鱼类神经激肽B生理功能及其分子机制

神经激肽B(Neurokinin B,NKB)是由tac3基因编码的一种下丘脑神经肽,属于Tachykinin家族重要成员之一,主要在脑中高表达,但也表达于外周组织中,通过其受体NK3R介导参与了哺乳动物多种生理功能。目前,已在斑马鱼(Danio rerio)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)等硬骨鱼中鉴定出NKB系统,并且NKB能够参与调节鱼类生殖和摄食等重要生理活动。本文对既有硬骨鱼NKB系统研究进行简要总结,从NKB及其受体基因鉴定、组织分布、生理功能、信号转导机制等方面进行全面概括讨论,以增加对鱼类NKB系统的认识和了解,以期为后续研究提供参考。

神经激肽1受体拮抗剂研究进展

神经激肽中P物质是中枢神经系统最重要的神经递质之一,通过与其受体,如神经激肽1受体(NK1R)结合在多种疾病的病理过程中发挥作用。NK1R拮抗剂近年来在临床上应用广泛,不仅能够缓解抑郁、焦虑的症状,而且对抑郁症、焦虑症和化疗引起的恶心、呕吐具有很好的疗效。本文就近年来NK1R拮抗剂的研究进展进行综述。

神经激肽1受体拮抗剂替代地塞米松二联方案预防中度致吐风险化疗所致恶心呕吐的随机对照试验

目的比较神经激肽1(NK-1)受体拮抗剂(RA)联合托烷司琼与地塞米松联合托烷司琼预防中度致吐风险化疗所致恶心呕吐(MEC-CINV)的效果。方法采用非劣效性试验设计,将中国人民解放军南部战区总医院肿瘤科2021年4月至2022年1月满足条件的拟接受中度致吐风险化疗的肿瘤患者按照随机数字表法分为NK-1 RA组和地塞米松组。NK-1 RA组患者采用NK-1 RA(阿瑞匹坦或福沙匹坦)+托烷司琼二联止吐方案,地塞米松组采用托烷司琼+地塞米松标准二联止吐方案。主要评价指标为总观察期(0~120 h)、延迟期(24~120 h)、急性期(24 h内)的呕吐完全缓解(CR)率,次要评价指标为各期恶心完全控制(CC)率及恶心呕吐总缓解(TR)率,安全性指标为止吐药物的不良反应(包括乏力、便秘、呃逆、失眠等症状指标,以及白细胞计数减少、中性粒细胞计数减少、血红蛋白下降、血小板计数减少、丙氨酸转氨酶和/或天冬氨酸转氨酶升高、血肌酐升高等实验室指标异常)。采用差异性检验(检验水准为0.05)和非劣效性检验(非劣效性界值为15%,检验水准为0.025)比较两组的干预效果。结果最终共有101例患者全程参与本研究,其中NK-1 RA组51例,地塞米松组50例。NK-1 RA组和地塞米松组总观察期呕吐CR率分别为58.8%(30/51)和56.0%(28/50),非劣效性检验无统计学意义[P_(非劣效)=0.035,率差(RD)=2.80%,95%CI-16.5%~22.1%];急性期呕吐CR率分别为80.4%(41/51)和78.0%(39/50),非劣效性检验有统计学意义(P_(非劣效)=0.016,RD=2.40%,95%CI-13.4%~18.2%);延迟期呕吐CR率分别为62.7%(32/51)和58.0%(29/50),非劣效性检验有统计学意义(P_(非劣效)=0.021,RD=4.70%,95%CI-14.4%~23.8%)。NK-1 RA组各期恶心CC率略高于地塞米松组,非劣效性检验有统计学意义(均P_(非劣效)<0.025)。两组间各安全性指标差异无统计学意义(均P>0.05)。结论在MEC-CINV患者中,NK-1 RA联合托烷司琼的二联止吐方案对恶心呕吐的控制效果非劣效于地塞米松联合托烷司琼标准二联止吐方案,且安全性良好。

P物质及其受体神经激肽1受体与疼痛的相关性研究

很多疾病均可导致疼痛,如何有效缓解疼痛一直是困扰临床医师的难题。研究发现,P物质是一种十一氨基酸多肽,广泛地分布于神经系统和其他外周组织器官内,其G蛋白偶联受体神经激肽1受体密集分布于脊髓背角浅层。P物质及其受体NK-1受体与疼痛有密切关系。P物质作为兴奋靶组织器官的神经递质,从初级感觉传入纤维终末释放,介导痛觉传递。P物质和NK-1R结合也可以介导痛觉效应。P物质经酶解产生的N端片段和NK-1受体拮抗剂则产生镇痛作用。

乳腺癌中神经激肽受体的表达及受体拮抗剂的作用研究

目的:研究乳腺癌中全长型、截短型神经激肽1受体(neurokinin 1 receptor,NK1R)和神经激肽2受体(neurokinin 2 receptor,NK2R)的表达,及受体拮抗剂对乳腺癌细胞生长的影响。方法:采用免疫组织化学法检测天津医科大学肿瘤医院51例乳腺癌及其癌旁正常组织、30例乳腺良性病变组织总NK1R(包括NK1R-FL和NK1R-Tr)和NK2R表达,采用实时定量PCR和免疫印迹技术检测乳腺细胞系中NK1R-FL、NK1R-Tr和NK2R表达,建立NK1R-FL和NK1R-Tr过表达的乳腺细胞系,在NK1R和NK2R拮抗剂作用下测定细胞增殖和软琼脂集落形成能力。结果:乳腺癌及癌旁正常组织、乳腺良性病变组织中均总NK1R过表达,乳腺癌组织中NK1R-FL、NK2R表达相比癌旁正常组织显著降低,并与乳腺癌分型、组织学分级、淋巴结转移及Ki-67、HER-2、ER和PR表达相关。HBL-100细胞中NK1R-FL和NK2R过表达、NK1R-Tr低表达,MDA-MB-231、T-47D和MCF-7细胞中只表达NK1R-Tr。乳腺癌细胞中NK1R-Tr低表达、NK1R-FL表达增加其对NK1R和NK2R受体拮抗剂的敏感度。结论:乳腺组织中NK1R-FL、NK2R共表达,乳腺癌细胞中NK1R-Tr过表达并负反馈调节NK1R-FL和NK2R的表达,NK1R和NK2R受体可能成为乳腺癌治疗的新靶标。

神经激肽B及其受体在子痫前期患者胎盘、脐血管的表达

目的:探讨子痫前期患者胎盘、脐血管中神经激肽B(NKB)及其受体的表达。方法:用免疫组化SP法检测40例子痫前期患者胎盘与脐带组织中NKB及其受体的分布与定位,以20例正常产妇作为对照。通过高清晰度彩色病理图文分析系统进行定量分析。结果:轻、重度子痫前期胎盘组织中,其NKB含量明显高于对照组(P<0.05,P<0.01),神经激肽受体(NKR)含量亦高于对照组(P<0.05,P<0.05)。重度子痫前期组脐静脉NKR含量高于对照组(P<0.05)。结论:NKB及其受体可能参与子痫前期发病机制。

神经激肽B及其生殖内分泌作用

神经激肽B(neurokinkin B,NKB)是速激肽家族的一员,主要通过其受体NK3R发挥作用。NKB及NK3R在神经系统分布广泛。NKB具有使空腔脏器平滑肌收缩、松弛血管、降低平均动脉压、减慢心率、兴奋离体大鼠脊髓神经元及收缩瞳孔括约肌缩小瞳孔等生物学作用。近年来NKB在生殖内分泌中的调控作用越来越受到关注,关于其调节下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的作用的研究也越来越深入。本文综述了NKB及其受体的分布范围、生理功能、NKB在生殖内分泌调控过程中的作用,其具体的作用机制还有待于进一步研究。

壮医莲花针拔罐逐瘀疗法治疗带状疱疹后遗神经痛的效果及其对神经递质P物质与神经激肽-1表达的影响

目的观察壮医莲花针拔罐逐瘀法治疗带状疱疹后遗神经痛(PHN)的临床效果及其对血清神经递质P物质(SP)及神经激肽-1(NK-1)表达水平的影响。方法选择PHN患者96例,随机分为观察组、对照组1、对照组2,每组32例。观察组采用壮医莲花针拔罐逐瘀法治疗,对照组1给予加巴喷丁胶囊口服,对照组2采用拔罐法治疗。观察3组患者治疗前后血清SP及NK-1表达水平、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、临床疗效。结果治疗后,3组患者血清SP、NK-1表达水平及VAS评分均降低,并且观察组上述指标均低于其余两组(均P <0. 05);观察组疗效优于其余两组(均P <0. 05)。结论壮医莲花针拔罐逐瘀法治疗PHN临床疗效显著,其可能是通过降低患者血清SP及NK-1的表达而发挥作用。

针灸对克罗恩病大鼠P物质与神经激肽1受体表达的影响

目的观察克罗恩病模型大鼠结肠黏膜中P物质(SP)和神经激肽1受体(NK1R)表达的变化,以及隔药灸与电针治疗对其的影响。方法除正常组外,其余大鼠采用TNBS灌肠法制备克罗恩病模型,在确定模型成功的基础上,随机分为模型组、隔药灸组与电针组;隔药灸组与电针组分别予以隔药灸、电针“天枢”、“气海”治疗。采用免疫组化方法检测各组大鼠结肠组织SP及其受体NK1R的表达。结果与正常组大鼠比较,模型大鼠结肠SP、NK1R表达异常升高,隔药灸与电针对其有显著下调作用,尤以隔药灸作用显著,基本恢复正常水平。结论针灸治疗可能是通过下调SP、NK1R的表达,消除肠道炎症,改善组织损伤,发挥治疗作用。

P物质及其神经激肽-1受体在慢性非细菌性前列腺炎大鼠L5~S2脊段的表达

目的：研究慢性非细菌性前列腺炎（CNP）大鼠模型不同造模时段L5~S2脊髓背角P物质（SP）及其神经激肽-1受体（NK-1R）的表达。方法：成年雄性SD大鼠40只,随机分成对照组、模型组（45 d组、60 d组和90 d组）,每组10只。另取30只大鼠提取前列腺组织蛋白,模型组腹腔注射0.5 ml百白破疫苗,同时皮内多点注射1 ml前列腺蛋白提取液和弗式完全佐剂（1∶1）混合液造模,对照组注射同体积生理盐水。分别于造模后第45、60、90天测量大鼠抬腿反应阈值（PWT）,ELISA法测定前列腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10含量,光镜和电镜观察前列腺组织形态学变化,免疫组化检测L5~S2脊髓中SP和NK-1R的表达。结果：模型组大鼠疼痛敏感性增强,PWT 45 d组、60 d组、90 d组分别为（48.72±6.56）g、（42.16±4.3）g、（25.18±5.37）g,显著低于对照组的（73.65±6.68）g。与对照组比较,各模型组大鼠前列腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10含量均显著增加（P均〈0.05）,并且90 d组增加更显著（P均〈0.05）。免疫组化结果显示,SP和NK-1R主要表达于脊髓背角,呈棕黄色索状分布,其他部位不着色或呈淡黄色;SP和NK-1R的表达量各模型组显著高于对照组（P均〈0.05）,同时90 d组也显著高于其他3组（P均〈0.05）。光镜下,对照组前列腺组织未见炎细胞浸润,随着造模时间的延长,前列腺组织出现明显水肿,淋巴细胞增加显著;透射电镜也显示模型组大鼠前列腺组织呈现明显的炎性改变,9 0d组管周间质水肿更加明显,管周细胞与上皮基底间隙增宽,成纤维细胞及周围胶原原纤维数量增多。结论：CNP大鼠L5~S2脊髓背角SP合成增多,受体上调。

神经激肽B受体在小鼠中枢神经系统内的定位分布

目的 研究神经激肽B受体 (NK3)在小鼠中枢神经系统内的定位分布。 方法 免疫组织化学染色。 结果 在小鼠中枢神经系统的绝大部分区域 ,NK3受体样免疫反应产物位于胞体和树突上 ,少部分区域位于神经毡 (neuropil)内。大量NK3受体样免疫反应神经元出现于前嗅核、伏隔核、隔区、腹侧苍白球、苍白球、尾壳核、终纹床核、下丘脑前区、下丘脑结节区、下丘脑外侧区、穹隆周区、视上核、弓状核、乳头体、黑质、腹侧被盖区、红核后区、上丘和下丘、导水管周围灰质、孤束核、及延髓和脊髓背角浅层。大脑皮质的浅层、梨状皮质、背侧海马、杏仁核、脑干网状结构等核团内也含有一定数量的阳性神经元。在丘脑的中线核团和板内核、腹侧海马和脚间核等处 ,NK3受体免疫反应产物主要位于神经毡内。 结论 NK3受体广泛分布于小鼠中枢神经系统内 。

神经激肽B在大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴上的表达

【目的】探究初情期启动前、启动中、启动后大鼠下丘脑、垂体和卵巢中神经激肽B(Neurokinin B,NKB)的表达变化。【方法】以SD雌性大鼠为研究对象,分别取大鼠的下丘脑、垂体和卵巢组织制作冰冻切片,运用免疫荧光染色法检测SD大鼠下丘脑、垂体和卵巢上NKB的分布。【结果】NKB主要分布于各时期大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核、室旁核、腺垂体以及卵巢的黄体细胞、间质细胞。但NKB在不同时期表达水平不同,在初情期启动前(出生后25d)和启动后(出生后60d)表达最强,在初情期启动中最弱(P<0.05)。同一时期不同核团之间NKB表达水平也不同,初情期启动前和启动中室旁核最强,弓状核次之,腹内侧核最弱(P<0.05);在初情期启动后,弓状核和腹内侧核中NKB的表达显著高于室旁核(P<0.05)。腺垂体中NKB在初情期启动时表达最强,初情期启动前次之,初情期启动后最弱(P<0.05)。卵巢间质细胞中NKB在初情期启动中的表达显著低于初情期启动前、后(P<0.05)。卵巢黄体细胞中NKB在初情期启动后表达最强,初情期启动时最弱。【结论】NKB可能与初情期启动的调控密切相关。

实验性哮喘时神经生长因子对神经激肽A的上调作用

目的 :探讨实验性哮喘时神经生长因子 (NGF)对神经激肽A(NKA)的调节机制。方法 :应用放射免疫分析方法检测了NGF缺失时 (鼻腔吸入NGF抗体 )哮喘豚鼠下呼吸道和内脏感觉传入部位NKA含量的变化。结果 :NGF缺失时哮喘豚鼠气管、支气管、肺C7-T5 段脊神经节及相应节段脊髓后角、结状神经节和孤束核区NKA含量明显低于哮喘组和对照组 (P <0 0 1)。结论 :实验性哮喘时NGF可上调下呼吸道和感觉神经节等内脏感觉传入部位的神经激肽A水平 。

哮喘豚鼠结状神经节、脊神经节和中枢内神经激肽A含量变化

应用放射免疫分析方法，检测１６只哮喘鼠一级传入系统和中枢内神经激肽Ａ（ＮＫＡ）的水平。与正常对照组（结状神经节６２８２±１１．０９ｐｇ／ｇｗ．ｗ，Ｃ７～Ｃ８段脊神经节５３．７８±１２．６３，Ｔ１～Ｔ２段脊神经节５４．２３±１９．０８，Ｔ３～Ｔ５段脊神经节５０．５３±１４．２３ｐｇ／ｇｗ．ｗ，Ｃ７～Ｔ５段脊髓后角４５．８６±１９．５６，孤束核５５．２７±１９．６８ｇｐ／ｇ．ｗ．ｗ．

下丘脑kisspeptin/神经激肽B/强啡肽神经元研究进展

Kisspeptin/神经激肽B/强啡肽(KNDy)神经元位于动物的下丘脑弓状核和人类的漏斗状核,因其共表达kisspeptin、神经激肽B和强啡肽而被命名为KNDy神经元。KNDy突变可以导致女性生殖内分泌紊乱、生殖障碍性疾病,因而受到国内外学者的广泛关注。KNDy神经元能够调控下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴,在青春期启动、促性腺激素释放激素(GnRH)释放和生殖内分泌疾病中发挥重要作用,且KNDy神经元与绝经期潮热有关,有望揭开潮热的源头机制。本文就KNDy神经元的发现及命名,KNDy神经元与HPG轴、GnRH、雌激素的关系,以及其在生殖内分泌疾病中的作用进行综述。

实时定量PCR检测大鼠神经激肽1受体mRNA方法的建立及评价

目的:建立检测大鼠神经激肽1(NK1)受体mRNA的SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法,为检测大鼠NK1受体基因表达提供有效的手段。方法:提取大鼠中脑总RNA,扩增NK1受体基因片段,将其克隆入pMD-18T载体,制作NK1受体标准品质粒;应用SYBR GreenⅠ双链嵌合染料,对连续稀释的标准品质粒进行实时PCR分析,评价所建立方法的检测灵敏度;对PCR产物进行溶解曲线分析评价其特异性。结果:成功构建NK1受体标准品质粒,经酶切及测序鉴定,目的片段已插入pMD-18T载体;所建立的实时定量PCR方法的最低检测限度均为每反应102个拷贝,在每反应102～109拷贝范围内,荧光信号达到设定阈值所经历的循环数(Ct值)与起始模板浓度具有良好的线性关系,r=0.999。结论:所建立的检测大鼠NK1受体mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法具有敏感性高、特异性强和线性范围广等特点,适用于对大鼠各种组织NK1受体的大量样本检测。

神经激肽A免疫反应在哮喘豚鼠脊髓中的定量分析

用免疫细胞化学ＡＢＣ法结合显微图像定量分析，研究了神经激肽Ａ（ＮＫＡ）免疫反应物在哮喘豚鼠脊髓中的分布及其变化。结果表明，ＮＫＡ免疫反应纤维及终末分布于豚鼠Ｃ７～Ｔ５段脊髓后角Ⅰ～Ⅲ层和背外侧索核区，ＮＫＡ样阳性免疫反应物的平均密度在前者为４２．２％，后者为３７．２％；它们的平均灰度值分别为１３４．７和９２．９，与对照组（平均密度分别为２７．２％和２４．９％，平均灰度值分别为１９９．９和１２９．２）比较均有显著性差别（Ｐ＜０．０１）。这些研究结果提示脊髓内ＮＫＡ可能参与了哮喘发作的神经病理生理机制，是其发作的重要因素之一。

海水浸泡伤大鼠胃黏膜和血浆中神经激肽A和降钙素基因相关肽的动态变化

目的:观察腹腔海水浸泡伤后大鼠胃黏膜和血浆中神经激肽A(NKA)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平的动态变化,以探讨感觉神经肽在急性胃黏膜病变中的作用。方法:32只SD大鼠随机分成正常对照组和腹腔浸泡伤组,后者又分为1h、2h、3h3组,取大鼠胃黏膜和血浆,采用酶标法和放免法测定胃黏膜和血浆中NKA和CGRP水平。结果:随着浸泡时间的延长,腹腔浸泡伤组大鼠胃黏膜NKA和CGRP水平进行性低于正常大鼠(P<0.05),而血浆NKA和CGRP水平进行性高于正常大鼠。结论:海水浸泡伤是一损伤性因素,可引起胃黏膜中NKA和CGRP水平降低、血浆中NKA和CGRP水平升高,提示NKA和CGRP等感觉神经肽在急性胃黏膜病变发生发展过程中可能有重要作用。

创面修复与去神经支配大鼠皮肤创面上皮神经激肽1受体细胞的表达

目的:研究创面愈合过程中神经激肽1受体在创面周边新生上皮细胞的表达及与创面愈合的关系。方法:实验于2002-01/04在第四军医大学神经生物教研室完成。20只新生SD大鼠采用随机数字法分为两组,每组10只。去感觉神经支配组皮下注射辣椒素破坏皮肤感觉神经纤维,制成失感觉神经模型,另一组为对照组。两组均在臀部制作圆形皮肤缺损,并各从中单纯随机抽样选5只分别在一定时间点沿创面周缘及底部取材,进行神经激肽1受体的免疫组织荧光染色及苏木精-伊红染色,观察其时空分布规律;另外5只在相应时间点测量残留创面面积,对结果进行分析比较。结果:正常大鼠与皮肤去感觉神经大鼠在创面愈合中创面周边新生上皮细胞均有神经激肽1受体表达;损伤后神经激肽1受体表达阳性的上皮细胞增多,胞体增大,呈增殖旺盛表现;神经激肽1受体在去感觉神经大鼠上皮细胞的表达较正常对照高;去感觉神经大鼠与正常大鼠相比,创面愈合速度较慢。结论:大鼠皮肤神经激肽1受体表达与创面愈合之间关系密切,由感觉神经末梢所释放的P物质等神经肽类递质可能是调节促进创面愈合的重要因素。

大鼠消化道神经激肽A的发育研究

应用免疫细胞化学PAP法系统研究了大鼠胚胎13天至成年食道及胃神经激肽A发生发育过程.结果如下:(1)在食道,直至出生前,即胚胎21天才于环肌层及粘膜肌层出现阳性膨体纤维,出生后,随幼鼠的生长发育,相继在上皮内、纵肌层、肌间丛、粘膜下丛出现神经激肽A免疫反应阳性物,其纤维的密度、粗细和着色也逐渐增加,30天时已具备成年的分布特征,其发育主要在生后4周;(2)在胃,于胚胎14天,首先在肌间丛处呈现阳性反应,且发育迅速,阳性反应强,相继在环肌、纵肌、粘膜下层血管壁出现阳性纤维,出生后又于粘膜肌、固有膜及上皮内出现阳性纤维,30天时已和成年鼠的相似,其发育主要在生前1周至生后4周内.提示同一种神经肽在消化道的不同节段其发生不同步,且具不同的发育规律,反映了神经激肽A与消化道的活动有密切的关系.