H7N9亚型流感疫苗诱导的神经氨酸酶抑制抗体检测方法的建立

目的建立酶联凝集素测定法(enzyme-linked lectin assay,ELLA)检测接种流感疫苗志愿者血清中神经氨酸酶抑制(neuraminidase inhibition,NI)抗体。方法对神经氨酸酶切底物、酶标抗体孵育浓度和时间、最适病毒量以及病毒稀释液pH值等反应条件进行优化,确定合适的反应体系,采用建立的方法检测对接种H7N9大流行流感疫苗34名志愿者血清样本进行检测。结果胎球蛋白作为酶切底物最佳包被浓度为7.5μg/ml;酶标抗体最佳稀释度为1∶500,H7N9疫苗株作为抗原使用pH6.5的稀释液稀释至浓度4.5lgCCID50/ml。疫苗接种后血清样本抗N9型NI抗体滴度较接种前均有显著增高(P<0.001),在34名志愿者中,47%的人NI抗体接种后呈阳性反应(NI抗体滴度≥40),低于HI抗体反应阳转率(P<0.05)。结论建立的基于天然底物检测NI抗体的ELLA法简单实用,为流感疫苗和血清流行病学NI抗体免疫评价体系的建立提供实验资料。