神经干细胞球生长动力学模型

神经干细胞的体外大规模培养对于细胞移植治疗中枢神经系统受损及各种神经退行性疾病有重大意义。体外呈球状生长的神经干细胞球在长大到一定尺寸之后,有可能在其内部由于养分缺乏而形成坏死细胞,这对于干细胞的有效扩增是极为不利的。因此,模拟神经球的动态生长过程并分析出现坏死细胞的临界神经球尺度对于神经干细胞的大规模扩增有重要意义。本研究采用元胞自动机技术建立了模拟神经球生长的动态模型,并结合神经球内养分的扩散传递模型,求解神经干细胞球内出现坏死细胞的临界神经球尺寸以及坏死细胞的扩大规律。计算结果表明,坏死细胞的出现与体外培养条件有一定关系;坏死细胞的出现主要取决于神经球的尺寸,其外部再好的培养条件也不可能抑制坏死的出现。此外,计算结果还表明,神经球内由于氧缺乏而形成的坏死细胞的出现要早于由于葡萄糖缺乏时的情况,并且坏死细胞一旦出现,其增长速度就非常快,有可能很快使整个神经球成为坏死细胞球。本研究所建立的CA模型及神经球内的传质模型可以很好的模拟神经球的生长过程。

神经生长因子缓释微球植入后阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元的变化

背景:已有研究表明,神经营养因子对中枢和周围神经损伤后的存活修复有促进作用。然而,神经生长因子是大分子蛋白类物质,生物半衰期很短,很难透过血脑屏障,寻找有效的神经营养因子投递系统至关重要。目的:观察了神经生长因子微球对阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元的保护作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-11/2006-07在广州医学院神经生物学实验室完成。材料:采用双乳化技术制备神经生长因子缓释微球。28只SD大鼠,随机分为3组:正常对照组8只,模型对照组8只,神经生长因子缓释微球植入组12只。方法:模型对照组和神经生长因子缓释微球植入组左侧穹隆海马伞切断制备阿尔茨海默病模型,正常对照组不做任何处理。神经生长因子缓释微球植入组切断后即刻行基底前脑注射神经生长因子缓释微球。正常对照组和模型对照组注射等量生理盐水。主要观察指标:注射4周后,利用免疫组化法观察各组大鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元变化。结果:28只大鼠均进入结果分析。模型对照组损伤侧的内侧隔核和斜角带核的神经生长因子受体阳性神经元大量减少,分别减少59.7%和54.4%;神经生长因子缓释微球植入组损伤侧的内侧隔核和斜角带核细胞数分别减少17.9%和19.8%,明显高于模型对照组损伤侧的神经生长因子受体阳性神经元存活数(P<0.05)。结论:神经生长因子缓释微球植入对阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元有明显的保护作用。

碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子联合诱导骨髓基质细胞分化形成神经球

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)联合诱导骨髓基质细胞(MSCs)能否分化形成神经球。方法采用全骨髓法培养MSCs,bFGF和EGF联合诱导MSCs,倒置显微镜下观察分化细胞的形态,免疫荧光法和免疫印迹法鉴定分化细胞。结果 bFGF和EGF联合应用,可有效地诱导MSCs形成神经球。此神经球能传代并分化成神经元样细胞。免疫荧光和免疫印迹法均证实神经球表达nestin蛋白,神经球分化的细胞表达神经元、胶质细胞和少突胶质细胞标志性蛋白。结论 bFGF和EGF联合应用,可有效地诱导MSCs形成神经球。此神经球能自我更新并分化为神经元、胶质细胞和少突胶质细胞。

神经生长因子缓释微球移植对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的保护作用

目的观察神经生长因子微球对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的保护作用。方法采用双乳化技术制备神经生长因子缓释微球;切断SD大鼠左侧穹隆海马伞,基底前脑注射神经生长因子缓释微球;4周后,利用免疫组化法观察各组大鼠基底前脑ChAT阳性神经元变化。结果损伤组损伤侧的MS和VDB的ChAT阳性神经元大量减少,分别减少61.9%和51.4%;神经生长因子缓释微球治疗组损伤侧的ChAT阳性神经元得到明显的保护,MS和VDB细胞数分别下降20.60%和20.9%,明显高于损伤组损伤侧的ChAT阳性神经元存活数。结论神经生长因子缓释微球能够成功地将神经生长因子运载到脑内,神经生长因子缓释微球移植对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元有明显的保护作用。

神经生长因子微球对痴呆鼠行为学的影响

目的观察神经生长因子(rhNGF)微球对老年性痴呆(AD)模型鼠学习和记忆能力的影响。方法采用双乳化技术制备rhNGF微球;雄性SD大鼠28只,随机分为正常组(8只)、模型组(8只)和rhNGF微球治疗组(rhNGF组)(12只)。切断大鼠左侧穹隆海马伞,随即行基底前脑注射rhNGF微球;4w后,Y-迷宫检测各组大鼠的学习和记忆能力。结果模型组大鼠的学习记忆能力明显下降,学习次数和正确记忆次数分别为98.33±8.78和4.0±0.56;rhNGF组大鼠的学习记忆能力得到明显的改善,学习次数显著下降(68.86±4.91,P<0.01),正确记忆次数显著增加(6.8±0.86,P<0.01)。结论rhNGF微球移植治疗能够明显提高AD模型鼠的学习记忆能力。

球后注射鼠神经生长因子治疗视神经萎缩的临床疗效观察

目的:观察球后注射鼠神经生长因子治疗视神经萎缩的疗效。方法:对48例(56只眼)视神经萎缩病人随机分为两组分别采用单纯肌肉注射组(对照组)和配合球后注射组(治疗组)两种方法治疗,在视力、视野等多方面进行治疗前后的比较。结果:①单纯肌肉注射组与配合球后注射组疗效均超过50%,而配合球后注射组疗效优于单纯肌肉注射组(P<0.05)。②从视野变化分析,治疗组有效率96.55%,对照组74.07%,配合球后注射组在视野改善方面优于单纯肌肉注射组(P<0.05)。结论:球后注射鼠神经生长因子治疗视神经萎缩疗效显著,而且其疗效优于单纯肌肉注射组,值得临床进一步推广应用。