备用背根猫脊髓背核组织提取液对鸡胚背根节神经突起生长的影响

应用Liu和Chambers创立的备用背根模型,切除成年雄猫(5只)一侧的L_1～L_5、L_7～S_2背根节,保留L_6背根为备用背根,术后动物存活5d。分别制备脊髓T_(12)～L_3节段手术侧(实验组)、非手术侧(对照组)背核组织及其条件培养液。以Hanks平衡盐溶液的条件培养液作为参照组。用实验组、对照组以及参照组条件培养液对Hamburger 35期Leghorn鸡胚腰段背根部进行悬滴法培养,每只动物进行一批实验。于培养24h,48h观察测量各个背根节神经突起的平均长度。在各组背根节从培养24h到48h神经突起明显增长的基础上,求出每批培养物实验组、对照组背根节平均突起长度与参照组平均突起长度的比值以及5批培养物之平均比值。比较实验组、对照组平均比值在同一观测时间内的差异,发现两个观测时间实验组平均比值都明显大于对照组者。结果提示,猫脊髓经部分去后肢背根传入后,背核组织提取液促进神经突起生长的作用增强。

电针刺激增强备用背根猫背核组织提取液的促神经突起生长效应

切除１０只雄猫的一侧Ｌ１～Ｌ５、Ｌ７～Ｓ２背根节（ＤＲＧ）。保留Ｌ８背根为备用背根。电针刺激５只猫术侧Ｌ６背根分布区的足三里和悬钟、三阴交和伏兔两组穴位１０天，另５只不针刺。术后第１１天取脊髓背核组织，制备提取液，加入培养液。参照组以Ｈａｎｋｓ平衡盐溶液代替提取液。用不同的条件培养液培养鸡胚ＤＲＧ。于培养２４与４８小时测定各ＤＲＧ神经突起的长度，以同一批培养各组平均长度与参照组平均长度的比值衡量各组提取液对ＤＲＧ神经突起生长的影响。组间比较发现，针刺手术侧组的平均比值明显大于非针刺手术侧组和非手术侧组，非针刺的求侧组又明显大于非手术侧组。提示，部分去背根传入猫的背核组织提取液，其促进神经突起生长的作用增强，电针刺激穴位能进一步提高其促神经突起生长的效应。

植块联合培养法探讨备用背根猫脊髓背核组织对鸡胚背根节神经突起生长的影响

５只单侧备用背根猫，于术后第５ｄ分别切取手术侧、非手术侧脊髓Ｌ_３节段背核组织植块，与Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ３５期鸡胚背根节（ＤＲＧ）进行植块联合悬滴培养，以单独ＤＲＧ培养作为参照。于培养２４ｈ、４８ｈ观察ＤＲＧ神经突起的生长情况并测量其长度。结果发现：１．所有ＤＲＧ从培养２４ｈ到４８ｈ其神经突起都有明显增长；２：同一观察时间内，参照组与对照组（ＤＲＧ与非手术侧背核植块联合培养组）神经突起的生长状况较为相似，神经突起少而短，从ＤＲＧ迁移出的细胞多。而实验组（ＤＲＧ与手术侧背核植块联合培养组）神经突起多且长，从ＤＲＧ迁移出的细胞少；３：在分别求出每批培养物的实验组、对照组ＤＲＧ神经突起平均长度与参照组者的比值及５批培养物的平均比值后，发现两个观测时间实验组的平均比值都明显大于对照组者。本研究结果提示，猫脊髓在部分腰骶背根切除后，背核组织的促神经突起生长作用增强。

神经突起生长导向因子(netrin)受体家族研究进展

神经突起生长导向因子netrin是一种分泌蛋白 ,在神经发育所需的轴突导向及细胞迁移中发挥双重导向功能———吸引或排斥 ,主要依赖于生长锥所表达的不同受体结肠癌缺失蛋白 (DCC)或UNC5同源物 (UNC5H) ,从而传递不同信息。同时 ,dcc和unc5h也是肿瘤抑制基因 ,近年来的研究显示这种双重导向功能可能归因于它们属于配体依赖性受体家族。依赖性受体的重要特征是缺乏相应配体时将诱导细胞凋亡 ,因此推测DCC和UNC5H不仅为神经元传递信号所必需 ,同时也是细胞生存因子 ,与细胞存活及正常功能的发挥密切相关。

神经生长因子对体外培养的大鼠颈上节神经突起生长及RNA和DNA合成的作用的放射自显影研究

神经生长因子(NGF)可促进靶神经节神经突起生长晕的生长。本文应用^(3)H-尿嘧啶核苷和^(3)H-胸腺嘧啶核苷放射自显影术,进一步研究该作用与神经元合成RNA和DNA的关系。用新生大鼠颈上节,按Maximow双盖片法进行培养。培养物分NGF组(培养液内添加NGF粗制剂)和对照组(不用NGF)。NGF组培养物被^(3)H-尿嘧啶核苷标记的神经元百分率及标记颗粒水平,均高于对照组,而且每当培养物神经突起生长晕生长速度即将出现高峰时,神经元^(3)H-尿嘧啶核苷标记颗粒水平都明显地增高,说明NGF可促进颈上节神经元的RNA合成,后者与神经突起的迅速生长有一定相互关系。在^(3)H-胸腺嘧啶核苷标记培养物神经元的实验中,观察到NGF可促进培养第3天的颈上节少量的神经元合成DNA。

针刺备用背根猫脊髓背核组织对鸡胚背根节神经突起生长的促进作用

改良了Ｍａｘｉｍｏｗ双盖片悬滴培养法。籍之研究了猫脊髓在部分去腰骶背根传入后以及去传入并行备用背根外周支配区穴位针刺后，背核组织促神经突起生长作用的变化。发现部分去背根传入可使背核组织的促神经突起生长作用增强，电针刺激术侧穴位能够进一步提高背核组织的促神经突起生长效应。推测是为去传入导致备用背根侧支出芽及针刺穴位促进侧支出芽的直接原因之一。

广西人群中神经突起生长抑制因子基因rs2968795G/A和rs10496040A/C多态性分析

目的:分析神经突起生长抑制因子(Nogo)基因rs2968795G/A位点和rs10496040A/C位点在广西人群中的多态性分布特点,并比较其在不同人群间的分布差异。方法:运用多重单碱基延伸法(SNaPshot)和DNA测序法检测323例广西人群的rs2968795G/A位点和rs10496040A/C位点基因型,并用统计学方法比较2个位点的基因型及等位基因频率在男性和女性之间以及不同人群中分布差异。结果:rs2968795G/A位点存在GG、GA、AA 3种基因型,分布频率为18.9%、46.1%、35.0%。此位点基因型及等位基因频率在广西人群的男性和女性间差异无统计学意义。其基因型和等位基因与国际人类基因组单体型图计划(HapMap)公布的欧洲和非洲人群比较差异有统计学意义;rs10496040A/C存在AA、AC、CC3种基因型,分布频率为1.2%、16.4%、82.4%。此位点基因型及等位基因频率在广西人群的男女之间差异无统计学意义。基因型和等位基因频率与欧洲、非洲和日本人群间差异均有统计学意义。结论:Nogo基因rs2968795G/A位点和rs10496040A/C位点基因多态性在不同人群间存在着不同程度差异。这种差异可能对研究其多态性和相关疾病的关系在不同人群间中的差异具有指导意义。

神经突起生长导向因子G配体家族研究进展

神经突触细胞黏附分子（neuronal synapses cell adhesion molecules，NCAMs）在突触发育的不同阶段有重要调控作用，如轴-树突接触、早期突触形成、突触成熟、突触信号转导以及突触结构和功能的可塑性改变等。

备用背根猫脊髓Ⅱ板层组织对鸡胚背根节神经突起生长的影响

用１０只存活５ｄ的单侧后肢备用根猫（切除Ｌ１～Ｌ５、Ｌ７～Ｓ２背根节，保留Ｌ６背根），取手术侧（实验组）和非手术侧（对照组）脊髓Ⅱ板层组织块及提取液分别与Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ３５期鸡胚背根节进行悬滴培养，并以不加植块的背根节培养作参照。比较各组在同一观测时间的差异．结果：（１）各组背根节从培养２４ｈ到４８ｈ，其神经突起均明显增长；（２）同一观测时间内，对照组与参照组的神经突起少而短，从背根节迁出的细胞较多，而实验组神经突起多且长，迁出的细胞较少；（３）在两个观测时间，植块与提取液培养的实验组背根节神经突起平均长度均显著长于对照组者，而对照组与参照组背根节神经突起长度的差异无显著性．表明部分腰骶背根切除猫，其脊髓Ⅱ板层及其提取液的促神经突起生长活性增强．

大鼠脑缺血再灌注损伤后脑皮层神经突起生长素(neuritin)表达变化的研究

本研究旨在探讨大鼠短暂性脑缺血损伤后不同时间点脑皮层中神经突起生长因子(neuritin)表达的变化规律,为研究neuritin在神经修复中的作用奠定基础数据。采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作TGI大鼠模型,按伤后不同时间分为3、7、14、21d组,用免疫印迹及定量PCR的方法检测大鼠脑皮层neuritin蛋白质及mRNA的表达,并分析其表达变化特点。免疫印迹结果显示:3d、21d实验组皮层neuritin的表达与对照组相比无明显变化;7d和14d实验组Neuritin蛋白表达量,显著高于3、21d和对照组。Neuritin mRNA定量PCR结果表明:与对照组相比,各实验组无明显变化。基于Neuritin mRNA和蛋白质的表达特点,推测可能通过某种转录后调控机制调控Neuritin蛋白表达的变化。TGI后,机体启动神经修复机制,Neuritin蛋白表达迅速升高,并维持两周较高水平的表达。当修复完成后Neuritin又恢复到正常水平。这种变化规律提示neuritin在神经损伤中可能具有重要的修复作用。

神经营养素-3能够促进体外受损伤大鼠脊髓神经元的存活及其神经突起生长

目的探讨神经营养素-3(NT-3)对体外机械性损伤的大鼠脊髓神经元存活及其神经突起生长影响。方法将体外培养的大鼠脊髓神经元分为4组:正常组、对照组、20 ng/ml NT-3组和40 ng/ml NT-3组。培养4 d后,除正常组外,其余3组建立划痕损伤模型。在划痕损伤后,对照组不做处理,另外2组分别在培养液中加入20 ng/mlNT-3和40 ng/ml NT-3继续培养。直至培养第6 d,应用4%多聚甲醛固定4组细胞。固定后的细胞分别做转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记(TUNEL)、微管相关蛋白2(MAP2)和生长相关蛋白-43(GAP43)免疫荧光染色,检测划痕损伤的神经元凋亡及其神经突起生长情况。结果免疫荧光化学染色显示,与对照组相比,应用NT-3处理的2组可以显著降低划痕损伤后的脊髓神经元凋亡率,并促进其神经突起生长。尤其是40 ng/mlNT-3组的神经元凋亡率最低,其神经突起可穿过划痕损伤边界。结论 NT-3能够促进体外机械性损伤的大鼠脊髓神经元存活及其神经突起生长。

腺苷酸环化酶激活剂Forskolin促背根节神经突起生长作用的研究

为探讨Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ对感觉神经元神经突起生长的影响，采用悬浮培养法，对鸡胚背根节进行体外培养。结果：培养２４ｈ后，对照组、Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ组、神经生长因子（ＮＧＦ）组及Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ加ＮＧＦ组生长的神经突起的平均长度分别为９１．２±１７．３μｍ、２７２．３±３１．４μｍ、２９５．３±２８．７μｍ、３０１．８±４０．１μｍ。与对照组相比，三个实验组生长的神经突起的平均长度均较长（Ｐ值均＜０．０１）；Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ加ＮＧＦ组与其它二个实验组比较，神经突起的平均长度无显著差异（Ｐ值均＞０．０５）。结果提示：１、Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ与ＮＧＦ均有促鸡胚背根节神经突起生长的作用；２、Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ与ＮＧＦ无协同促鸡胚背根节神经突起生长作用。

朗飞结处神经突起生长抑制因子(英文)

朗飞结以及结侧区是有鞘轴突上的一些极化区域,越来越多的证据表明胶质细胞分泌的某些抑制中枢神经系统损伤后轴突再生过程中神经突起生长的分子如粘蛋白(tenascins)、硫酸软骨素蛋白聚糖(chondroitin sulphate pro-teoglycans)、髓鞘相关糖蛋白(myelin-associated glycopro-tein,MAG)、轴突生长抑制因子(Nogo)以及少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMGP)等非常特异性的富集于朗飞结区域。这些分子在体外组织培养过程中显示出强烈的神经突起生长抑制作用。在一些基因无义突变的动物模型,能够观察到朗飞结处轴突的生长,表明这些抑制分子能够生理性地保持轴突的完整性并且阻止轴突间随机和错误的联结,然而,大部分的基因无义突变动物模型显示不出明显的中枢神经系统再生改善。这些被称为抑制因子的分子是否是神经再生失败的真正元凶这些抑制因子体内体外实验结果的不一致以及它们特异的定位分布让我们有理由对它们在其他生理作用和功能方面进行重新评价。考虑到轴突-胶质细胞相互作用的双向特性,本综述认为这些抑制因子不仅通过神经元上的受体信号通路调节轴突的极化、离子通道的功能以及轴突的分枝,另一方面轴突产生的化学分子也能反馈性的通过朗飞结区域寡突胶质细胞上的胶质细胞受体信号通路影响寡突胶质细胞的发育。

脑必舒注射液对鸡胚背根节神经突起生长促进作用的实验观察

以进口脑活素注射液为阳性对照 ,观察了脑必舒注射液对鸡胚背根节神经突起的体外促生长作用。结果表明 :分别含 4 0 %脑必舒注射液与进口脑活素的培养液对鸡胚背根节神经突起的生长有相当的促进作用。在脑必舒与进口脑活素的作用下 ,神经突起的生长状况与阴性对照组相比有显著差异。

二十二碳五烯酸对PC12细胞神经突起生长的诱导作用

目的探讨二十二碳五烯酸（docosapentenoicacid，DPA）对PCI2细胞神经突起生长的诱导作用。方法通过培养PCI2细胞，利用MoticZamgesPlus软件测绘细胞图像，观察不同浓度DPA对神经突起形成的影响；Western blot法检测神经元突起标志物βⅢ—tubulin的表达及细胞外调节蛋白激酶（ERK）和蛋白激酶B（Akt）磷酸化程度。结果P12细胞神经突起形成率在DPA的诱导下呈浓度依赖性增加，较对照组分别增加2．4％（DPA10μg／ml，P〉0．05）、18．6％（DPA30μg／ml，P〈0．05）和25．0％（DPA50μg／ml，P〈0．05）；DPA可促进pmtubulin的表达（P〈0．05），提高ERK与Akt的磷酸化水平（P〈0．05）。结论DPA促进PCI2细胞神经细胞突起生长，其机制可能与激活ERK和Akt信号通路有关。

银杏内酯B促进体外分化的神经干细胞神经突起生长的研究

目的:观察银杏内酯B(GKB)对体外分化的神经干细胞(NSC)神经突起生长的影响,并初步探讨其可能的机制。方法:用含不同浓度(20 mg/L、40 mg/L、60 mg/L)GKB的分化培养基培养NSC,在不同时间点测量细胞突起的数量和长度,在第7天时应用免疫荧光染色法检测细胞因子信号转导抑制因子-2(SOCS2)表达。结果:(1)24 h和3 d时各GKB组NSC神经突起长度和数量均较对照组显著增加(P<0.01);40 mg/L和60 mg/L GKB组NSC神经突起数量和平均长度较20 mg/L GKB组显著增加(P<0.01),但两者之间无显著差异。(2)各GKB组和对照组3 d时NSC神经突起长度比24 h时显著增加(P<0.01);对照组3 d时NSC神经突起数量与24 h时无显著差异,而相同GKB组间NSC平均神经突起数量均显著增加(P<0.01)。(3)各GKB组SOCS2免疫反应物平均吸光度分别为1.382、1.578和1.527,均显著高于对照组(1.134,P<0.01);40 mg/L和60 mg/L GKB组SOCS2免疫反应物平均吸光度显著高于20 mg/L GKB组(P<0.01),但40 mg/L GKB组与60 mg/L GKB组无显著差异。结论:GKB能够促进体外分化的NSC神经突起生长,表现为神经突起数量和长度增加;其作用机制可能与SOCS2表达上调有关。

神经生长因子促神经突起生长效应的钙依赖性研究

目的：采用体外培养法，观察神经生长因子（ＮＧＦ）在钙拮抗剂和细胞外不同Ｃａ＋＋浓度条件下对脊神经节突起生长的影响。方法：取８天胚龄的来亨鸡胚获取脊神经节，实验分为４组：ＮＧＦ组、ＮＧＦ＋ｖｅｒａｐａｍｉｌ组、ＮＧＦ＋Ｃａ＋＋组、单纯Ｃａ＋＋组，培养期间定时对脊神经节突起生长长度和密度进行观察。结果：ＮＧＦ＋４ｍｍｏｌ／ＬＣａ＋＋组突起生长明显优于其它组（Ｐ＜０．０１），ＮＧＦ组与ＮＧＦ＋ｖｅｒａｐａｍｉｌ组比较差异具有极显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：ＮＧＦ促脊神经节突起生长效应具有显著的钙依赖性。

嗅鞘细胞对脊髓后角神经元突起生长的影响

目的:观察嗅鞘细胞对胚胎脊髓后角神经元突起生长的影响。方法:分离孕15d胚胎大鼠脊髓,取纵向分开的后半制备成细胞悬液,培养于:(1)原代培养的嗅鞘细胞单细胞层上;(2)嗅鞘细胞培养上清中;(3)原代培养的成纤维细胞单细胞层上;(4)单纯培养。24h后终止培养,行抗神经丝-200免疫细胞化学染色。每组随机取15个神经元,在LeicaQ-570图像分析仪中测量各组神经元的平均总突起长度及平均单个最长突起长度,进行组间比较。结果:神经元平均总突起长度(1)～(4)组分别为408.62±126.91滋m、336.24±106.34滋m、199.37±76.14滋m和64.61±24.49滋m;平均单个最长突起长度(1)～(4)组分别为180.13±83.54滋m、141.22±53.68滋m、107.29±43.35滋m和23.04±5.30滋m。第(1)、(2)组神经元平均总突起长度和平均单个最长突起长度明显高于第(3)、(4)组(P<0.01),而(1)、(2)组之间没有明显差异(P>0.05)。结论:与嗅鞘细胞共培养能明显促进胚胎脊髓后角神经元突起的生长速度。

GDNF促进大鼠背根神经元的存活和突起生长

探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对正常胚胎大鼠背根神经节 (DRGn)的存活及突起生长的作用。本实验采用神经组织原代分离培养的方法建立体外胚胎大鼠背根神经节单细胞培养体系 ,从细胞形态学及应用MTT法观察 1μg/L、10 μg/L、5 0 μg/L和 10 0 μg/LGDNF对体外培养的正常感觉神经元生长的影响。结果表明 :GDNF能明显促进体外培养的正常大鼠背根神经节感觉神经元的存活及突起生长。