免疫组化与电镜在诊断神经系统疑难肿瘤中的应用

目的 分析评估免疫组化和电镜技术在疑难神经系统肿瘤病例诊断中的应用。方法 采用免疫组化和电镜观察对 4例神经系统肿瘤进行研究 ,免疫组化应用的抗体包括了神经系统肿瘤诊断中最重要的几种抗体。结果 通过显微镜观察HE染色切片 ,并结合免疫组化、电镜结果 ,根据WHO神经系统肿瘤 2 0 0 0年分类 ,明确了病理诊断 ,包括中枢神经系统的幕上原始神经外胚叶肿瘤(PNET)、婴幼儿促纤维增生性星形细胞瘤、脊索瘤样脑膜瘤和原发于外周神经的神经纤维瘤。

免疫组化和电镜诊断中枢神经系统疑难肿瘤的研究进展

社会与时俱进的发展,推动了医疗技术水平的提高。伴随神经外科的迅速发展,中枢神经系统疑难肿瘤的诊断和治疗技术在日益提高。而原发性的中枢神经系统肿瘤的发病率也在逐年增长。诊治水平的提高,促使过往认为治疗疗效差的肿瘤,在当下也可以取得十分良好的治疗效果。本文将了解中枢神经系统疑难肿瘤,对其分类进行简要概述,从而探讨免疫组化和电镜诊断中中枢神经系统疑难肿瘤的发展与应用。

中枢神经系统梭形细胞肿瘤病理免疫组化和电镜研究

为了阐明中枢神经系统梭形细胞肿瘤的鉴别诊断,对包括毛细胞型星形细胞瘤、促纤维增生型髓母细胞瘤、梭形细胞胶质母细胞瘤、室管膜瘤、神经鞘瘤、血管外皮瘤、纤维型脑膜瘤、恶性纤维组织细胞瘤、极性成胶质细胞瘤、梭形细胞黑色素瘤、转移性梭形细胞癌和胶质纤维肉瘤等12种肿瘤采用免疫组化和电镜技术进行形态学对比观察。结果表明,这12种肿瘤在免疫组化和超微结构两个方面均各具特征,这两项检查对本组肿瘤的鉴别诊断很有价值。

Fabry病患者皮肤中神经酰胺三己糖苷堆积免疫电镜检测

Background: Fabry disease is characterized by the systemic accumulation of glycosphingolipids, particularly in the lysosomes of vascular endothelial cells of most organs due to the deficient activity of α - galactosidase A. The major glycolipid accumulated in tissue is globotriaosylceramide (GL- 3). To date, no direct detection of GL- 3 by immunoelectron microscopy has been reported. Objectives: To examine whether GL- 3 is accumulated exclusively in lysosomes of cutaneous cells using an anti- GL- 3 monoclonal antibody (mAb) and immunoelectron microscopy. Methods: Skin specimens from seven patients with Fabry disease were examined immunohistochemically by light and electronmicroscopy using an anti- GL- 3mAb. Results: By light microscopy, the cytoplasm of vascular endothelial cells, eccrine gland cells, and perineurium was stained with mouse anti- GL- 3 antibody. Electronmicroscopically, positive signals for GL- 3 were limited to dilated lysosomes in the cytoplasm of endothelial cells, pericytes, eccrine gland cells, dermal fibroblasts and perineurium. Conclusions: Our results demonstrate that the cytoplasmic deposit in Fabry disease was GL- 3 and the accumulated GL- 3 was localized essentially to lysosomes.

BDA神经示踪研究证实大鼠纹状体神经通路连接

目的为了观察证实纹状体神经元的形态定位和突触连接,以及由此证实神经示踪技术在此领域的实用性和有效性。方法实验借助示踪剂立体定位注射,并结合免疫组化和免疫电镜超微结构技术,实验数据以SPSS10.0软件统计处理。结果 (1)神经示踪剂BDA显示较好的定向运送特性,具有敏感和理想的标记效果。借助示踪剂BDA注射的逆行单标记实验结果显示纹状体-SNr和-GPe两类投射神经元的胞体大小和分支数量无明显的形态学差异,在免疫电镜下明显可见阳性树突和树突棘及其所形成的兴奋性突触连接。光镜下可见BDA顺行标记的PFn神经元的轴突终末密集分布于纹状体,并在电镜下清晰可见这些阳性终末与纹状体神经元之间的突触连接。(2)神经示踪结合免疫组化双标记显示纹状体-SNr和-GPe神经元均较少定位于Patch间区,而且均与纹状体Parv中间神经元之间无明显定性关系,但可见中脑TH阳性纤维的密集分布。在电镜超微结构水平可见BDA顺行标记的PFn阳性终末分别与纹状体-直接通路和纹状体-间接通路神经元形成典型的兴奋性突触连接,但与两者之间,及其所属的树突和树突棘之间的突触连接百分率均没有明显的统计学差异(P>0.05,P>0.05)。(3)荧光双标记结果显示BDA标记的PFn阳性终末和VG lut2抗体的免疫标记的背侧丘脑-纹状体阳性终末,在纹状体内呈现95.4%的共存率,而且后者标记更充分。同时也证实纹状体-SNr和-GPe两类投射神经元相互之间不显示可见的共存关系。结论 BDA为高度敏感的神经示踪剂,能够较为方便和充分地标记目的神经元和突触结构。纹状体-SNr和-GPe两类投射神经元的形态结构、分布形式无明显的差异。中脑和背侧丘脑神经元均与纹状体神经元之间存在形态学联系,尤其是背侧丘脑神经元与纹状体-直接通路和纹状体-间接通路神经元之间形成典型的兴奋性突触连接,提示其对纹状体神经元可能具有广泛的兴奋作用。

HCMV感染入神经胶质瘤细胞的光镜、电镜及免疫组化研究

本研究选用人神经胶质瘤细胞U251细胞株作为研究的靶细胞，以细胞形态学改变、细胞超微结构改变以及HCMVLA的表达为指标，研究人类巨细胞病毒（HCMV）是否感染U251细胞，为进一步探讨HCMV致畸机制奠定基础。

原发性肝及胆囊神经内分泌肿瘤

收集了1例经尸体解剖证实的肝及2例外科手术切除胆囊的神经内分泌肿瘤。应用组织学、免疫组织化学和电子显微镜对其肿瘤病理特点进行了观察。免疫组化第一抗体包括抗－嗜铬蛋白A、胃泌素、五羟色氨、胰岛素、生长抑素、胰多肽、肾上腺皮质激素（ACTH）、降钙素、蛙皮素、β绒毛膜促性腺激素（β－HCG）。结果发现1例发生在胆囊的为典型类癌；另两侧诊断为神经内分泌癌分别发生在肝和胆囊。在免疫组织化学中，3例肿瘤大部分细胞（50％以上）对嗜铬蛋白A呈阳性反应。并在肿瘤细胞中分别发现胃泌素、五羟色氨、胰岛素和胰多肽阳性细胞。电子显微镜显示胞浆内含有电子致密圆颗粒。结合文献对肝及胆囊的神经内分泌癌的临床病理特点、神经内分泌癌的分类命名及组织来源进行了探讨。

血清对神经嵴细胞向神经胶质细胞分化诱导的体外研究

目的 :探讨神经嵴细胞在含血清培养基中向神经细胞的自发分化过程。方法 :取妊娠第8.5天的BALB/c胎鼠的神经嵴细胞 ,分别在无血清和含血清培养基中培养。免疫组化和透射电镜鉴定和观察神经嵴细胞的分化情况。结果 :在无血清的培养基中 ,NSE染色结果阳性 ,透射电镜下未见神经内分泌颗粒 ,神经嵴细胞保持其原有的特性 ;在有血清的培养基中 ,神经嵴细胞自发分化 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、神经特异性烯醇化酶 (NSE)和S - 10 0染色阳性 ,透射电镜下可见大量的神经内分泌颗粒。结论 :血清可使神经嵴细胞自发的向神经胶质细胞分化。

嗅神经上皮瘤的临床病理分析

分析嗅神经上皮瘤（嗅神经母细胞瘤）的临床、病理特点，探讨免疫组化技术和电镜在嗅神经上皮瘤诊断中的应用价值。方法对１９例嗅神经上皮瘤进行了临床分析，光镜复查，免疫组化检测，４例做了透射电镜观察。结果嗅神经上皮瘤主要发生于中青年，起病缓慢，首发症状以单侧鼻塞和鼻出血为多见，病理形态为小圆细胞和短梭形细胞呈巢状及弥散分布，菊形团结构少见或缺如；免疫组化检测ＮＳＥ、Ｓｙｎ阳性，ＣＫ、Ｓ－１００等部分阳性，ＧＦＡＰ阴性；电镜超微结构２例在胞质内找到神经分泌颗粒，３例在胞质内发现中间丝、微丝和基膜，１例有细胞连接和神经突起。结论嗅神经上皮瘤这个名称较嗅神经母细胞瘤更确切，诊断除常规病理外，尚需借助于免疫组化检测，分化差的病例只能通过电镜或其他先进的手段来解决。

乳头状胶质神经元肿瘤6例临床病理分析

目的观察乳头状胶质神经元肿瘤（PGNT）的临床病理特征、影像学表现、免疫组化和电镜,探讨PGNT的诊断与鉴别诊断、治疗与预后。方法回顾性分析6例PGNT的临床资料、组织学形态、免疫组化、电镜等,结合文献对其临床特点进行分析。结果 6例PGNT中,男性4例,女性2例,平均年龄28岁。影像学上多呈颅内囊性占位。经典的病理特征是单层或假复层小立方形胶质细胞围绕在透明变性的血管轴心周围,形成假乳头样结构,乳头间区见散在的Neu-N（＋）向神经元分化的细胞。免疫组化：乳头表面的胶质细胞GFAP和S-100（＋）,Ki-67增殖指数1%-3%。电镜显示星形胶质细胞分化特征。结论乳头状胶质神经元肿瘤是一种少见的、好发于颞叶、双向分化的WHO I级肿瘤,手术完全切除肿瘤后预后良好。Ki-67指数对该肿瘤预后的提示作用仍有争议,需要大样本病例的研究。

大鼠视神经的发育学研究

目的观察不同发育阶段大鼠视神经的变化。方法采用常规HE染色、免疫组织化学染色及电镜技术,对28只不同发育阶段大鼠的视神经进行观察。结果新生大鼠视神经无髓,其髓鞘的形成大约在出生后第5天左右;在发育大鼠视神经中,出生后的前3天少突胶质细胞数迅速增加,而星形胶质细胞数在出生3天后迅速减少;随着视神经的不断发育成熟,视神经内成熟的少突胶质细胞数量也迅速增加。结论本研究从组织形态学上初步阐明了发育大鼠视神经的变化规律,即视神经发育成熟的过程是由少突胶质细胞逐渐形成髓鞘的过程。

谷氨酸转运抑制剂诱导脊髓运动神经元选择性损伤

目的:观察谷氨酸转运体抑制剂苏羟天冬氨酸(THA)对器官型培养的脊髓片的影响。方法:取出生后8d乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养,在培养液中加入THA,免疫组化染色进行神经元计数,测定培养液中谷氨酸的含量,电镜观察超微结构改变。结果:THA组随培养时间的延长谷氨酸含量增高,α运动神经元数目减少,超微结构损伤明显,而脊髓背角的中间神经元的数目无显著变化,超微结构损伤相对较轻。结论:谷氨酸转运异常可以诱导选择性运动神经元损伤。

小鼠神经干细胞的生物学特性观察

目的探讨小鼠神经干细胞体外原代培养的生长特性。方法用无血清与单细胞克隆技术对小鼠胚胎脑组织进行分离、培养,用光镜、免疫组织化学进行鉴定,并对其不同生长时期的生物学特性进行透射电镜观察。结果鼠胚胎分离细胞具有连续分化及克隆能力,克隆球和早期的原始细胞神经上皮干细胞蛋白(nestin)抗原呈阳性。成熟分化后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经丝-200(NF-200)抗原呈阳性。不同期电镜结果:培养2周的神经干细胞较原始,核大,细胞质少,细胞器不发达。将其继续培养到4周,部分细胞内可见到发达的细胞器,并在分化细胞中观察到神经微管、微丝、胶样丝和细胞间连接样结构。结论胚胎脑组织在体外培养并克隆成神经球,具有很强的增殖能力,是多分化潜能干细胞。

胸腔混合性腺-神经内分泌癌3例病理学观察

目的探讨发生在胸腔的混合性腺-神经内分泌癌的组织学特征和免疫表型。方法对3例发生在胸腔的混合性腺-神经内分泌癌的组织形态、组织化学染色、免疫组化染色及电镜进行观察,结合临床资料分析。结果癌组织由两种不同细胞成分构成,一种构成腺样、筛状结构,癌细胞呈柱状或印戒样,核染色质深;另一种构成实性巢团状、菊形团样结构,癌细胞呈小的卵圆形,胞质少,淡红染,核染色质细,肿瘤间质内血窦丰富。3例肿瘤细胞Syn和CK8/18(+),1例CgA(+),另1例CEA和CD56(+);但TTF-1均(-)。电镜下部分瘤细胞有少量神经分泌颗粒。结论胸腔混合性腺-神经内分泌癌是一种在组织形态和免疫表型上具有外分泌和内分泌肿瘤双重特点的肿瘤,诊断依靠组织学特征、免疫组化标记及电镜检查。肿瘤的生物学行为尚不确定。

肺癌的神经内分泌成分检测

肺癌的神经内分泌成分检测何卫中，林震琼上海胸科医院病理科（上海２０００３０）检测肺癌的神经内分泌成分，对临床治疗及预后判断有一定的参考价值。我们应用免疫组化方法，选择了一组神经内分泌标志，对各型肺癌的神经内分泌分化作了初步探讨。一、材料和方法收集我院...

鼻腔神经内分泌癌（附2例报告）

目的 本文报告2例鼻腔小细胞神经内分泌癌，结合文献探讨鼻腔神经内分泌癌的诊断和治疗。方法 对2例鼻腔神经内分泌癌作了临床分析总结，女性1例，男性1例，病变均位于右侧，病程为3mo，1例病人病变范围广泛。单纯放射治疗1例，1例行综合治疗。结果经免疫组化和电镜检查证实为小细胞神经内分泌癌，2例病人均随访中，1例病人已存活3a，1例存活已1a。结论 鼻腔小细胞神经内分泌癌不易和小细胞肿瘤鉴别，确诊需行免疫组化或电镜检查，为高度恶性肿瘤，发现时多数病变范围广范，对放疗和化疗敏感，治疗中应采用综合治疗方案。

颅脑外伤后细胞凋亡与Fas抗原的表达

目的探讨颅脑外伤后细胞凋亡与Fas抗原表达的变化。为阐明损伤后神经元丢失的多种途径提供实验依据。方法建立大鼠自由落体脑创伤模型,采用免疫组化技术及细胞透射电镜观察形态学的方法,对伤后挫伤灶旁局部脑组织细胞凋亡和Fas抗原表达进行观察。结果在挫伤灶旁观察到细胞凋亡的发生,神经细胞呈现较为典型的凋亡超微结构变化,Fas蛋白表达在24h达到高峰,随后呈下降趋势。结论颅脑外伤后在局部组织可见细胞凋亡的发生,Fas蛋白表达参与了外伤后神经细胞凋亡的过程。

伸展细胞型室管膜瘤的病理学观察

目的 探讨伸展细胞型室管膜瘤的临床病理特点、诊断及鉴别诊断。方法 对6例伸展细胞型室管膜瘤进行光镜、免疫组化、特殊染色、电镜观察并结合文献进行分析。结果 肿瘤主要由长梭形细胞构成,呈束状交错状、车辐状排列,可见围绕血管分布,形成假菊形团。瘤细胞呈单极或双极突起细长,分化好,核分裂象罕见,未见坏死。免疫组化标记瘤细胞vim entin强阳性,GFAP、S -100蛋白、EMA阳性,Syn和HHF35阴性。超微结构观察见较多的中间细丝和发育好的的桥粒,以及细胞间腔隙内有微绒毛。结论 伸展细胞型室管膜瘤起源于脑室附近伸展细胞,是罕见的室管膜瘤的一个亚型,在诊断上往往易与其它梭形细胞为主的神经上皮肿瘤相混,病理诊断依赖于组织学、免疫组化、特殊染色和电镜观察。免疫组化和特殊染色在鉴别诊断中有重要价值。

婴儿色素性神经外胚层瘤7例临床病理学特征

目的 探讨婴儿色素性神经外胚层瘤(Melanotic Neuroectodermal Tumor of Infancy, MNTI)的临床病理、超微形态学、分子遗传学特点、病理诊断及鉴别诊断。方法 收集北京儿童医院6例及郑州大学第三附属医院1例MNT1存档蜡块及相关临床病理资料,对存档切片进行HE染色及免疫组化染色。免疫组化检测肿瘤组织中CK、HMB45、Syn、CgA、NSE、CD99、Ki-67等表达情况,电镜下观察两例肿瘤组织的超微结构,采用实时荧光PCR法检测1例BRAF V600E基因突变情况。结果 7例MNT1中,男孩4例,女孩3例,年龄1月21天到7月11天,平均4.5个月。光学显微镜下观察,7例肿瘤细胞都是呈巢团状、腺泡状、条索状及片状等排列,均可见两种细胞成分,一种较大色素性上皮样细胞,部分细胞胞质内可见多少不等的黑色素颗粒,另一种为小圆形神经母细胞样细胞。肿瘤呈浸润性生长。电镜下观察,色素性上皮样细胞胞质内可见灶状聚集的黑色素小体,小圆细胞细胞质内见少量神经内分泌颗粒。免疫组化结果,色素性上皮样细胞主要表达CK及HMB45等,小圆形细胞主要表达Syn、NSE及CD56等,Ki-67约10~60%。分子检测结果,BRAF V600E基因无突变。随访结果,肿瘤复发率为14.3%(1/7),转移率0%,存活率100%。结论 MNT1是婴幼儿一种罕见的良性肿瘤,肿瘤多位于头颈部,肿瘤细胞主要包括两种细胞形态,一种是上皮样产生色素的大细胞,一种神经母细胞样小圆细胞,明确诊断需要结合临床、组织形态、免疫组织化学染色等结果综合考虑。