自我控制失败的心理因素、神经表达及交互作用刍议

自我控制失败是研究自我控制的独特视角。系统回顾相关文献,可以发现:(1)自我控制失败可从自我控制资源、特质自我控制水平、消极情绪和线索激活等心理因素进行解释。(2)自我控制失败在大脑中表现为前扣带回皮层和前额叶皮层激活不足以及杏仁核过度激活。从交互作用视角来看,自我控制失败可从"状态与特质"、"意识与资源"以及"心理与神经"三个方面进行解释。未来的研究可进一步发掘影响自我控制失败的心理因素,探索自我控制及其干预的神经表达以及自我控制失败的发展规律。

HN1L、PLK1在食管胃交界腺癌中的表达及与肿瘤进展和患者预后的关系研究

目的探讨血液和神经表达1样蛋白(HN1L)、Polo样激酶1蛋白(PLK1)在食管胃交界腺癌(AEGJ)中的表达及其与肿瘤进展和患者预后的关系。方法回顾性收集2017年6月至2020年6月邯郸市第一医院手术切除的105例AEGJ组织及其距离肿瘤边缘5 cm处的癌旁组织。采用免疫组化法观察并比较癌组织和癌旁组织HN1L、PLK1表达评分,比较不同临床特征AEGJ患者癌组织HN1L、PLK1表达评分,采用Pearson相关分析两种蛋白表达评分的相关性,根据表达评分分组,生存分析采用Kaplan-Meier生存曲线,预后分析采用多因素Cox回归分析。结果癌组织中HN1L、PLK1表达评分均显著高于癌旁组织(均P<0.05)。相比于肿瘤-淋巴结-远处转移(TNM)分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移AEGJ患者,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移AEGJ患者癌组织HN1L、PLK1表达评分显著升高(均P<0.05)。癌组织HN1L表达评分与PLK1表达评分呈正相关(P<0.01)。AEGJ患者3年总生存率为43.8%。生存分析显示,HN1L高表达组患者和PLK1高表达组患者3年总生存率均显著低于HN1L低表达组和PLK1低表达组(均P<0.01)。多因素Cox回归分析显示,淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、HN1L和PLK1高表达是影响AEGJ患者预后的独立危险因素(均P<0.01)。结论AEGJ患者癌组织HN1L、PLK1表达与肿瘤恶性程度有关,可作为预测患者预后的潜在指标。

室外大场景神经辐射场综述

对室外大场景进行三维建模,不仅可以完成实时的城市建图和漫游,还能为自动驾驶等提供技术支持。近年来,神经隐式建模的发展十分迅速,神经辐射场(NeRF)的出现更是将神经隐式建模推上了新的高度。NeRF凭借高质量渲染和任意角度渲染的特点,已经在可控编辑、数字化人体、城市场景重建等领域得到了广泛的应用。NeRF通过深度学习的方法从二维图片及其位姿中学习隐式三维场景,生成新视角图像。然而原始NeRF只能在有界场景下得到逼真的结果,在对室外大场景进行建模时,往往会面临无界背景、模型容量、场景外观等问题。基于室外大场景中NeRF部署的多个角度改进和多样的NeRF变种,首先介绍NeRF的背景,然后从室外大场景的难点切入,对各个难点的解决方法进行分析和讨论,最后对室外大场景NeRF目前的进展进行总结并对未来进行展望。

压力性尿失禁患者阴道黏膜的神经表达

目的 探讨压力性尿失禁 (SUI)患者阴道黏膜神经组织学改变 ,分析神经表达与疾病发生的关系。方法 于手术中分别取SUI组患者 15例 (SUI组 )、盆腔器官脱垂患者 2 3例 (POP组 )、无SUI和POP的妇科良性疾病患者 15例 (对照组 )阴道前壁近尿道处黏膜。采用半定量免疫组化方法 ,观察阴道黏膜层的神经丝蛋白 (NF)表达。结果 阴道黏膜固有层中可见着色为棕色的神经纤维分布 ,依据表达阴性、弱阳性、阳性、强阳性的顺序 ,SUI组分别为 6、5、4、0例 ;POP组分别为 17、5、1、0例 ;对照组分别 3、2、4、6例。SUI组患者的阴道黏膜NF表达与对照组相比 ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ,NF的表达与尿失禁的程度 (r =- 0 15 0 )和腹部漏尿点压力 (LPP) (r =- 0 198)无明显相关性 (P >0 0 5 )。POP组NF表达也低于对照组。结论 SUI患者的阴道黏膜层神经分布低于对照组 ,可能是SUI的发病机制之一。

宫颈癌患者lncRNA HAND2-AS1表达及其对宫颈癌Caski细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的探讨宫颈癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)心脏和神经嵴衍生物表达转录本2反义序列1(HAND2-AS1)表达的临床意义,分析lncRNA HAND2-AS1对宫颈癌Caski细胞增殖、侵袭和迁移的影响机制。方法采用基因表达交互分析(GEPIA)数据库分析lncRNA HAND2-AS1在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达情况。选取2019年1月—2021年12月焦作市妇幼保健院宫颈癌患者48例(宫颈癌组)、宫颈上皮内瘤变(CIN)患者48例(CIN组)和健康体检者48名(正常对照组)。收集其中14例宫颈癌患者术后癌组织和癌旁组织(距癌组织边缘>2 cm)样本,同时收集所有研究对象血清样本和临床资料,检测lncRNA HAND2-AS1相对表达量。将宫颈癌细胞系Caski按转染质粒的不同分为过表达组(转染pcDNA3.1-HAND2-AS1)和阴性对照组(转染pcDNA3.1-NC)、干扰组(转染si-HAND2-AS1)和干扰对照组(转染si-NC)。采用CCK-8实验、Transwell实验和划痕实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力,采用免疫印迹法检测细胞内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达情况。结果GEPIA数据库分析结果显示,宫颈癌组织lncRNA HAND2-AS1表达显著低于正常宫颈上皮组织(P<0.05)。14例宫颈癌患者癌组织lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著低于癌旁组织(P=0.001)。宫颈癌组血清lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著低于CIN组和正常对照组(P<0.001),CIN组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。不同肿瘤大小、国际妇产科学联合会(FIGO)分期和有无淋巴转移的宫颈癌患者之间血清lncRNA HAND2-AS1相对表达量差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达组lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著高于阴性对照组(P<0.01),细胞增殖活性、侵袭细胞数、划痕愈合率和p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量均低于阴性对照组(P<0.05)。干扰组lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著低于干扰对照组(P<0.001),细胞增殖活性、侵袭细胞数、划痕愈合率和p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量均显著高于干扰对照组(P<0.05)。过表达组与阴性对照组之间、干扰组与干扰对照组之间PI3K和Akt蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论宫颈癌患者血清lncRNA HAND2-AS1呈低表达,且与病情严重程度有关。lncRNA HAND2-AS1可能通过调控PI3K/Akt信号通路影响宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

LncRNA HAND2-AS1在宫颈癌患者血清中的表达及临床意义

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)心脏和神经嵴衍生物表达转录本2反义序列1(HAND2-AS1)在宫颈癌患者血清中的表达及其临床意义。方法选取2019年1月至2020年6月焦作市妇幼保健院收治的50例宫颈癌患者作为宫颈癌组,并根据中位lncRNA HAND-AS1表达值分为lncRNA HAND-AS1高表达组和lncRNA HAND-AS1低表达组,每组25例;选取同期确诊的50例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者作为CIN组和50例健康体检者作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术和电化学发光法检测各组研究对象血清lncRNA HAND2-AS1表达水平,以及癌抗原125(CA125)和鳞状细胞癌相关抗原(SCC)水平,分析其与患者临床特征和预后的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA HAND2-AS1、CA125、SCC联合检测对宫颈癌的临床诊断效能。结果宫颈癌组患者血清LncRNA HAND2-AS1表达水平均明显低于CIN组和健康对照组,其表达水平与宫颈癌患者肿瘤长径、宫颈浸润深度、国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移明显相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。lncRNA HAND2-AS1单独诊断宫颈癌的ROC曲线下面积为0.861(95%可信区间0.792~0.930),HAND2-AS1、CA125、SCC联合诊断宫颈癌的ROC曲线下面积为0.912(95%可信区间0.908~0.952),诊断效能明显高于单指标检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。lncRNA HAND-AS1高表达组患者3年生存率明显高于lncRNA HAND-AS1低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA HAND2-AS1、CA125、SCC、FIGO分期、淋巴结转移与宫颈癌患者预后相关,差异均有统计学意义(P<0.05);FIGO分期、SCC是影响宫颈癌患者预后的独立危险因素,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LncRNA HAND2-AS1在宫颈癌患者血清中低表达,并与患者肿瘤长径、宫颈浸润深度、FIGO分期、淋巴结转移均明显相关;检测血清lncRNA HAND2-AS1对宫颈癌的诊断及预后评估具有一定价值。

不同条件下NOS阳性神经元在脊髓中央管周围灰质的表达

目的 探讨不同条件下一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)阳性神经元在脊髓中央管周围灰质的分布及数量变化 ,分析脊髓中央管周围灰质与针刺镇痛的关系。方法 应用NADPH d法 ,观察在正常情况下、疼痛刺激下、电针刺激下、疼痛加电针刺激下NOS阳性神经元在脊髓中央管周围灰质的表达。结果 正常情况下 ,脊髓中央管周围灰质有少量NOS阳性细胞 ;疼痛刺激后 ,NOS阳性细胞数目增多 (P <0 .0 1) ;单纯电针刺激下 ,NOS阳性细胞较正常组无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;疼痛刺激加电针刺激后 ,NOS阳性细胞数较疼痛刺激组明显减少 (P <0 .0 1) ,而与正常组相比无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 抑制疼痛刺激引起的NOS阳性细胞数目增多 。

不同时辰电针对大鼠脊神经节和脊髓内生长抑素mRNA阳性神经元表达的影响

目的:观察不同时辰电针对大鼠脊神经节和脊髓内生长抑素(SOM )mRNA阳性神经元表达的影响。方法:将2 0只SD大鼠随机分为电针组和对照组,每组又各分为4个时段。采用原位杂交组织化学方法,观察5时、1 1时、1 7时和2 3时2Hz电针大鼠一侧“环跳”穴后,脊神经节和脊髓内SOMmRNA阳性神经元表达。结果:电针大鼠一侧“环跳”穴后,1 1时电针组脊神经节和脊髓后角第Ⅰ、Ⅱ板层SOMmRNA表达增强(P <0 .0 5 )。结论:1 1时2Hz电针对大鼠脊髓和脊神经节内SOMmRNA阳性神经元的表达有上调作用。

MicroRNA-218靶向神经元表达发育下调基因9对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的观察microRNA-218(miR-218)对胃癌细胞SGC-7901增殖和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养人胃癌细胞SGC-7901,将对数生长期细胞分为空白对照组、阴性对照组和miR-218 mimics组,阴性对照组和miR-218 mimics组细胞分别转染阴性对照序列和miR-218 mimics,空白对照组细胞不进行转染。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测3组细胞中miR-218表达,细胞计数试剂盒-8检测3组细胞培养24、48、72、96 h时的增殖活性;平板细胞克隆形成实验检测3组细胞克隆能力;Transwell实验检测3组细胞侵袭能力;Western blot法检测3组细胞中神经元表达发育下调基因9(NEDD9)蛋白、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)的表达。将SGC-7901细胞分为阴性对照组+NEDD93′非编码区(3′UTR)-Wt组(阴性对照序列、pCHECK2-NEDD93′UTR-Wt共转入SGC-7901细胞)、miR-218 mimics+NEDD93′UTR-Wt组(miR-218 mimics、pCHECK2-NEDD93′UTR-Wt共转入SGC-7901细胞)、阴性对照组+NEDD93′UTR-Mut组(阴性对照序列、pCHECK2-NEDD93′UTR-Mut共转入SGC-7901细胞)、miR-218 mimics+NEDD93′UTR-Mut组(miR-218 mimics、pCHECK2-NEDD93′UTR-Mut共转入SGC-7901细胞),常规培养48 h后收集各组细胞,采用发光检测仪测定各组细胞中荧光素酶活性,分析miR-218与NEDD9的靶向关系。结果与空白对照组和阴性对照组比较,miR-218 mimics组细胞中miR-218表达及培养24、48、72、96 h时细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),NEDD9蛋白表达及细胞克隆形成数量和侵袭细胞数量显著减少(P<0.05);空白对照组与阴性对照组细胞中以上各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。miR-218 mimics+NEDD93′UTR-Wt组细胞中荧光素酶活性显著低于阴性对照组+NEDD93′UTR-Wt组、阴性对照组+NEDD93′UTR-Mut组和miR-218 mimics+NEDD93′UTR-Mut组(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,miR-218 mimics组细胞中E-cadherin蛋白表达显著升高,vimentin、N-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05)。空白对照组与阴性对照组细胞中E-cadherin、vimentin、N-cadherin蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论miR-218过表达胃癌细胞SGC-7901中NEDD9蛋白表达显著下调,microRNA-218可能通过靶向下调NEDD9表达而抑制SGC-7901细胞的增殖及侵袭能力。

神经元表达下调基因9在人脑胶质瘤中的表达

目的探讨神经元表达下调基因9(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated,NEDD9)在人脑胶质瘤组织中的表达情况。方法采集人脑胶质瘤术中切除组织标本36例作为试验组(低级别胶质瘤组14例,高级别胶质瘤组22例),重型颅脑损伤内减压切除的正常脑组织10例作为对照组。采用逆转录聚合酶链反应法测定NEDD9 mRNA的转录水平,同时采用免疫组织化学SP法检测人脑胶质瘤组织中NEDD9蛋白的表达情况。结果 NEDD9蛋白阳性表达率在正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤中呈明显上升趋势,低级别胶质瘤组和高级别胶质瘤组NEDD9蛋白阳性表达率明显高于对照组(P<0.05)。低级别胶质瘤组和高级别胶质瘤组NEDD9 mRNA表达量明显高于对照组,高级别胶质瘤组NEDD9 mRNA表达量明显高于低级别胶质瘤组(P<0.05)。结论 NEDD9在神经胶质瘤中的转录和蛋白表达水平显著增高,且表达率及表达水平随肿瘤恶性程度的加重而增高。

APP17肽对糖尿病视网膜神经元表达NT-3和星形胶质细胞增殖的影响

目的 观察糖尿病早期视网膜神经元表达 NT- 3和星形胶质细胞增殖情况 ,并观察 APP17肽的作用。方法 用链脲佐菌素 (streptozotocin,STZ)复制 Wistar大鼠糖尿病模型 ,于模型建立 2周后 ,皮下注射 APP17肽 ,1月后处死大鼠取视网膜 ,进行神经免疫组化 ,观察 APP17肽对糖尿病早期视网膜神经元中神经营养因子 3(neurotrophin- 3,NT- 3)和星形胶质细胞中胶质原纤维酸性蛋白 (glial fibrillary acidi protein,GFAP)表达的影响。结果 同正常对照组相比模型组 (DM组 )视网膜神经元 NT- 3阳性细胞数明显减少 ,但APP17+DM组阳性细胞数多于 DM组 (P<0 .0 1) ,并且对照组与 APP17+DM组中星形胶质细胞 GFAP阳性数少于 DM组 (P<0 .0 1)。结论 在糖尿病视网膜病变早期存在视网膜神经细胞 NT- 3表达减少及星形胶质细胞增生 ,APP17肽可明显改善早期糖尿病大鼠视网膜神经元的表达 。

左旋组氨酸对匹罗卡品致痫大鼠海马区神经肽Y表达和神经细胞凋亡影响的实验研究

目的:实验研究左旋组氨酸对匹罗卡品致痫大鼠海马区神经肽Y表达和神经细胞凋亡影响。方法:统计分析60只Ⅱ级健康纯系雄性SD大鼠的相关资料。结果:研究组和对照组大鼠建模成功率78.3%(18/23)、77.3%(17/22)之间的差异无统计学意义(P>0.05);研究组大鼠的潜伏期显著长于对照组(P<0.05),痫波频率低于对照组(P<0.05),大发作次数少于对照组(P<0.05),成功建模动物模型后1d、2d、3d CA1区、CA3区、齿状回神经肽Y阳性细胞计数均低于对照组(P<0.05),凋亡染色阳性细胞计数均显著低于对照组(P<0.05)。结论:左旋组氨酸能够有效降低匹罗卡品致痫大鼠海马区神经肽Y表达和神经细胞凋亡数值,具有抗痫作用。

神经前体细胞表达下调蛋白9在胰腺癌组织中的表达及临床意义

目的检测神经前体细胞表达下调蛋白(NEDD)9在胰腺癌和癌旁组织的表达情况,分析其与胰腺癌进展、预后的关系。方法收集2005年8月-2010年12月于无锡市第三人民医院治疗的98例胰腺癌患者的癌和癌旁组织样本,应用免疫组化技术检测患者胰腺癌和癌旁组织中NEDD9的表达,并对NEDD9表达与胰腺癌临床病理特征的关系进行分析。计数资料组间比较采用χ2检验。结果胰腺癌组织中NEDD9的高表达率明显高于癌旁组织(57.1%vs 41.8%,χ2=4.592,P=0.032)。胰腺癌组织NEDD9的表达与患者TNM分期、分化程度及有无淋巴结转移相关(χ2值分别为45.02、20.41、36.21,P值均<0.001);与性别、年龄、肿瘤部位、有无肝转移无相关性(P值均>0.05)。结论 NEDD9可能在胰腺癌的发展和侵袭转移中起着一定的作用,有可能作为评估胰腺癌预后的分子指标和治疗靶点。

NEDD9表达变化与神经胶质瘤的恶性表型及不良预后的关系

目的:探讨NEDD9表达变化与神经胶质瘤的恶性表型及不良预后的关系。方法:选择神经胶质瘤患者100例,根据恶性程度分为低度恶性组(Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤)和高度恶性组(Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤),每组各50例。同时收集重度颅脑外伤患者50例作为对照组。采用免疫组化法检测NEDD9在各组脑组织中的表达情况;采用qRT-PCR和Western blot法检测各组脑组织中NEDD9 mRNA和蛋白表达情况,随访5年观察术后两组胶质瘤患者预后情况,分析NEDD9蛋白表达与预后的关系。结果:免疫组织化学染色实验结果显示,在对照组的脑组织中NED9蛋白的表达极低,在低度恶性组和高度恶性组中NEDD9表达较高,且高度恶性组明显高于低度恶性组(P<0.05);胶质瘤患者脑组织中NEDD9 mRNA及蛋白相对表达量均高于对照组(P<0.05);术后NEDD9蛋白低表达组生存率明显高于NEDD9蛋白高表达组(P<0.05);多因素COX回归分析显示,NEDD9蛋白高表达是神经胶质瘤患者生存期缩短的独立危险因素。结论:NEDD9表达与神经胶质瘤的恶性表型关系密切,与神经胶质瘤恶性进展有关,是患者一个独立的预后危险因素。

高功率微波急性辐照对家兔视网膜睫状神经营养因子表达的影响

目的:探讨高功率微波(HPM)急性辐照后家兔视网膜组织睫状神经营养因子(CNTF)表达量在不同时间的变化规律。方法:采用RT-PCR的方法检测90 W/cm2×15 min辐照后0,3,6,12,24和72 h不同时相点家兔视网膜组织CNTF mRNA表达的情况。结果:微波辐照后即刻,家兔视网膜CNTF mRNA表达含量极显著升高(P<0.01),并达最高峰值;3 h后家兔视网膜CNTF mRNA表达含量开始下降;微波辐照后6 h、12 h家兔视网膜CNTF mRNA含量继续下降,但均仍显著高于对照组水平(P<0.05);24 h、72 h时的家兔视网膜CNTF mRNA表达含量与对照组的CNTF mRNA含量相比基本持平。结论:HPM急性辐照能即刻显著性的增强家兔视网膜CNTF mRNA的表达,其表达量与损伤时间之间存在时效关系。HPM辐照引起的CNTF mRNA表达上调可能参与了微波辐照所致的家兔视网膜组织损伤,为利用外源型CNTF治疗微波辐照所致的家兔视网膜组织损伤提供理论依据。

神经元表达发育下调基因siRNA表达载体的构建及鉴定

目的:构建针对神经元表达发育下调基因9(Neural precursor cell expressed,developmentally downregulated 9,NEDD9)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,研究载体介导的RNAi技术对A549肺腺癌细胞株中NEDD9表达的抑制作用。方法:根据GenBank提供的NEDD9基因(NM_182966)核苷酸序列及siRNA的设计原则,筛选得到159-177 nt、193-211 nt和648-666 nt 3个19 bp片段靶序列,同时随机组合出一条无关序列;分别合成4对带有BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的发夹结构寡核苷酸序列,经退火合成互补DNA双链,克隆入载体pRNAT-CMV3.2中构建重组表达载体,转化DH5α,提取质粒,应用PCR技术和测序方法鉴定重组克隆。用脂质体介导转染入A549肺腺癌细胞株,采用QRT-PCR和Western blot方法检测细胞NEDD9基因mRNA和蛋白表达。结果:PCR筛选得到4个目的片段的阳性克隆,测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致。RTPCR和Western blot检测显示构建的siRNA表达载体可显著降低A549细胞中NEDD9 mRNA和蛋白水平的表达。结论:成功构建载体介导的NEDD9靶向RNA干扰重组体,并能有效抑制A549细胞中NEDD9基因的表达。

新疆哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性

目的研究哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(NEDD4L)基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性。方法以哈萨克族自然人群横断面流行病学调查为基础进行病例-对照研究。采用TaqMan PCR技术对rs3865418多态性在哈萨克族自然人群中(共856例,其中男性364例、女性492例;肥胖组478例、对照组378例)进行分型,分析其与哈萨克族人肥胖的相关性。结果共有851例研究对象基因型分型成功,在总体、男性、女性哈萨克族自然人群中,rs3865418多态性的基因型、等位基因在肥胖组及对照组分布差异无统计学意义(P>0.05);男性腰围平均水平有C/C携带者>C/T携带者>T/T携带者的趋势,而女性腰围平均水平有C/C携带者<C/T携带者<T/T携带者的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NEDD4L的rs3865418多态性与新疆哈萨克族中心性肥胖不相关,该变异可能不是哈萨克族人中心性肥胖的易感因素。

神经前体细胞表达发育下调蛋白9通过Rac1/Cdc42通路促进鼻咽癌细胞增殖和转移的机制研究

目的探究神经前体细胞表达发育下调蛋白9(neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 9,NEDD9)通过Rac1/Cdc42通路促进鼻咽癌细胞增殖和转移的机制。方法通过qPCR和Western blot检测人鼻咽上皮细胞NP69以及人鼻咽癌细胞系中NEDD9的表达水平。将CNE-1细胞分为NC组、NEDD9组和si-NEDD9组,分别转染空载质粒、NEDD9过表达和NEDD9沉默质粒。通过CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组的细胞生长、迁移和侵袭能力。结果与NP69比较,人鼻咽癌细胞系中NEDD9 mRNA和蛋白的水平均显著上调(P<0.05),其中CNE-1细胞中NEDD9 mRNA和蛋白水平最高。与NC组比较,NEDD9组NEDD9 mRNA和蛋白的水平显著升高(P<0.05),si-NEDD9组NEDD9 mRNA和蛋白的水平显著降低(P<0.05)。NEDD9组细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及Rac1/Cdc42通路水平显著高于NC组(P<0.05),si-NEDD9组的增殖、迁移和侵袭能力以及Rac1/Cdc42通路水平显著低于NC组(P<0.05)。结论 NEDD9在鼻咽癌细胞中过表达,并且NEDD9可能通过促Rac1/Cdc42通路诱导NPC细胞增殖和转移。

利用Gateway技术构建神经元特异性人apoE4(1-272)真核表达质粒及鉴定

目的构建神经元特异性人apoE4(1-272)片段的真核表达质粒,并转染小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)验证其表达,为后续利用该质粒构建转基因小鼠,并探讨其作用奠定实验基础。方法以同济医学院生物化学与分子生物学系实验室已有的人apoE4质粒为基础,利用Gateway技术设计引物,将人apoE4(1-272)片段克隆至pRP.EX3d载体上,并将神经元特异性启动子SYN1插入至人apoE4(1-272)片段之前,再借助IRES元件连接EGFP报告基因,构建pRP.EX3d-SYN1-apoE4(1-272)-IRES/EGFP重组表达质粒;经脂质体转染法将上述质粒转染至N2a细胞,转染24h后,荧光显微镜观察转染效率,并采用Western blot检测apoE4(1-272)蛋白的表达水平。结果成功构建神经元特异性表达人apoE4(1-272)的真核表达质粒,经测序鉴定各核心元件序列均正确无误,与预期结果相一致,且经转染N2a细胞观察到新构建质粒可顺利表达,Western blot检测结果显示apoE表达及分子量均与预期一致。结论成功构建了神经元特异性人apoE4(1-272)片段的表达质粒,并初步鉴定了其表达功能,为后续开展相关研究奠定了实验基础。

通督醒神针刺法对脑性瘫痪幼鼠脑组织神经细胞凋亡及神经生长因子蛋白表达的影响

目的:观察通督醒神针刺法对脑性瘫痪幼鼠脑神经细胞凋亡及神经生长因子蛋白表达、肢体功能的影响,分析该种影响是否与针刺时间有关。方法:实验于2005年8—10月在广州中医药大学实验动物中心清洁级实验室及针灸推拿学院实验室完成。①选用7d龄新生SD幼鼠109只。将大鼠结扎左侧颈总动脉后恢复2h,置于透明密闭容器中,并入37℃恒温水中以1L/min的速度通入低氧气体(体积分数0.08氧气和0.92氮气),2.5h后将动物取出,将存活者继续保温1h时后作行为测定,翻身不能、平衡异常或左旋者视为成功的模型(72只)。②将其余24只大鼠设为假手术组:只分离左颈总动脉后不结扎,亦不作低氧处理。将造模成功的大鼠72只按随机抽签法分为3组:脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组、脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅱ组、模型组,每组24只。选用大鼠百会、患侧率谷透角孙、内关、曲池、足三里、涌泉。脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组于造模后24h开始针刺,前7d仅针四肢部穴位,第2天开始加针头部穴位。脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅱ组造模后第8天开始针刺,头、体针同步。2组均以针灸针先在内关、涌泉速刺微出血,不留针,然后针头部及曲池、足三里。百会、率谷透角孙及曲池、足三里接G6805-Ⅱ电针仪,连续波,频率5～10Hz,持续10min,1次/d。脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组连续针刺20d,脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅱ组连续针刺13d。假手术组针刺方法与脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组相同;模型组只造模,不予以任何治疗。③于术后第7天、14天、21天,将胶布粘于大鼠两前爪腹侧面后,记录其撕去胶布所用时间。④术后第21天各组随机选取10只大鼠作以下检测:分别采用原位末端标记法及免疫组化方法测定大鼠额页皮质与海马区神经元凋亡及海马区神经生长因子表达,用图像分析仪在光镜下(400)计数神经细胞凋亡数目及神经生长因子免疫阳性细胞表达数目。结果:纳入大鼠109只,因造模失败脱失13只,假手术组动物无死亡。造模后7d,脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组、脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅱ组、模型组分别死亡2、5、3只;造模后7～14d,上述3组分别死亡2、2、4只;造模后14～21d,上述3组分别死亡0、0、2只。①大鼠海马和大脑额叶皮质神经元凋亡情况:2个针刺治疗组大鼠海马和大脑额叶皮质内原位末端标记法染色阳性细胞显著减少,与模型组相比,差异明显(P<0.05)。且脑性瘫痪幼鼠十针刺Ⅰ组神经细胞凋亡计数明显低于脑性瘫痪幼鼠十针刺Ⅱ组(P<0.01)。②大鼠海马神经元神经生长因子蛋白表达:2个针刺治疗组大鼠神经生长因子蛋白表达明显增强,在数量和强度方面均明显多于或高于假手术组和模型组(P<0.01),脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组明显多于或高于脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅱ组(P<0.01)。③术后第7天,脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组鼠撕去胶布所用时间明显短于模型组(P<0.01);术后第14天,模型组明显长于其他3组(P<0.05或0.01);术后第21天,2个针刺组和模型组鼠前肢功能均显著改善,脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组基本接近正常水平(与假手术组比较,差异不明显),但模型组仍明显长于脑性瘫痪幼鼠+针刺Ⅰ组和假手术组(P<0.01)。结论:针刺可抑制脑性瘫痪幼鼠脑内神经细胞的凋亡,增强脑性瘫痪幼鼠脑组织的神经生长因子的表达,改善肢体功能,对脑性瘫痪幼鼠脑组织损伤大鼠具有一定的保护作用,且越早干预效果越好。