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绿色荧光蛋白标记的NTE活性域表达载体的构建及表达
1
作者
常平安
倪小敏
伍一军
《重庆邮电学院学报(自然科学版)》
2006年第3期416-419,共4页
利用含有特定限制性内切酶识别位点的引物,通过聚合酶链式反应扩增出人神经病靶标酯酶活性域的编码序列,经T载体克隆测序正确后,双酶切回收特异片段定向插入到增强型绿色荧光表达载体pEGFP-N3中,通过酶切反应鉴定,构建了绿色荧光蛋白标...
利用含有特定限制性内切酶识别位点的引物,通过聚合酶链式反应扩增出人神经病靶标酯酶活性域的编码序列,经T载体克隆测序正确后,双酶切回收特异片段定向插入到增强型绿色荧光表达载体pEGFP-N3中,通过酶切反应鉴定,构建了绿色荧光蛋白标记的神经病靶标酯酶活性域的融合表达载体pNEST-EGFP。采用脂质体转染的方法将其转染到人神经瘤母瘤细胞SH-SY5Y中,用荧光显微镜观察发现神经病靶标酯酶活性域分布于细胞质中,而且没有导致内质网膜的聚集,表明表达载体成功构建和表达。
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关键词
表达载体
神经
病靶标酯酶
神经瘤母瘤细胞
绿色荧光蛋白
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职称材料
题名
绿色荧光蛋白标记的NTE活性域表达载体的构建及表达
1
作者
常平安
倪小敏
伍一军
机构
重庆邮电大学生物信息学院
中国科学院动物研究所
出处
《重庆邮电学院学报(自然科学版)》
2006年第3期416-419,共4页
基金
重庆邮电大学博士启动基金资助项目(A2005-013)
文摘
利用含有特定限制性内切酶识别位点的引物,通过聚合酶链式反应扩增出人神经病靶标酯酶活性域的编码序列,经T载体克隆测序正确后,双酶切回收特异片段定向插入到增强型绿色荧光表达载体pEGFP-N3中,通过酶切反应鉴定,构建了绿色荧光蛋白标记的神经病靶标酯酶活性域的融合表达载体pNEST-EGFP。采用脂质体转染的方法将其转染到人神经瘤母瘤细胞SH-SY5Y中,用荧光显微镜观察发现神经病靶标酯酶活性域分布于细胞质中,而且没有导致内质网膜的聚集,表明表达载体成功构建和表达。
关键词
表达载体
神经
病靶标酯酶
神经瘤母瘤细胞
绿色荧光蛋白
Keywords
expressing vectors
neuropathy target esterase domain
neuroblastoma cells
green fluorescence protein
分类号
R994.6 [医药卫生—毒理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绿色荧光蛋白标记的NTE活性域表达载体的构建及表达
常平安
倪小敏
伍一军
《重庆邮电学院学报(自然科学版)》
2006
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