脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y Y5受体反义基因减肥降脂作用关系的研究

目的:探讨脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y(NPY)Y5受体反义基因减肥降脂作用的关系。方法:建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、错义寡核苷酸或生理盐水,观察肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂的变化,采用RT-PCR技术检测腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平。结果:①高营养饮食诱导下,肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠,腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达:水平则显著高于正常大鼠;②NPYY5受体反义寡核苷酸干预后,肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低,腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著低于肥胖对照大鼠。结论:侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著降低肥胖大鼠的体脂、血脂,其机制可能与腹膜后脂肪组织TNF-α基因的表达下调有关。

β_3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y Y5受体反义基因治疗中的作用

目的 探讨β3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y（NPY）Y5受体反义基因治疗中的作用。方法 建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、错义寡核苷酸或生理盐水,测定肥胖大鼠的腹腔内脂肪组织湿重与血脂,并采用RT-PCR技术检测腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平。结果1.高营养饮食诱导下肥胖模型大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠,腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平则显著低于正常大鼠;2.经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后,肥胖大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低,腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平则显著高于肥胖对照大鼠。结论 侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著降低肥胖大鼠的体脂、血脂,其机制可能与腹膜后脂肪组织β3肾上腺素能受体基因的表达上调有关。

人神经肽Y及其受体对脂肪生成影响的研究

人神经肽Y(NPY)作为神经系统影响脂肪生成的调控递质和新近发现的外周脂肪增殖和分化相关细胞、特别是外周脂肪细胞的生物效应分子,通过与其受体家族中不同受体的特异性结合而参与或发挥对机体一系列生理功能的调节和影响,尤其是与肥胖的发生、发展及改变密切相关。而且,NPY对机体肥胖及代谢的影响又可进一步导致一系列老年相关性疾病、特别是肥胖代谢综合症(如老年人群中常见的高血压、高血脂、冠心病、糖尿病、骨质疏松、老年痴呆及一些恶生肿瘤等)等加快出现、持续发展和不断加重。因此,对NPY及其受体在肥胖发生及介导过程中的作用及其相关机制研究显得尤为重要,也是未来老年生物学和老年医学研究的重点和热点。本文从细胞生理学水平,就NPY及其受体促进脂肪组织生成等研究作一综述,为今后老年相关性疾病的基础研究和临床应用及相关理论的系统阐述奠定基础。

肥胖代谢调控因子——人神经肽Y及受体生物学特性的分子水平研究

肥胖代谢调控因子人神经肽Y及其生物衍作为神经递质及生物效应分子可通过不同亲和力及特异性作用于相应靶细胞膜上至少4种入神经肽Y受体Y1R、Y2R、Y4R、Y5R,并通过人神经肽Y配体和受体的特异性结合,激活相关细胞信号传导通路,参与或刺激相关细胞的增殖和分化及内分泌激素的合成与分泌,进而调控整个机体或局部组织各种生理功能,直接或间接影响包括老年机体在内的多种代谢变化及某些老年病的发生、发展、变化及转归,因此成为老年生物学和老年医学研究的热点。本文从人神经肽Y及其受体的生物学特性和分子水平出发,对NPY配体及其受体的分子结构、生物学特性及相互作用机制进行综述,为今后系统阐述该配体和受体在老年病中的代谢特点和作用规律奠定理论基础。

神经肽Y2受体促进大鼠学习记忆的机制

目的:观察双侧海马插管注射神经肽Y2受体的反义寡核苷酸对大鼠海马c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响,探讨Y2受体在学习记忆中可能的作用机制。方法:双侧海马插管注射Y2受体的反义、错义寡核苷酸或生理盐水,应用RT-PCR和免疫组化方法检测大鼠海马中c-fos基因在跳台法训练后的表达水平变化。结果:①反义组大鼠海马c-fos基因mRNA表达水平23.40±8.87明显低于生理盐水组60.38±15.52和错义组53.14±11.71,差异有显著性意义(F=22.54,P<0.001)。但错义组与生理盐水组之间大鼠海马c-fos基因的mRNA表达水平差异无显著性意义,(P>0.05)。②反义组大鼠海马c-Fos蛋白阳性细胞数在海马CA1,CA3和齿状回分别为16.33±6.18,27.00±9.72和109.67±23.44,均低于生理盐水组和错义组,而错义组与生理盐水组之间c-Fos蛋白表达水平差异无显著性意义。结论:神经肽Y2受体可能是通过调节c-fos基因的表达参与大鼠的记忆形成过程。

神经肽Y及其受体与某些老年病及作用机制的研究

高血压、冠心病、肺心病、支气管哮喘、慢性阻塞性肺病、糖尿病、老年性痴呆、帕金森氏病、老年抑郁症与焦虑症、骨质疏松、肿瘤等均是老年人较为常见的疾病，它们直接或间接地威胁甚至危害着老年人的健康和生命。然而，大量基础医学和临床研究发现，神经肽Y及其受体在机体的分布、含量、合成、分泌及表达水平和调控功能等，不仅有可能介导或影响着这些老年性疾病的发生、发展、加重或预后，而且还有可能与治疗这些疾病的生物学效应、作用靶点、用药途径及治疗对策等密切相关。因此，本文就神经肽Y及其受体与这些老年病之间的关系及其作用机制方面的研究进展作一综述，为今后探索以神经肽Y及其受体为靶点的有效治疗方式奠定基础，也为老年医学的科学研究和临床防治提供一些理论和实验依据。

神经肽Y及其受体的生物信息学和医学生理学的研究

神经肽Y(NPY)作为一种具有高度生物活性的神经递质及调节肽能与其G蛋白偶联受体家族(Y1R、Y2R、Y3R、Y4R、Y5R、Y6R)进行特异性结合,且NPY受体作为NPY作用的特定靶点在特定条件下均能被完整的NPY分子激活并通过细胞信号传导广泛参与机体生理功能的调节,使之在临床老年相关性疾病发生和发展过程中发挥重要的调控作用。而NPY及其受体的特异性结合和有效调控之所以能对机体多种生理作用及代谢功能发挥重要影响,与它们各自的生物信息学特性(包括理化性、疏水性、跨膜性、信号肽、二级结构、三级结构等)密切相关。因此,本文从生物信息学及医学生理学两个角度对NPY及其受体进行综述,为NPY及其受体今后在老年医学应用和研究中奠定理论基础。

WKY大鼠与SHR血管平滑肌神经肽Y受体数量及其亲和力的对照研究

目的：了解Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏ大鼠（Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏｒａｔｓ，ＷＫＹ）、自发性高血压大鼠（Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ，ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（Ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ，ＶＳＭＣ）上神经肽Ｙ（ＮｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ，ＮＰＹ）受体的表达水平及其差异。方法：应用Ｉｏｄｏｇｅｎ法对ＮＰＹ受体进行了测定。结果：ＮＰＹ蛋白质标记率为７０％，比活度为３．３６ＭＢｑ／μｇＶＳＭＣ在（１．０～５．０）×１０６细胞／ｍｌ的范围内，１２５Ｉ－ＮＰＹ的特异性结合量与ＶＳＭＣ细胞数之间呈线性关系；ＳＨＲ的ＮＰＹ受体最大结合量（Ｂｍａｘ）和受体复合物解离常数（Ｋｄ）均明显高于ＷＫＹ，相关分析显示Ｂｍａｘ，Ｋｄ与血压增高程度呈正相关。

神经肽Y受体亚型在压力超负荷大鼠心肌中的动态表达

目的观察神经肽Y受体亚型Y_1、Y_2、Y_5在压力超负荷大鼠心肌中的动态表达变化。方法手术组采用腹主动脉部分缩窄法建立压力超负荷的动物模型,对照组为假手术组,每组6只老鼠,每组再分2、7、14 d三个时间点动态观察Wistar大鼠。无创鼠尾测血压;测全心质量/体质量的比值;苏木素伊红(HE)染色测心肌细胞横截面积;实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,QTPCR)法检测Y_1、Y_2、Y_5m RNA表达;采用蛋白印迹法检测Y_1、Y_2、Y_5受体蛋白含量。结果手术组术后2、7、14 d血压进行性升高,与对照组各时间点比较,收缩压显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);手术组全心质量/体质量的比值于术后14 d升高,心肌细胞横截面积的变化与全心质量/体质量的比值一致。手术组心肌Y_1、Y_2及Y_5 mRNA和蛋白的表达一致,与各时间点对照组比较,术后2、7 d心肌Y_1、Y_2及Y_5 mRNA和蛋白的表达上调,至14 d下降。结论压力超负荷模型建立成功,手术组术后2、7 d处于压力超负荷早期阶段,14 d进入压力超负荷心肌肥大代偿阶段;神经肽Y受体亚型Y_1、Y_2和Y_5在压力超负荷大鼠心肌中的表达呈动态过程,在早期上调,心肌肥大的代偿期下降。

用于老年基础医学研究与临床辅助诊断的神经肽Y及其受体Y1-6检测方法的初步设想

神经肽Y（NPY）作为机体内一种主要的神经递质和能量调控因子，广泛参与机体各种生理功能的调节，是维持机体内环境稳态的重要物质之一。随着对其研究的不断深入，人们发现它可通过与特定靶细胞膜上不同NPY受体Y1-6的特异性结合而启动并激活相应细胞信号传导通路，从而参与对机体生理功能和靶细胞增殖分化的调控，且NPY及其受体在体内的表达水平又可影响机体的正常生理功能、细胞代谢活动、以及这种改变所诱导或促进或参与的某些老年性疾病的发生、发展及转归，并对相关药物的防治带来明显影响。因此，对NPY及其受体含量的检测项目已成为相关老年性疾病与合并症的发病机制分析、疾病进程观察、治疗效果评价、疾病痊愈判断及预后跟踪随访的重要辅助诊断指标之一。为此，本文通过对可用于老年基础医学研究与临床辅助诊断的NPY及其受体检测的酶联免疫吸附法、放射免疫测定法、荧光免疫检测法、化学发光免疫分析法、免疫组织化学法、压电石英晶片免疫传感器法、免疫印迹法、斑点免疫层析及胶体金法、受体放射配基结合分析法、放射自显影法、液体芯片技术、微粒子酶免分析法等进行NPY及其受体检测方法的综述，并提出前瞻性设想和设计，希望这些用于检测NPY及其受体指标的方法能为未来老年医学的研究和临床应用奠定基础。

神经肽Y受体2基因多态性对苯那普利降压疗效的影响

目的探讨神经肽Y受体2(neuropeptide Yreceptor2,NPY2R)基因多态性对苯那普利降压疗效的影响。方法选取中国安徽某两地区共422名原发性高血压患者,服用苯那普利,每日10mg,追踪观察16d。分析苯那普利的降压疗效和NPY2R基因多态性的关系。结果①苯那普利13d治疗后NPY2R Ile312Ile(T/C)突变组人群的舒张压下降要高于野生型组人群(校正前β±SE:2.28±1.07mmHg,P=0.0338,校正后β±SE:2.72±0.98mmHg,P=0.0056);②经过16d的治疗后突变组人群的舒张压下降要高于野生型组人群(校正前β±SE:2.07±1.29mmHg,P=0.1092,校正后β±SE:2.48±1.20mmHg,P=0.0386);③NPY2R两种基因型人群的舒张压的下降值在治疗过程的前13d基本一致,但此后两种基因型的舒张压降压疗效出现差异,突变组血压下降值高于野生型。结论原发性高血压人群经过苯那普利13d治疗后,NPY2R基因多态性和舒张压的降压疗效相关,其突变型(TC+CC)的降压疗效比野生型(TT)好,且基因型间存在药物时效性差异。

盆腔脏器脱垂患者主韧带和宫骶韧带组织中神经肽Y、神经肽Y受体的表达变化及意义

目的探讨神经肽Y及其受体在盆腔脏器脱垂患者主韧带和宫骶韧带组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法盆腔脏器脱垂患者50例,按盆腔脏器脱垂定量评估体系(POP-Q)对盆腔脏器脱垂分度:Ⅰ度6例,Ⅱ度20例,Ⅲ度14例,Ⅳ度10例。将Ⅰ、Ⅱ度作为脱垂1组,Ⅲ、Ⅳ度作为脱垂2组。同期选择宫颈癌患者30例作为对照组,均无盆腔脏器脱垂。均于术中切除主韧带和宫骶韧带组织标本。采用免疫组化法检测组织标本中神经肽Y蛋白的表达,RT-PCR法检测Y1受体、Y2受体mRNA的表达。结果脱垂1、2组主韧带与宫骶韧带组织中神经肽Y蛋白阳性表达率低于对照组(χ2主韧带分别为4.710、26.087,χ2宫骶韧带分别为7.012、21.941,P均<0.05),脱垂2组低于脱垂1组(χ2主韧带=5.984,χ2宫骶韧带=7.232,P<0.05)。脱垂1组主韧带、宫骶韧带组织中Y1受体mRNA表达与对照组比较,P均>0.05;脱垂2组主韧带、宫骶韧带组织中Y1受体mRNA表达高于对照组(P均<0.05);脱垂2组主韧带组织中Y1受体mRNA表达高于脱垂1组(P<0.05)。脱垂1、2组宫骶韧带组织中Y2受体mRNA表达比较,P>0.05。脱垂1、2组主韧带与宫骶韧带组织中Y2受体mRNA表达有升高趋势,但与对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05),脱垂1、2组之间比较,P>0.05。同组主韧带与宫骶韧带组织中Y1受体、Y2受体mRNA表达比较,P均>0.05。主韧带组织中Y1受体mRNA表达与Y2受体mRNA表达呈正相关(r=0.479,P<0.05),宫骶韧带组织中Y1受体mRNA表达与Y2受体mRNA表达无相关性(r=0.173,P>0.05)。结论盆腔脏器脱垂患者主韧带和宫骶韧带组织中神经肽Y呈低表达,其Y1受体呈高表达,主韧带组织中Y1与Y2受体mRNA表达呈正相关;神经肽Y及其受体的表达变化与盆腔脏器脱垂程度有关。

神经肽 Y 受体放射配体分析法建立

^(125)Ⅰ标记神经肽 r(NPY)做为放射配体,建立了 PY 受体放射配体平衡结合分析法。差速离心制备组织膜粗制品,膜浓度在0.02～0.2mg/ml 范围内与^(125)Ⅰ-NPY 特异结合成正比.平衡结合反应在37℃水浴条件下50分钟达平衡,最适 NpH 范围为7.0～7.4。离心法分离游离^(125)Ⅰ—INY,非特异吸附小于10%.竞争抑制试验证明^(125)Ⅰ—NPY 与膜受体结合特异性良好,非标记 NPY 的 IC50为0.44nmol/L。NPY 膜受体对胰蛋白酶和巯基抑制剂十分敏感。饱和实验及 Scatchard 作图分析表明小鼠大脑皮质 NPY 受体 Bmax=0.40～0.50pmol/mg 蛋白、kd=0.30～0.

神经肽Y及其受体对骨代谢调节的研究进展

神经肽Y在哺乳动物中分布广泛,它参与调节机体多种重要的生理活动,尤其对骨代谢的调节作用较为显著。神经肽Y作为神经系统调节骨代谢的调控递质,通过与其分布在成骨细胞及破骨细胞表面的不同受体,尤其是Y1、Y2受体特异性结合,影响骨形成速率和骨量形成,进而影响骨折愈合。目前人们对于神经肽Y对骨代谢的研究结论主要有两个方面:骨折发生时,断端神经肽Y增多,加速骨痂形成;限制性过表达神经肽Y可引起骨量减少或不影响骨量变化。骨折延期愈合和骨不连是骨折常见的并发症,是当前临床面临的难题之一,因而明确神经肽Y对骨代谢的调节作用是未来研究的方向。

草鱼神经肽Y受体对神经肽Y的响应机制及信号通路探究

为探究草鱼(Ctenopharyngodon idellus)神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)与神经肽Y受体(NPY receptor,YR)的相互作用及信号传递机制,对草鱼YR的基因结构、组织表达和细胞信号传导途径进行分析。结果显示,在草鱼基因组中获取了7个YR基因的序列,分别为Y1R、Y2R、Y2-2R、Y4R、Y7R、Y8Ra和Y8Rb。对草鱼YR进行同源性分析,发现7个YR编码的氨基酸序列在硬骨鱼类中高度保守。组织表达结果显示,草鱼YR主要在中枢组织表达,但也可以位于外周组织,包括眼睛、鳃和肠道。NPY可以激活人胚胎肾细胞(HEK293t)中Y2R、Y4R和Y8Rb的表达,Y2R与cAMP/PKA信号通路偶联;Y4R与MAPK/ERK信号通路偶联;而Y8Rb可激活cAMP/PKA和MAPK/ERK 2条信号通路。脑室注射NPY可引起Y1R、Y2R、Y4R和Y8Rb表达量显著升高。研究结果表明,草鱼Y2R、Y4R和Y8Rb具有功能性,能够有效传递信号,NPY的作用很可能由这些受体介导。

神经肽Y(NPY)的生理功能研究进展

神经肽Y(NPY)是机体内的一种重要且保守的神经递质,一般以前体形式存在,释放的有活性的NPY主要通过与其受体结合发挥作用。NPY受体包含了亚型Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8。Y1和Y2是NPY发挥收缩血管作用的关键受体;Y1、Y2和Y5是NPY调节动物摄食行为的关键受体;Y1、Y2和Y4是NPY调控动物焦虑、沮丧行为的必要受体。着重对NPY与其各种受体结合后如何行使动物的相关生理功能的情况进行了阐述。

双侧海马注射神经肽Y3-36对大鼠学习记忆的影响

目的 探讨神经肽YY2 (NPYY2 )受体调节大鼠学习记忆的可能机制。方法 建立学习记忆障碍模型 ,双侧海马插管注射Y2特异性激动剂NPY 3 36 ,观察其对大鼠学习记忆的影响 ,并利用免疫组化方法 ,检测与学习记忆密切相关的即刻早期基因c -fos表达情况。结果 1.注射NPY3 36组大鼠训练期的错误次数较对照组无显著性差别 (P >0 .0 5 ) ,而记忆测试期的潜伏期较对照组显著延长 ,错误次数显著减少 (P <0 .0 5 )。 2 .注射NPY 3 36组大鼠双侧背海马各区c -fos阳性细胞数与生理盐水组比较明显增加。结论 NPY通过Y2受体能促进大鼠的记忆能力 ,并可能通过促进c

神经肽Y在能量代谢中的研究进展

神经肽Y是机体内一种重要的保守性生物活性肽,广泛分布于全身各处,在中枢和外周神经系统中含量最丰富。该文在介绍神经肽Y的结构、受体、合成、分布和功能的基础上,着重阐述了神经肽Y在能量代谢中所起的重要调节作用。神经肽Y通过与其受体结合发挥多种生物学效应,通过增强摄食行为和使棕脂肪组织产热减少调节能量代谢,从而导致腹部肥胖和代谢综合征。

鱼类神经肽Y基因及其食欲调控机理研究

下丘脑的神经肽Y(NeuropeptideY,NPY)是1982年首次从猪脑中分离出来的一种含36个氨基酸的单链多肽,属胰多肽家族。NPY是促进脊椎动物采食量的一个最强有力的诱导因子,所研究过的脊椎动物各物种的NPY存在高度同源性。与哺乳动物相似,鱼类NPY的结合区域也主要位于食欲调节区域。NPY在鱼类摄食活动中也被证实发挥了重要的食欲促进作用。3种鱼类NPY受体在斑马鱼中被成功克隆,为鱼类NPY受体功能及其作用机理研究奠定了基础。

神经肽Y在杏仁中央核内对禁食大鼠摄食的调节方式

目的:观察神经肽Y(NPY)在杏仁中央核(CeA)内对禁食大鼠摄食的调节方式,并探讨其可能的作用机制。方法:选择雄性SD大鼠34只,将其中10只大鼠随机分为正常摄食组与禁食24h组,每组5只,取大鼠脑组织,应用免疫组织化学方法检测大鼠CeA内NPY及其Y1受体的表达;剩余24只大鼠行CeA内套管植入术,术后12只大鼠随机分为2组,1组CeA内注射NPY,另1组CeA内注射生理盐水(对照1组),1、2及4h后分别观察大鼠摄食量;另12只术后大鼠随机分为2组,1组CeA内注射Y1受体阻断剂,另1组CeA内注射生理盐水(对照2组),1、2及4h后分别观察大鼠摄食量。结果:与正常摄食组比较,禁食24h组大鼠CeA内NPY表达显著增多(P<0.05),其Y1受体表达显著减少(P<0.05);与对照1组比较,大鼠CeA内注射NPY后1h内摄食量明显增加(P<0.05);与对照2组比较,大鼠CeA内注射NPY的Y1受体阻断剂后1h内摄食量明显减少(P<0.05)。结论:NPY在CeA内对禁食大鼠的摄食具有促进作用,其机制可能是通过Y1受体调节。