间的推移,NA和HA突变位点均呈增多趋势,表明毒株逐年发生变异。结论 2009-2017年河北省廊坊市新甲型H1N1流感病毒HA和NA基因与国内、国际代表株高度同源,但其编码蛋白氨基酸的序列逐年发生变异,并出现不同程度的变异增强现象,因此应进一步加强对流感的监测。