超高效液相色谱-串联质谱法检测乳清蛋白粉中神经节苷脂GD3

建立了超高效液相色谱-串联质谱快速测定乳清蛋白中双唾液酸神经节苷脂(GD3)的方法。通过试验优化样品的初次提取条件(提取剂比例及用量)和再萃取条件(萃取剂用量)。在样品充分溶解后,用4 mL三氯甲烷-甲醇溶液(V_(三氯甲烷)∶V_(甲醇溶液)=1∶2)提取1.0 mL样液,转移合并提取液,加入2.0 mL水进行萃取转移为最佳提取条件。然后分别对质谱与色谱条件(定量扫描模式、色谱柱以及流动相pH)进行优化,选取Syncronis HILIC硅胶色谱柱,以0.01 mol/L乙酸铵水溶液-乙腈(pH5.6)为流动相,进行色谱分离,色谱分离后采用母离子监测模式定量测定和多反应监测模式定性分析。在最佳优化分析条件下,双唾液酸神经节苷脂GD3质量浓度在0.5~50.0μg/mL内具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))>0.99,回收率在87.3%~103.7%,精密度(RSD)为4.16%~8.95%,检出限在0.1 g/kg。该方法可用于乳清蛋白粉中双唾液酸神经节苷脂GD3。

神经节苷脂GD3合酶缺失加重DSS诱导的小鼠炎症性肠病

目的:探讨神经节苷脂GD3合酶(GD3S)在DSS诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)中的作用。方法:采用7周龄C57BL/6和神经节苷脂GD3合酶缺陷(GD3S^(-/-))雄性小鼠建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠IBD模型,建模16 d检测GD3S缺失对IBD小鼠生存率的影响,建模7 d检测GD3S缺失对IBD严重程度的影响,期间每天记录小鼠体重变化以及便血情况。7 d后处死小鼠,解剖分离小鼠全结肠,测量结肠长度,苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠结肠病理损伤,TUNEL染色检测结肠组织细胞凋亡,ELISA检测血清以及结肠组织中炎性细胞因子表达情况。结果:GD3S^(-/-)DSS模型组与WT DSS组相比,其生存率显著降低,体重下降明显加快,血便早于WT DSS组;结肠长度也显著短于WT DSS组; HE染色显示GD3S^(-/-)DSS模型组结肠黏膜组织损伤较重,TUNEL染色显示GD3S^(-/-)DSS模型组凋亡细胞显著增加; GD3S^(-/-)DSS模型组血清以及结肠黏膜组织匀浆IL-6表达明显高于WT DSS。结论:GD3S缺失会加重DSS诱导的小鼠炎症性肠病。

联合应用阿霉素和神经节苷脂GD3抑制SMMC-7721肝癌细胞的生长

目的联合应用阿霉素和神经节苷脂GD3能否促进肝癌细胞的凋亡和抑制细胞的生长。方法使用MTT法比较GD3和阿霉素联合处理的与单独使用阿霉素的肝癌细胞生长曲线的差异。通过细胞凋亡ELISA法检测GD3和阿霉素联合处理的肝癌细胞凋亡状况。通过Western blot方法了解GD3和阿霉素联合处理肝癌细胞的胞浆蛋白中caspase 3酶的表达情况,并检测caspase 3的活性。结果与单独使用阿霉素的肝癌细胞比较,低浓度GD3预处理后的肝癌细胞使用阿霉素处理后凋亡显著增加,肝癌细胞的生长受到明显抑制。低浓度的GD3和阿霉素联合应用后导致肝癌细胞中caspase 3酶的表达增加,活性增强。结论神经节苷脂GD3增强阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的作用,抑制肝癌细胞的生长,从而增加了阿霉素的抗肝癌敏感性。

神经节苷脂GD2和GD3在黑素瘤治疗作用的研究进展

神经节苷脂是一种含唾液酸的鞘糖脂,由亲水的寡糖链和亲脂的神经酰胺两部分组成,在信号转导和细胞黏附中发挥重要作用。GD2和GD3是含有2个唾液酸而糖基数目不同的神经节苷脂,与许多肿瘤的发生、发展密切相关,如黑素瘤、胶质瘤等,并且它们作为功能分子参与肿瘤的增殖、侵袭、和转移等生物学特性。国内外各项研究的进展已证明其在黑素瘤靶向治疗和免疫治疗等方面也发挥重要作用。文章从GD2和GD3的生物学特性及其分别在黑素瘤免疫治疗和靶向治疗方面的作用予以综述。