光动力疗法治疗神经胶质瘤的研究进展

神经胶质瘤因其恶性程度及复发率较高,已逐渐成为影响人类健康的主要因素。目前针对神经胶质瘤的手术、化、放疗等治疗手段都存在局限性。近年来,光动力疗法(PDT)在治疗恶性肿瘤方面受到极大关注并已取得显著进步。本文介绍了PDT单独疗法、PDT联合其他疗法应用于神经胶质瘤的治疗现状,提出将PDT开发成为神经胶质瘤患者的一种新的安全有效的辅助治疗方式。

声动力疗法联合高热疗法诱导胶质瘤细胞凋亡

目的探讨声动力疗法(sonodynamic therapy,SDT)联合高热疗法(hyperthermotherapy,HT)的抗胶质瘤作用及可能机制。方法体外培养胶质瘤细胞株SNB19、U87MG,分为对照组、HT组、SDT组与SDT+HT组。应用阿尔玛蓝实验评估肿瘤细胞增殖能力,流式细胞术分析细胞凋亡率、线粒体膜电位和细胞内活性氧生成,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白表达情况。结果与SDT组比较,SDT+HT组抑制胶质瘤细胞增殖,与5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)浓度、超声照射时间和HT温度呈正相关(均P<0.05),并伴随细胞活力下降的典型形态学变化。较低剂量HT(42℃作用15min)可明显促进SDT介导细胞内活性氧生成增多,线粒体膜电位水平下降和细胞凋亡增加(均P<0.05)。与对照组、HT组、SDT组比较,SDT+HT组上调cleaved caspase-3、-8、-9和Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达(均P<0.05)。结论HT能够显著促进5-ALA-SDT抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,进而抑制胶质瘤生长。SDT联合HT疗法是一个颇具潜力的胶质瘤治疗方法。

微生物组及其代谢物调控神经胶质瘤的研究进展

神经胶质瘤是最常见的脑肿瘤,占恶性脑肿瘤的80%,其中多形性胶质母细胞瘤是最具侵袭性的神经胶质瘤类型,是全球难治性肿瘤之一。目前胶质母细胞瘤的主要治疗手段是手术,而手术不良反应大,易复发,且生存率不高。因此寻求更多潜在生物标志物,提高生存率仍是神经胶质瘤研究的重要挑战。越来越多的证据表明,瘤内微生物组及肠道微生物组对神经胶质瘤的进展和治疗有重要影响,且特定微生物群与肿瘤进展的不同阶段有关。与此同时,微生物代谢物与中枢神经系统之间的相互作用及机制受到广泛关注。然而,微生物组、代谢物与神经胶质瘤之间的相关性仍不明确。本文综述了目前与神经胶质瘤相关微生物组的研究进展,重点介绍了瘤内微生物组、肠道微生物组及其代谢物,如氨基酸(包括色氨酸、精氨酸、谷氨酸)、短链脂肪酸、神经递质类物质等,与神经胶质瘤之间的关系。并简要概述了益生菌对神经胶质瘤的改善作用。本综述为基于微生物组提早预测及治疗神经胶质瘤提供相关依据。

RhoA在神经胶质瘤发病中的作用及机制研究进展

神经胶质瘤是神经系统中最常见的中枢神经系统肿瘤,其发病机制不明,缺乏有效治疗药物,患者预后较差。研究发现,RhoA是一个重要的细胞信号传导分子开关,在调控神经胶质瘤细胞增殖、转化、黏附、迁移、侵袭等方面发挥重要功能。同时RhoA所涉及的信号分子通路及其产生的效应错综复杂,全面认识RhoA参与神经胶质瘤发生、发展的作用具有重要意义。该文将对RhoA蛋白在胶质瘤发病中的作用及机制进行综述,旨在为认识神经胶质瘤发病机制、开发靶向药物提供帮助。

多学科协作式延续性干预对老年神经胶质瘤患者术后并发症及生活质量的影响

目的探讨多学科协作(MDT)式延续性干预对老年神经胶质瘤患者术后并发症及生活质量的影响。方法将106例老年神经胶质瘤患者根据干预方式的不同分为干预组(56例)和对照组(50例)。对照组患者接受常规术后干预,干预组患者接受MDT式延续性干预。比较两组患者的生活质量[日常生活活动量表(ADL)]、神经功能[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和简易精神状态量表(MMSE)]、神经肽[β-内啡肽(β-EP)、神经降压素(NT)和精氨酸升压素(AVP)]水平及术后并发症发生情况。结果干预后1个月,两组患者身体机能、心理状况、社会能力和整体生活质量评分均较干预前升高,且干预组患者身体机能、心理状况、社会能力和整体生活质量评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。干预后1个月,两组患者NIHSS评分均较干预前降低,MMSE评分均较干预前升高,且干预组患者NIHSS评分低于对照组,MMSE评分高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。干预后,两组患者β-EP、NT、AVP水平均较干预前升高,且干预组患者β-EP、NT、AVP水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。干预组患者术后并发症总发生率低于对照组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论MDT式延续性干预能够显著减少老年神经胶质瘤患者的术后并发症,提高生活质量,减轻炎症反应,促进神经功能恢复。

脑脊液β-EP,3-NT水平与脑胶质瘤患者术后神经损伤程度及预后的关系研究

目的研究脑脊液β-内啡肽(β-EP)、3-硝基酪氨酸(3-NT)水平与脑胶质瘤患者术后神经损伤程度及预后的关系。方法选择脑胶质瘤76例患者作为观察组,选择同期采集脑脊液标本非脑胶质瘤且无神经损伤的76例受试者作为对照组,检测两组脑脊液β-EP、3-NT水平,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估观察组患者神经损伤程度,并比较两组脑脊液β-EP、3-NT水平的差异,研究各因子与脑胶质瘤患者术后脑神经损伤程度及预后的关系。结果观察组患者脑脊液β-EP、3-NT水平均较对照组高(P<0.05);中度、重度脑胶质瘤患者脑脊液β-EP、3-NT水平较轻度高(P<0.05),重度脑胶质瘤患者脑脊液β-EP、3-NT水平较中度高(P<0.05);脑脊液β-EP、3-NT水平与脑胶质瘤患者神经损伤程度呈正相关(P<0.05),脑脊液β-EP表达与3-NT表达呈正相关(P<0.05);当脑脊液β-EP的截断值>42.03 ng/L时,其Youden指数为0.586,曲线下面积(AUC)为0.746,预测脑胶质瘤预后敏感度为66.67%,特异度为91.94%;当脑脊液3-NT的截断值>8.93μg/L时,其Youden指数为0.459,AUC为0.753,预测脑胶质瘤预后敏感度为55.56%,特异度为90.32%。结论脑胶质瘤患者脑脊液β-EP、3-NT水平随着神经损伤程度的加重而上升,且是造成不良预后的原因,有望作为评估脑胶质瘤进展的有效生物学标志物。

针灸辅助高频重复经颅磁刺激对胶质瘤术后运动及神经功能恢复的影响研究

目的观察针灸联合物理疗法对脑胶质瘤术后运动及神经功能恢复情况的影响。方法本研究为前瞻性研究,选取南阳医学高等专科学校第一附属医院2022年1月至2023年2月收治的脑胶质瘤患者100例,按照计算机随机分组法,将入组患者分别列为物理组和联合组各50例,物理组实施高频重复经颅磁刺激(rTMS)治疗,联合组采用针灸辅助rTMS治疗,比较两组患者的神经功能、肢体运动功能、认知功能及预后情况。结果联合组的热休克蛋白70(HSP70)(2.85±0.36)pg/mL高于物理组(2.12±0.41)pg/mL;和肽素、中枢神经特异性蛋白β(S100β)分别为(1.58±0.31)pmol/L、(0.34±0.16)ng/mL,均低于物理组(2.21±0.78)pmol/L、(0.61±0.29)ng/mL;联合组的Fugl-Meyer运动功能评定量表(FMA)上肢、下肢功能评分分别为(55.25±10.31)分、(28.47±5.26)分,均高于物理组(50.32±10.44)分、(25.39±5.31)分;联合组的简易精神状态量表(MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分分别为(27.36±5.22)分、(27.48±5.31)分,均高于常规组(24.33±5.23)分、(24.49±5.36)分;联合组的不良预后发生率6.00%(3/50)低于物理组24.00%(12/50),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论针灸辅助rTMS可有效改善脑胶质瘤患者的肢体运动功能,对修复其神经功能,促进认知功能恢复,并改善预后均有积极影响。

立体定向微创手术对脑胶质瘤患者神经功能的影响

目的探讨立体定向微创手术对脑胶质瘤患者神经功能的影响。方法将100例脑胶质瘤患者根据治疗方法的不同分为传统组和微创组,每组50例,传统组行传统开颅肿瘤切除术,微创组行立体定向微创手术。比较两组患者的手术指标、临床疗效、神经肽水平、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、日常生活能力(ADL)评分以及术后并发症发生情况。结果微创组患者手术时间、住院时间均短于传统组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。微创组患者的总有效率为80.00%,高于传统组患者的62.00%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。术后1年,两组患者的精氨酸升压素、β-内啡肽水平均低于本组术前,但微创组患者的精氨酸升压素、β-内啡肽水平均高于传统组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。术后3个月,两组患者的NIHSS评分均低于本组术前,且微创组患者的NIHSS评分低于传统组,两组患者的GCS、ADL评分均高于本组术前,且微创组患者的GCS、ADL评分均高于传统组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。微创组患者的并发症总发生率为8.00%,低于传统组患者的24.00%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论立体定向微创手术应用于脑胶质瘤患者的治疗中,可缩短手术时间与住院时间,提高临床疗效,减轻对患者神经系统的损伤,改善神经缺损状况,从而有助于提高患者的日常生活能力,降低并发症发生率。

ATP1B3在神经胶质瘤中表达及其对细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨ATP1B3在神经胶质瘤细胞(U87MG)中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响。方法:利用在线数据库CGGA及TCGA分析ATP1B3在不同级别神经胶质瘤细胞中差异表达,及其与患者生存、预后的关系;利用siRNA干扰技术瞬时敲减神经胶质瘤细胞系U87MG中ATP1B3的表达水平,通过RT-qPCR和western blot方法检测敲减效率;用CCK-8、transwell实验检测敲减ATP1B3后神经胶质瘤细胞增殖及迁移能力变化;western blot实验检测敲减ATP1B3后P-MTOR、MTOR蛋白的表达变化。结果:数据库分析表明ATP1B3的表达量与恶神经胶质瘤恶性程度成正相关,且与患者的预后生存成负相关。敲减ATP1B3后其mRNA和蛋白表达水平后明显降低,敲减组细胞增殖及迁移能力显著低于对照组(P<0.01);敲减ATP1B3影响P-MTOR的表达水平,P-MTOR/MTOR比值降低。结论:ATP1B3高表达与胶质瘤恶性程度相关且不利于患者的生存预后。在神经胶质瘤细胞内ATP1B3可调控MTOR细胞增殖生长信号通路,敲减ATP1B3基因能有效抑制神经胶质瘤细胞的增殖和迁移,因此ATP1B3基因可能是一个潜在神经肿瘤标志物和治疗的分子靶点。

MRI用于胶质瘤神经重塑的研究进展

胶质瘤是成人最常见的恶性脑肿瘤,复发率高且预后极差。神经重塑是大脑在胶质瘤生长中发生的复杂而精密的适应性反应,深入理解大脑的神经重塑对于改善胶质瘤病人生活质量,延长病人生存期具有重要意义。利用高分辨三维T1加权成像(3D T1WI)、扩散张量成像(DTI)及血氧水平依赖功能MRI(BOLD-fMRI)等技术,同时结合先进的影像分析方法可以探索胶质瘤病人结构和功能方面的可塑性及其相关机制。就不同MRI技术对胶质瘤病人结构和功能重塑的研究进行综述,并展望未来的研究方向。

脑脊液联合血常规检测在多发性脑胶质瘤与原发性中枢神经系统淋巴瘤鉴别诊断中的临床价值

目的探讨脑脊液(CSF)和血常规多项指标联合检测对多发性脑胶质瘤(MCG)与原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)鉴别诊断的临床价值。方法回顾性分析首都医科大学附属天坛医院2017年11月至2023年3月收治的62例MCG患者和56例PCNSL患者临床资料、CSF及血常规检测指标,并分析有意义指标单独及联合应用鉴别诊断MCG与PCNSL的临床价值。结果MCG组CSF细胞总数、CSF白细胞数、CSF蛋白(CSF:pro)、乳酸、血常规中性粒细胞计数、中性粒细胞%水平显著高于PCNSL组(P<0.05);PCNSL组CSF糖(CSF:Glu)、CSF氯(CSF:cl)、血常规淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞%、嗜酸性粒细胞%水平显著高于MCG组(P<0.05)。CSF细胞总数、CSF白细胞、CSF:pro、乳酸、血常规中性粒细胞计数、中性粒细胞%鉴别诊断MCG和PCNSL的AUC为:0.900、0.899、0.797、0.867、0.828、0.772;灵敏度为:72.4%、77.6%、63.8%、67.2%、72.4%、82.8%;特异度为:97.1%、100.0%、88.2%、91.2%、88.2%、64.7%。此外,CSF细胞总数、CSF白细胞、CSF:pro、血常规中性粒细胞计数和中性粒细胞%指标联合检测鉴别诊断MCG和PCNSL的AUC为0.919,敏感度和特异度为77.6%和100.0%。结论脑脊液学指标CSF细胞总数、CSF白细胞、CSF:pro及血常规指标中性粒细胞计数和中性粒细胞%联合检测鉴别诊断MCG和PCNSL具有较高的临床应用价值。

神经突方向离散度和密度成像预测成人型弥漫性胶质瘤IDH基因型的应用

目的运用神经突方向离散度与密度成像(neurite orientation dispersion and density imaging,NODDI)定量参数评估不同异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)基因状态肿瘤的差异性及探讨NODDI在成人型弥漫性胶质瘤(adult-type diffuse glioma,ADG)基因分型上的临床应用价值。材料与方法回顾性分析了51例(IDH突变型21例,IDH野生型30例)ADG患者。术前均行常规扫描以及多壳扩散扫描,经图像预处理和后处理后得到四个定量参数图。使用3D-Slicer软件对肿瘤实性区域、瘤周水肿区域及对侧正常脑白质区进行感兴趣区勾画,比较不同IDH状态的组间差异。使用FeAture Explorer(FAE)软件构建预测模型,在模型的开发过程中考虑了多条流水线组合,包括1种数据降维方法(皮尔森相关系数),4种特征选择方法(多变量方差分析、克鲁斯卡尔-沃利斯检验、递归特征消除和Relief算法)和4种线性分类器(支持向量机、线性判别分析、逻辑回归和引入LASSO正则项的逻辑回归),共16个流水线。模型之间的比较通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,综合判别改变指数(integrated discrimination improvement,IDI)、净重分类改善指数(net reclssification improvement,NRI)和留一法交叉验证进行评估。结果IDH野生型组年龄高于IDH突变型组(P=0.001)。只有IDH野生型组的瘤周水肿区方向离散指数(orientation dispersion index,ODI)值低于IDH突变型组(P=0.019),其余参数组间未见差异。对侧白质区和水肿区分别具有最高和最低的ICVF(intra-cellular volume fraction,ICVF)值(P<0.05)。通过线性判别分析构建的综合模型诊断效能最高,ROC曲线下面积为0.835(95%CI:0.703~0.941);高于单独使用年龄[0.773(95%CI:0.624~0.894)]和ODI[0.695(95%CI:0.538~0.845)]。IDI以及NRI证明了最终模型最高的诊断性能(所有P值均小于0.001)。决策曲线分析和校准曲线证明了最终模型的临床净收益和最接近真实数据的分布(Brier分数为0.163)。结论NODDI定量参数可以用来描述ADG的微观环境差异。建立的最终模型可以有效预测成人型弥漫性胶质瘤不同IDH基因状态,且复合模型比单一模型的诊断效能更好。

CYB561D2基因在神经胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的基于生物信息学分析,检测CYB561D2基因对于神经胶质瘤的患者的预后评估和意义。方法选取2018年10月―2022年12月安庆市立医院神经外科接受手术治疗的神经胶质瘤患者的手术病理标本,共78例进行研究。手术路径过程中必须切除的正常脑组织作为对照组,共32例。采用荧光实时定量PCR和免疫组化分别对实验组与对照组的CYB561D2基因mRNA和蛋白浓度进行检测。结果实验组患者的肿瘤组织中CYB561D2基因的表达程度均较高,肿瘤组织病理级别越高,具有越显著的表达,而对照组中并无明显的CYB561D2基因mRNA(χ2=2.75)和蛋白表达(χ2=2.19),P<0.05,有统计学差异。结论神经胶质瘤中CYB561D2基因mRNA和蛋白表达明显增高,提示CYB561D2与神经胶质瘤的发生、发展及恶性程度有一定相关。

基于T_(1)WI增强不同机器学习模型鉴别胶质母细胞瘤与原发性中枢神经系统淋巴瘤

目的:基于T_(1)WI增强图像采用六种不同机器学习分类算法构建预测胶质母细胞瘤(GBM)与原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)的模型,比较不同机器学习模型的诊断效能。方法:回顾性分析中南大学湘雅医院经病理证实的GBM 57例和PCNSL 49例患者的临床及影像资料。应用ITK-SNAP软件在术前T1WI增强图像手动逐层勾画瘤体感兴趣区(ROI)。基于慧医汇影放射组学Radcloud平台进行ROI影像组学特征提取并采用方差阈值法(阈值>0.9)、单变量特征选择法(P<0.01)和最小绝对收缩选择算子(LASSO)进行特征降维,筛选出的特征采用支持向量机、极致梯度提升、逻辑回归(LR)、线性判别分析(LDA)、随机森林、K近邻等6种分类器构建影像组学预测模型。使用5折交叉验证方法进行验证,采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评估6种预测模型的诊断效能,模型之间AUC比较采用DeLong检验。结果:共提取1 688个影像组学特征,经过特征降维及筛选后保留显著特征(5折交叉验证、每组分别25、10、31、17、14个特征)构建预测模型,6种模型中LDA、LR模型诊断效能最佳,在5折交叉验证集中LDA、LR模型平均AUC分别为0.965、0.958,准确度为87.8%、89.6%,敏感度为86.0%、86.0%,特异度为89.4%、93.0%。6种模型AUC差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:基于T_(1)WI增强图像影像组学特征构建机器学习模型可用于预测GBM与PCNSL且准确率较高,其中LDA、LR模型诊断效能最佳。

术中冰冻切片联合快速免疫组化在中枢神经系统淋巴瘤和高级别胶质瘤诊断中的价值

目的:探讨术中冰冻切片联合快速免疫组化(rapid immunohistochemistry,RD-IHC)诊断中枢神经系统淋巴瘤(central nervous system lymphomas,CNSL)和高级别胶质瘤(high-grade gliomas,HGG)的可行性及意义。方法:收集我院2019年01月至2023年12月CNSL术中标本18例,设为CNSL组;高级别胶质瘤24例,设为高级别胶质瘤组,使用术中冰冻切片HE染色和术中冰冻切片RD-IHC检测白细胞共同抗原(LCA)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在两种疾病中的表达,以石蜡切片免疫组化结果为金标准,对比术中冰冻切片HE染色和RD-IHC两种方法诊断CNSL和高级别胶质瘤的准确率。结果:术中冰冻切片RD-IHC和术中冰冻切片HE染色诊断CNSL正确率分别为100.00%、72.22%,差异有统计学意义(P=0.045)。术中冰冻切片RD-IHC结果显示LCA阳性及GFAP阴性表达率在CNSL组中显著高于高级别胶质瘤组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:术中冰冻切片RD-IHC诊断CNSL和高级别胶质瘤显著优于术中冰冻切片HE染色,LCA和GFAP联合可作为术中冰冻切片快速免疫组化指标来鉴别CNSL和高级别胶质瘤。

神经胶质瘤的免疫治疗

神经胶质瘤是人中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,肿瘤呈浸润性生长,难以彻底切除,且患者易出现放化疗耐药,复发率和病死率均较高,预后较差。近年来,免疫疗法的有效性在多种肿瘤中得到证实。目前,胶质母细胞瘤(GBM)的免疫疗法主要包括CAR-T细胞治疗、溶瘤病毒治疗、疫苗接种和免疫检查点抑制剂治疗等。这标志着新兴的免疫疗法在神经胶质瘤治疗领域取得了显著进步。但仍然存在一些问题限制了免疫疗法的进一步应用,如给药途径存在障碍等问题,同时,科研工作者们也给出了相应的对策,如免疫疗法与纳米生物相结合扩宽给药途径等。为此,本文就免疫疗法在神经胶质瘤中发挥的作用及其治疗效果的相关进展进行了介绍,并总结了当前免疫治疗存在的问题及解决对策,为临床治疗神经胶质瘤提供参考。

自噬调节电离辐射引起的神经胶质瘤细胞初级纤毛发生

探讨自噬与电离辐射诱导人神经胶质瘤细胞初级纤毛发生的关系。神经胶质瘤细胞M059K和M059J进行10GyX射线照射或血清饥饿处理,免疫荧光法检测纤毛标志物Arl13b及基体结构蛋白γ-tubulin指示初级纤毛并统计纤毛发生率,免疫荧光法检测自噬标志物LC3联合蛋白质免疫印迹法检测p62蛋白表达量评估细胞自噬水平,利用氯喹(CQ)或雷帕霉素(RAPA)抑制或激活自噬水平并检测对细胞纤毛发生的影响。结果显示:M059K细胞中具有纤毛的细胞比例约为40%,X射线照射处理后3d上升至75%以上(p<0.01),但M059J细胞中纤毛细胞的比例(约7%)在X射线处理后无明显变化,然而血清饥饿处理3 d时M059K和M059J中纤毛细胞的比例分别上升至约80%(p<0.01)和50%(p<0.01)。血清饥饿导致两种细胞的自噬水平均显著升高,但X射线照射仅引起M059K细胞自噬水平升高而对M059J细胞影响不明显。使用RAPA激活细胞自噬能够显著提高两种细胞中纤毛细胞的比例,而使用CQ抑制自噬能够降低X射线照射引起的M059K细胞纤毛发生或血清饥饿引起的M059J细胞纤毛发生。这些结果表明M059K和M059J细胞在X射线处理后自噬激活水平的差异可能是导致两种细胞在照射后纤毛发生情况不同的重要原因,提示自噬在电离辐射诱导神经胶质瘤细胞纤毛发生中发挥重要调节作用。

WDR82在神经胶质瘤发生发展中的作用及其机制

目的探讨WD重复结构域82(WDR82)蛋白在神经胶质瘤发生发展中的作用及其机制。方法利用GEPIA和UALCAN数据库分析WDR82在神经胶质瘤组织中的表达情况;采用Kaplan-Meier生存分析WDR82表达与神经胶质瘤患者预后的关系。采用组织芯片进行免疫组织化学染色检测WDR82在神经胶质瘤组织及其癌旁组织中的表达情况。取人胶质瘤A172和U251细胞,设置对照组(转染3μg pcDNA3)、p WDR82组(转染3μg pWDR82)、shR-Con组(转染3μg pSilencer2.1-U6)、shR-WDR82组(转染3μg shR-WDR82)。转染48 h后,采用q RT-PCR验证各组转染效率;CCK-8法检测转染48 h的细胞活性,克隆形成实验检测转染后14 d的细胞增殖能力,流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡情况;Western blotting检测转染48 h细胞中增殖相关蛋白及Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达。采用体内荷瘤实验检测WDR82对NOD-SCID小鼠肿瘤生长的影响。结果GEPIA和UALCAN数据库分析及免疫组织化学染色结果显示,WDR82在神经胶质瘤组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05),其表达在不同性别及年龄段患者间差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,高表达WDR82的神经胶质瘤患者的预后不良(log-rank P=0.029)。过表达WDR82可明显促进A172和U251细胞的增殖,抑制细胞凋亡,明显增高A172和U251细胞中MKI67、BCL2、CCND1、p-Akt和p-mTOR的表达(P<0.05)。反之,敲降WDR82则抑制A172和U251细胞的增殖,促进细胞凋亡,降低MKI67、BCL2、CCND1、p-Akt和p-mTOR的表达(P<0.05)。敲降U251细胞中的WDR82,可明显抑制荷瘤NOD-SCID小鼠肿瘤的生长(P<0.05)。结论高表达WDR82可能通过调控Akt/mTOR信号通路促进神经胶质瘤细胞的增殖及体内肿瘤的生长。

SOX9在神经胶质瘤中的作用研究进展

转录因子SOX9属于SOX家族中SOXE亚类,目前已有大量文献证实其表达与神经胶质瘤有关。神经胶质瘤是最常见的恶性脑肿瘤,而高级别胶质瘤患者的预后极差,因此研究神经胶质瘤发病机制同时寻找新的有效治疗靶点十分重要。SOX9转录因子通过多种信号通路调控下游靶标,影响神经胶质瘤的发生、进展、治疗和预后。SOX9的上调与神经胶质瘤的进展呈正相关,对胶质瘤预后不利,降低SOX9的表达在胶质瘤治疗中可能是有利的。同时多种microRNA通过下调SOX9的表达来间接影响胶质瘤的生长进程。现就SOX9的结构、功能及影响神经胶质瘤细胞表型的信号通路与机制进行综述,并展望未来临床上可能的治疗靶点。

AGPS在神经胶质瘤细胞中的相互作用蛋白及作用模式

目的探讨胶质瘤细胞(U251细胞)中癌基因烷基甘油酮磷酸合酶(AGPS)的相互作用蛋白及作用模式。方法常规培养U251细胞并随机分为对照组、shR-AGPS-1组、shR-AGPS-2组,分别加入阴性对照慢病毒和不同沉默水平的AGPS shRNA慢病毒,用Western blotting法检测AGPS蛋白表达以验证沉默效率。通过免疫共沉淀技术和质谱技术鉴定AGPS相互作用的蛋白,用Western blotting法进行验证;用计算机模拟技术进行相互作用蛋白的同源模建并推测二者相互作用模式。结果与对照组比较,shR-AGPS-1组、shR-AGPS-2组AGPS表达低(P均<0.05),且shR-AGPS-1组AGPS表达低于shR-AGPS-2组(P<0.05)。将筛选获得的数据进行整理,初步判断不均一核糖核蛋白K(HNRNPK)为AGPS的靶蛋白。在AGPS抗体免疫共沉淀的细胞裂解物中可同时检测到AGPS蛋白、HNRNPK蛋白,表明AGPS与HNRNPK可形成复合体,二者均在细胞核中表达。计算机模拟结果显示AGPS和HNRNPK通过氨基酸残基以氢键和共轭、疏水键和静电力形式相互作用。结论胶质瘤细胞中HNRNPK是AGPS的相互作用蛋白,氢键和共轭、疏水键和静电力相互作用可能是其主要的作用模式。