circRNA CPT1A调控PTEN在糖尿病视网膜病变患者神经组织病变中的作用

目的 研究circRNA肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)在糖尿病视网膜病变(DR)患者中的表达情况,并探讨其对神经组织病变的作用。方法 选取我院2019年1月至2022年1月收治的2型糖尿病患者80例(102眼),其中无DR(NDR)患者22例(28眼)为NDR组,非增生型DR(NPDR)患者38例(48眼)为NPDR组,增生型DR(PDR)患者20例26眼为PDR组。采用OCTA检查患者视盘周围视网膜神经纤维层(pRNFL)厚度、黄斑神经节细胞复合体(GCC)厚度,采用Western blot检测患者外周血磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN),采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测患者外周血circRNA CPT1A。比较3组患者外周血circRNA CPT1A、PTEN以及pRNFL、GCC厚度,并采用Pearson相关分析患者circRNA CPT1A与PTEN、pRNFL厚度、GCC厚度的相关性。结果 PDR组患者外周血circRNA CPT1A均高于NDR组、NPDR组,而PDR组患者外周血PTEN均低于NDR组、NPDR组(均为P<0.05);NDR组与NPDR组患者外周血circ RNA CPT1A、PTEN差异均无统计学意义(均为P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示,患者外周血circRNA CPT1A与PTEN呈负相关性(P<0.05)。随着疾病严重程度的增加,pRNFL以及GCC厚度均呈降低趋势,NDR组患者的整体、上半部分、下半部分pRNFL厚度以及GCC厚度均高于NPDR组(均为P<0.05),NPDR组患者以上指标均高于PDR组(均为P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,患者外周血circRNA CPT1A分别与受检眼的整体、上半部分、下半部分pRNFL厚度以及GCC厚度均呈负相关性(均为P<0.05)。结论 随着DR严重程度的增加,DR患者外周血circRNA CPT1A呈增加趋势,且与外周血PTEN、pRNFL厚度以及GCC厚度呈负相关性,其作用机制可能为circRNA CPT1A负性调控PTEN的表达,从而参与DR的发生、发展。

一种基于光交联明胶-聚丙烯酰胺的神经组织工程构建物

从改善神经组织再生材料的理化性能角度出发,选择生物相容好的光交联明胶(GelMA)和亲水聚合物聚丙烯酰胺(PAM)构建复合水凝胶支架,用于支持雪旺细胞生长。以纯GelMA作为对照,分别测试不同浓度的光交联明胶-聚丙烯酰胺复合水凝胶(GelMA-PAM)的形貌、理化性能和机械性能;观察雪旺细胞在支架上的生物相容性、增长情况以及分化程度。实验结果表明,PAM可以改善GelMA支架的机械性能,当GelMA与PAM的质量分数分别为10%和2.5%时,该支架具有良好的生物相容性,可促进雪旺神经细胞分化。因此,开发基于GelMA-PAM复合水凝胶支架可作为一种理想的神经组织工程构建物。

逐瘀清心胶囊对精神分裂症大鼠神经组织及髓鞘病变影响及机制

目的 观察逐瘀清心胶囊对MK-801诱导的精神分裂症大鼠神经组织及髓鞘病变的影响,探讨逐瘀清心胶囊治疗精神分裂症的作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、逐瘀清心组、利培酮组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠应用MK-801药液腹腔注射构建精神分裂症模型。造模成功后,逐瘀清心组给予逐瘀清心胶囊混悬液0.054 g/(kg·d)灌胃,利培酮组给予利培酮混悬液0.036 mg/(kg·d)灌胃,空白组及模型组给予等剂量蒸馏水灌胃,均1次/d,连续灌胃28 d。HE染色观察大鼠脑组织病理形态,LFB染色观察脑白质髓鞘病变情况,Western blot法观察脑额叶皮质、海马、扣带组织中分化抑制因子2(Id2)、少突胶质细胞转录因子1(Olig1)、少突胶质细胞转录因子2(Olig2)蛋白表达情况。结果 模型组大鼠脑组织神经元细胞核固缩明显,髓鞘组织结构松散,存在明显的脱髓鞘病变;与模型组比较,逐瘀清心组、利培酮组细胞形态较为规则,核固缩现象减少,脱髓鞘病变减轻,结构较为致密,且逐瘀清心组改善更明显。与空白组比较,模型组大鼠额叶皮质、海马、扣带组织中Id2蛋白表达量均明显升高(P均<0.05),Olig1和Olig2蛋白表达量均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,逐瘀清心组和利培酮组大鼠额叶皮质、海马、扣带组织中Id2蛋白表达量均明显降低(P均<0.05),Olig1和Olig2蛋白表达量均明显升高(P均<0.05)。结论 逐瘀清心胶囊可明显减轻精神分裂症大鼠神经组织损伤,其作用机制可能与调控脑额叶皮质、海马、扣带中Id2、Olig1、Olig2蛋白的表达,修复髓鞘病变有关。

颈脊柱损伤与挥鞭性损伤后脑脊液中神经组织损伤标记物变化对评估神经组织损伤程度的影响

目的探讨脑脊液中神经组织损伤标记物在颈脊柱损伤与挥鞭性损伤后的变化对评估神经组织损伤程度的影响。方法选取脊髓损伤患者46例作为研究组,健康神经系统46例作为对照组,比较两组及研究组中不同类型患者的脑脊液神经丝蛋白(NFL)、神经胶质原酸性蛋白(GAFp)水平。结果研究组脑脊液NFL、GAFp水平均高于对照组(均P<0.05)。颈脊柱损伤患者的脑脊液NFL、GAFp水平均高于挥鞭性损伤患者(均P<0.05);颈脊柱损伤中局部神经障碍患者的脑脊液NFL、GAFp水平均低于脊髓完全损伤患者(均P<0.05),脊髓完全损伤患者的脑脊液GAFp水平低于四肢轻瘫患者(P<0.05),NFL水平高于四肢轻瘫患者(P<0.05)。结论颈脊柱损伤与挥鞭性损伤后脑脊液NFL、GAFp水平能有效评估神经组织损伤程度。

胚胎神经组织低温保存和复温后脑内移植的实验研究

近二十年来,有关神经组织移植的实验及临床研究正在大量开展。应用新鲜的(指未经保存的)神经组织移植,虽然有移植存活率高等优点,但却受时间、地点的限制。因此,有关探索神经组织低温保存的方法。

神经组织染色方法的研究概况

神经组织染色是研究神经退行性疾病所必需的一项关键的实验技术。但是,由于染色步骤的复杂和外界因素的干扰,时常导致染色结果的不稳定。该文就目前国内外建立的神经组织染色方法,包括尼氏染色、神经元染色、神经胶质细胞染色、髓鞘染色、突触染色和神经纤维染色的原理、优缺点及其应用作一概述,以便指导研究者选用合适的染色方法。

类立克次体侵染中华绒螯蟹神经组织的光镜和电镜观察

对患颤抖病的中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)神经和肌肉组织进行光镜和电镜观察 ,结果显示类立克次体广泛存在于胸神经节中的神经胶质细胞、结缔组织以及细胞间隙中。在神经细胞与步足肌肉细胞连接处 ,即运动终板部位有大量类立克次体侵染 ,并且侵染方式与在胸神经节中一样 ,均以聚集成团的形式存在。胸神经节是支配步足的神经丛 ,而颤抖病是以步足颤抖为主要病症的疾病。类立克次体大量侵染胸神经节和运动终板部位 ,表明该微生物与病蟹步足颤抖的病症有密切关系 ,进一步证明类立克次体是颤抖病的致病微生物。

磁刺激对脊髓神经组织损伤的早期保护作用

目的探讨脊髓损伤后应用磁刺激 (Magnetic Stim ulation,MS)对损伤脊髓组织早期钙、镁离子的影响。方法实验利用 Allen氏 WD (Weight drop,WD)技术 ,以 10 g× 2 .5 cm致伤力造成 wistar大鼠 T8脊髓损伤模型 ,实验组分别于术后即刻、 1、 2、 4和 2 4h分别予 0 .5 Hz、 70 %输出强度的磁刺激 ,对照组损伤后不加处理。术后 2、6和 2 4h取实验组、对照组动物损伤区脊髓组织作干湿法测水含量 ;用原子吸收光谱法测钙、镁离子含量。结果损伤区脊髓组织水含量增多 ,钙离子水平升高 ,镁离子水平下降 ,而应用 MS可改善上述变化。结论应用磁刺激可减少脊髓损伤后的离子失衡 ,从而对继发性脊髓损伤具有保护作用。

一种壳聚糖神经组织工程支架的制备及表征

目的：用自行研制的模具制备一种具有轴向排列多通道壳聚糖神经修复导管。方法：实验于2004-05/09在清华大学生物系生物材料与组织工程实验室完成。首先制备多孔或致密的壳聚糖空管,管内径为2~5mm,壁厚0.2~1.0mm。将一组不锈钢针平行贯穿于壳聚糖空管,用钢针固定片固定不锈钢针,然后在此壳聚糖空管中注入壳聚糖溶液,最后用冷冻干燥法成型。然后,对所得到的支架进行理化性能表征,评价多通道壳聚糖导管的溶胀性、体外降解情况,并用瑞氏染色与扫描电镜用来观察N2a细胞（Neuroblastomacells,mouse）在导管内生长情况。结果：①在0.1mol/L磷酸盐缓冲液中溶胀后,多通道壳聚糖导管的内径无显著性变化（P〉0.01）,管壁厚度增大明显（P〈0.01）。②导管在溶菌酶溶液中降解8周后,形态结构无明显变化,而且保持了足够的机械强度和韧性。③瑞氏染色显示N2a细胞核染成深蓝色,铺展在通道表面及成团分布在导管内基质之中。扫描电镜观察可清晰地显示出细胞的形态及在导管中的分布情况。结论：实验制备的多通道壳聚糖导管具有合适的溶胀性、机械强度以及神经细胞亲和性,有潜在的研究与应用价值。

硫酸肝素复合胶原蛋白制备新型神经组织工程支架材料

目的 :探讨以硫酸肝素复合胶原蛋白结合特定条件下冷冻干燥技术制备组成成分和内部空间结构均仿生神经的新型神经组织工程支架材料的可行性 .方法 :胶原蛋白、硫酸肝素均溶于 0 .0 5mol/L的乙酸中 ,搅拌成凝胶状 ,注入硅胶管模具 ,在 2 0 μm/s速度下浸入 - 1 80℃液氮中 ,冷凝成冰晶圆柱体 ,冷冻干燥 ,以紫外线照射的方法使其交联 .经扫描电镜观察、比较其与周围神经和脊髓的内部空间结构的异同 ,计算机图像分析方法测量微孔直径 .将Honchst荧光标记的雪旺细胞种植于硫酸肝素 胶原支架材料并移植于大鼠坐骨神经 ,在荧光显微镜、扫描电镜及光镜下观察其在材料内部的空间排列形式 .结果 :以硫酸肝素复合胶原蛋白结合冷冻干燥技术制备的支架材料具有纵行的、平行排列的微管结构 ,高度仿生神经的内部空间三维结构 ,其微管直径为 1 80 μm ,孔隙率可达 91 % .雪旺细胞在支架材料微管内呈线性平行排列 ,类似于神经基底膜与雪旺细胞形成的Bunger带 .结论 :以硫酸肝素复合胶原蛋白结合特定条件下冷冻干燥技术 ,可以制备在组分和内部空间结构上高度仿生神经的新型神经组织工程支架材料 。

面神经损伤后穴位电针刺激对神经组织中神经营养因子-3及其受体表达的影响

目的:观察穴位电针刺激对面神经再生过程中神经组织神经营养因子-3(NT-3)及其受体表达的影响。方法:日本大耳白兔面神经压榨伤后,电针刺激翳风、颧、地仓、颊车、四白、阳白、合谷穴,每天30min,2周为一疗程。设对照组。经一二三疗程治疗后,应用原位杂交及RT—PCR技术检测针刺组及对照组面神经组织中NT-3及TrkCmRNA表达水平的变化。结果:NT-3、TrkC受体表达高峰均在神经损伤后第6周;在相同时间点,针刺组NT-3、TrkCmRNA的表达明显高于对照组(P<0.05或0.01)。结论:在面神经再生过程中,穴位电针刺激能明显增强面神经组织中NT-3及TrkCmRNA的表达,这一分子水平的表现可能是穴位电针刺激促进面神经再生的机制之一。

聚吡咯的生长及与神经组织相容性的研究

通过化学氧化和电化学氧化方法得到聚吡咯 ,用所得到的聚吡咯与神经组织联合培养 ,通过倒置光学显微镜和扫描电子显微镜观察其生物相容特性 .得知聚吡咯与神经组织有较好的生物相容性 .

酸敏感离子通道在非神经组织中的功能研究

酸敏感离子通道(ASICs)是一类由细胞外酸化所激活的阳离子通道,属于钠通道超家族的新成员。近来发现,ASICs不但在神经系统具有重要的生物学功能,对神经系统以外的组织(如:味蕾、心血管、骨等)的生理和病理过程中也具有重要的作用。该文对有关ASICs在神经以外其他组织中研究的最新进展作一综述,以增进对ASICs生物学功能和病理作用的了解。

新型神经组织工程修复材料基体的研制及其扫描电镜观察

目的 研制一种新型神经组织工程修复材料基体具有轴向孔隙胶原 -氨基聚糖基质的制备方法 ,用于节段性脊髓及周围神经损伤的修复 .方法 将注有胶原 -硫酸软骨素 - 6悬浊液的硅胶管逐步浸入 - 180℃低温液氮中、浸入速度控制在 5× 10 - 5m· s- 1～ 10× 10 - 7m· s- 1之间 ,冷凝成冰晶圆柱 ,冻干 ,通过显微物镜、电镜扫描观察不同浸入速度所制胶原 -氨基聚糖基质内部孔排列规律及走行方向 ,测量孔的大小 .结果 在 <5× 10 - 5m· s- 1 速度时 ,胶原 -氨基聚糖基质微孔走向多呈与圆柱轴的方向相一致的规律排列 ,孔径随速度减慢而逐步减小 .结论 所研制的胶原 -氨基聚糖基质具有不同直径轴向微管结构特性 ,可作为神经组织工程材料基体用于节段性脊髓及周围神经损伤的修复 .

65 dB以下变压器噪声暴露对SD大鼠神经递质和海马区神经组织的影响实验研究

为探讨A计权声压级在65 d B以下的变压器噪声暴露对SD大鼠神经递质和海马区神经组织可能的影响,采样了某1 000 k V变压器噪声作为实验声源,在隔声实验箱中重播。选取96只健康成年(6月龄)SD大鼠随机均分为暴露组S1、暴露组S2和对照组C。暴露组S1、S2分别给予A计权昼夜等效声压级Ldn为60 d B、65 d B的变压器噪声,连续暴露35 d时间,对照组C在相同条件下饲养,无噪声暴露。噪声暴露结束后,测定了SD大鼠主要神经递质的含量,观察了SD大鼠中枢神经系统海马区神经元及突触超微结构,检测了SD大鼠脑部海马区主要神经元蛋白表达水平。研究结果表明:采用高效液相色谱–荧光法测定的暴露组SD大鼠血浆中谷氨酸(Glu)、γ–氨基丁腺素(GABA)、5–羟色胺(5–HT)和多巴胺(DA)等主要神经递质的含量与对照组相比均无显著差异(概率P>0.05);利用透射电子显微镜观测的SD大鼠中枢神经系统海马区神经元超微结构和海马区突触形态超微结构与对照组相比均无显著差异(P>0.05);采用蛋白质印迹法(Western blot)检测的SD大鼠脑部海马区钙调神经磷酸酶(Ca N)A亚基、钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶(Ca MKII)α亚基等主要神经元蛋白表达水平与对照组相比均无显著差异(P>0.05);变电站站界的变压器噪声A计权声压级昼间不超过65 d B,夜间不超过55 d B,以500 Hz以下低频分量为主,高频分量低且衰减快,这种稳定的噪声比交通和工厂噪声低很多,不足以引起SD大鼠神经递质和海马神经组织结构的变化。因此Ldn为60 d B、65 d B的变压器噪声暴露35 d时间对成年SD大鼠的神经递质和神经组织均无明显影响。

纳米支架及合成技术在神经组织再生的应用

神经系统受损常见于不同背景、年龄的人群。当前有许多促神经组织再生的方法,其中组织工程方法应用前景最为良好。采用组织工程技术合成的功能性神经支架,可用于代替、修复受损神经。组织工程技术合成的神经支架具有高度仿生性,且重建神经功能的成功率较高。尤其是纳米技术的应用,在很大程度上促进了神经组织工程技术的发展创新和成功运用。本文重点讨论采用纳米生物材料和生物活性物质以及静电纺丝技术、新出现的3D打印技术和自组装技术合成具有三维结构的纳米纤维神经支架来促进神经组织修复与再生研究进展。

胰腺癌神经组织浸润的多因素分析

目的:探讨胰腺癌神经组织浸润与其生物学特性之间的关系。方法:光镜下观察338例胰腺癌手术切除标本,癌旁及癌组织内均未见明显肿瘤浸润性淋巴细胞(tumorinfi ltrating lymphocyte,TIL)浸润者记为L0,仅癌旁组织内有TIL浸润者记为L1,仅癌组织内有TIL浸润者记为L2,癌旁和癌组织内TIL弥漫性浸润者记为L3;分析神经组织浸润与患者年龄、性别、肿瘤的部位和大小、间质的含量及其TIL浸润程度的关系。结果:有199例发生神经组织浸润,发生率为58.9%。335例含有癌旁组织,其中248例伴有癌旁组织萎缩性胰腺炎,与无明显癌旁组织萎缩性胰腺炎的胰腺癌神经组织浸润发生率之间相比有显著差异(65.32%vs40.23%,P<0.01)。99例间质内无明显TIL浸润(L0);其余239例伴有TIL浸润,其中L1127例,L241例,L371例,各自的神经组织浸润的发生率分别为46.46%、59.06%、70.73%、69.01%,L0组分别与L2组、L3组之间差异显著(P<0.01)。338例胰腺癌中有300例导管腺癌(高、中、低分化腺癌分别为63、179和58例),其余38例非经典导管腺癌。中、低分化腺癌神经组织浸润的发生率(59.22%,70.68%)与非经典导管腺癌(39.47%)相比差异显著(P<0.05,P<0.01)。胰腺癌神经组织浸润与患者的性别、年龄、肿瘤的大小和发生部位、间质含量均未见明显相关性。结论:神经浸润在癌旁伴发萎缩性胰腺炎者或有TIL者分别较在癌旁无萎缩性胰腺炎改变者或无TIL浸润者更容易发生,但与TIL的分布状态无关;导管腺癌较非导管腺癌更容易发生神经组织浸润。

自体神经组织匀浆修复面神经缺损的实验研究

目的:观察聚四氟乙烯膜管内植入自体神经组织匀浆桥接兔面神经缺损的修复效果,寻找修复面神经的新方法。方法:36只成年新西兰大白兔,均制成双侧面神经颊支8mm缺损的模型,用聚四氟乙烯膜管内植入自体神经组织匀浆桥接每只动物右侧面神经缺损作为实验组,单纯膜管桥接左侧为对照组。分别于术后4、8、12周行神经电生理测试后,处死动物,切取再生的神经组织标本进行大体观察、HE染色,普通光镜观察。结果:电生理测试显示,匀浆组术后4周,电刺激通过神经缺损区可引起肌收缩,空管组未引出肌动作电位。术后8、12周两侧均有动作电位引出,但匀浆组的神经传导速度明显大于空管组。光镜观察,匀浆组在术后各个时期神经再生情况均优于对照组,术后8周匀浆组管内充满再生神经纤维和髓鞘,排列较规则、整齐,呈束状分布,束间新生血管丰富;空管组有极少量再生神经纤维通过缺损区,纤维排列较紊乱。结论:自体神经组织匀浆进行神经再生室内移植,可获得比空膜管桥接面神经缺损更好的修复效果。

骨髓神经组织定向干细胞的分离培养鉴定

目的:为临床中枢神经系统疾患的细胞移植及组织工程修复周围神经提供一种应用广泛、可来源于自体、无免疫排斥和伦理道德等问题的移植用种子细胞。方法:采用DMEM/F12(1∶1)无血清神经干细胞培养液,通过先贴壁、后悬浮的方法从大鼠骨髓中分离、培养单克隆生长的神经组织定向干细胞(neural tissue-committed stem cells,NTC-SCs),通过免疫细胞化学检测NTCSCs细胞球CXCR4和Nestin蛋白,以及细胞球自然分化后神经元β-TublinⅢ、MAP2ab以及神经胶质细胞CNPase、GFAP等蛋白的表达。结果:NTCSCs细胞球表达神经干细胞标志蛋白Nestin和组织定向干细胞标志蛋白CXCR4;NTCSCs细胞球在含15%胎牛血清的DMEM培养液中可自然分化,免疫荧光显示神经元和神经胶质蛋白β-TublinⅢ、MAP2ab、CNPase、GFAP等标志物阳性。结论:本研究提供了一种操作简便、成本低廉的NTCSCs的分离培养方法,NTCSCs作为种子细胞为脑、脊髓等神经系统疾患和创伤的修复和治疗提供了广阔的应用前景。