过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞促进小鼠皮肤创面愈合

背景:神经调节蛋白1具有促进细胞增殖、分化以及血管生长等特性。人羊膜间充质干细胞是组织工程领域重要的种子细胞,已被证实参与组织修复及再生过程。目的:构建过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞,探究其增殖、迁移能力以及对创面愈合的影响。方法:(1)体外分离培养人羊膜间充质干细胞并对其进行鉴定;(2)构建神经调节蛋白1过表达慢病毒,将人羊膜间充质干细胞分为空载组、神经调节蛋白1组、对照组,分别转染空载慢病毒、过表达神经调节蛋白1慢病毒,对照组不进行转染;(3)EdU实验检测各组细胞增殖能力,Transwell实验检测各组细胞迁移能力;(4)构建C57BL/6小鼠创面损伤模型,随机分成对照组、空载组和神经调节蛋白1组,每组8只,分别在创面局部多点均匀注射1 mL转染空载慢病毒或转染过表达神经调节蛋白1慢病毒的人羊膜间充质干细胞,对照组注射等量的生理盐水;(5)造模后1,7,14 d观察创面愈合情况,苏木精-伊红染色观察创面愈合组织学变化,免疫组化观察创面CD31的表达。结果与结论:(1)成功构建过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞,细胞内神经调节蛋白1的mRNA、蛋白表达较空载组明显上调(P<0.05);(2)过表达神经调节蛋白1促进了人羊膜间充质干细胞的迁移(P<0.01)和增殖(P<0.05);(3)过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞促进了小鼠创面愈合(P<0.05)和创面的血管生成(P<0.05)。结果表明,过表达神经调节蛋白1提高了人羊膜间充质干细胞的增殖和迁移能力,以及增强了促进创面愈合和创面血管生成的能力。

甲状腺功能亢进症患者血清神经调节蛋白4水平及其临床意义

目的 探讨甲状腺功能亢进症(甲亢)患者血清神经调节蛋白4(NRG4)水平及其临床意义。方法 选取2019年8月至2021年8月该院收治的69例甲亢患者作为甲亢组,同期收治的57例亚临床甲亢患者作为亚临床甲亢组,同期健康体检者63例为健康对照组。对甲亢患者均给予硫酰胺类药物甲巯咪唑治疗3个月。比较3组促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平;分析甲亢患者治疗前后的TSH、FT3、FT4、NRG4水平变化;评估治疗前血清NRG4辅助诊断甲亢的价值;分析治疗前血清NRG4水平与TSH、FT3、FT4水平的相关性。结果 甲亢组治疗前TSH水平[(0.14±0.03)mU/L]低于亚临床甲亢组[(0.25±0.04)mU/L]、健康对照组[(2.61±0.45)mU/L],甲亢组治疗前FT3、FT4、NRG4水平[(15.54±2.68)pmol/L、(41.36±10.02)pmol/L、(3.42±1.12)ng/mL]高于亚临床甲亢组[(6.25±0.27)pmol/L、(20.34±3.45)pmol/L、(2.61±0.52)ng/mL]、健康对照组[(3.74±0.39)pmol/L、(12.03±2.16)pmol/L、(1.89±0.49)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。甲亢患者FT3、FT4、NRG4水平在治疗1个月[(12.04±2.41)pmol/L、(30.25±7.84)pmol/L、(2.84±0.87)ng/mL]、3个月[(7.65±2.23)pmol/L、(19.63±4.25)pmol/L、(2.37±0.61)ng/mL]时相比治疗前降低(P<0.05),TSH水平在治疗1个月[(0.87±0.21)mU/L]、3个月[(1.42±0.32)mU/L]相比治疗前升高(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示:血清NRG4诊断甲亢的曲线下面积为0.859(95%CI=0.799~0.919,P<0.05),灵敏度为66.7%,特异度为88.9%,最佳临界值为2.39 ng/mL,约登指数为0.556。Pearson相关分析结果显示:NRG4水平与TSH水平呈负相关(r=-0.494,P<0.05),与FT3、FT4水平均呈正相关(r=0.502、0.644,P<0.05)。结论 甲亢患者血清NRG4呈相对高水平,硫酰胺类药物治疗后其水平下降;甲亢患者NRG4水平与甲状腺激素指标水平具有相关性,对甲亢的临床诊治具有辅助评估价值。

神经调节蛋白4对2型糖尿病小鼠主动脉内皮细胞凋亡的影响

目的探讨神经调节蛋白4(Nrg4)对2型糖尿病小鼠主动脉内皮细胞凋亡的影响。方法将C57小鼠分为对照(Vehicle)组、糖尿病(DM)组和Nrg4干预糖尿病小鼠(Nrg4)组。Nrg4组腹腔注射Nrg4重组蛋白(100μg/kg,3次/周),Vehicle组与DM组小鼠注射等量生理盐水,干预周期均为8周。实验结束后,TUNEL荧光染色检测主动脉内皮细胞凋亡,Western blot检测主动脉内皮组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Cleaved-caspase 3的表达。结果与Vehicle组相比,DM组主动脉内皮细胞凋亡率明显升高[(33.0±5.4)%vs.(20.5±3.0)%;P<0.05],促凋亡蛋白Bax与凋亡执行蛋白Cleaved-caspase 3表达明显增多,抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著减少(P<0.05);而Nrg4干预明显抑制糖尿病小鼠主动脉内皮细胞凋亡[(19.2±3.8)%vs.(33.0±5.4)%;P<0.05],降低Bax与Cleaved-caspase 3的表达并促进Bcl-2表达(P<0.05)。结论Nrg4干预能缓解2型糖尿病小鼠主动脉内皮细胞凋亡。

伏立诺他调节高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4信号通路对脑出血小鼠神经功能损伤的影响

目的 探讨伏立诺他(SAHA)调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路对脑出血(ICH)小鼠神经功能损伤的影响。方法 通过注射Ⅶ型胶原酶建立ICH小鼠模型。将造模小鼠随机分为ICH组、SAHA组(15 mg/kg SAHA)、重组高迁移率组蛋白B1(rHMGB1)组(16μg/kg rHMGB1)、SAHA+rHMGB1组(16μg/kg rHMGB1+15 mg/kg SAHA),每组10只;以不注射Ⅶ型胶原酶的10只小鼠为假手术组。干预结束后,对小鼠进行神经功能缺损评分(NDS),检测小鼠认知障碍状况及脑水肿变化、血清TNF-α及IL-1β水平、神经元细胞凋亡数量、血肿周围组织中HMGB1/TLR4通路相关蛋白的表达。结果 与ICH组比较,假手术组、SAHA组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著降低,分辨指数显著升高(均P<0.05),rHMGB1组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著升高,分辨指数显著降低(均P<0.05)。与SAHA+rHMGB1组比较,SAHA组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著降低,分辨指数显著升高(均P<0.05),rHMGB1组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著升高,分辨指数显著降低(均P<0.05)。结论 SAHA抑制HMGB1/TLR4信号通路的炎症反应,改善ICH小鼠神经功能。

中风活心软胶囊通过靶向微小RNA-126诱导缺氧诱导因子-1α/促凋亡调节蛋白BNIP3信号通路促进自噬减轻脑缺血再灌注损伤大鼠神经损伤的作用机制研究

目的探讨中风活心软胶囊通过靶向微小RNA(miRNA)-126诱导缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/促凋亡调节蛋白BNIP3信号通路促进自噬减轻脑缺血再灌注损伤大鼠神经损伤的作用机制。方法选取30只无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组与治疗组,每组10只。采用Zea Longa法建立右侧大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠模型。治疗组给予中风活心软胶囊。采用改良神经功能损害评分(mNSS)评估大鼠神经功能缺损情况,透射电镜观察缺血半暗区皮质神经元及自噬囊泡超微结构,蛋白质免疫印迹(WB)法和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法分别检测缺血半暗区皮质雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、HIF-1α蛋白及其mRNA和miR-126的表达水平。结果模型组、治疗组mNSS评分均高于对照组,但治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、治疗组缺血半暗区皮质mTOR、HIF-1α蛋白表达水平均高于对照组,但治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、治疗组缺血半暗区皮质mTOR、HIF-1αmRNA表达水平均高于对照组,miR-126表达水平低于对照组,但治疗组mTOR、HIF-1αmRNA表达水平低于模型组,miR-126表达水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组缺血半暗区皮质神经元及电镜下自噬囊泡数量明显增加,细胞结构损坏减轻。结论中风活心软胶囊可显著提高脑缺血大鼠缺血半暗区皮质mTOR、HIF-1α因子表达,其作用机制可能是通过激活miR-126表达进而靶向调控mTOR/HIF-1α信号通路,促进自噬,从而发挥其脑保护效应。

神经调节蛋白4及其受体ErbB4在牙周炎患者龈沟液中的表达及对牙周炎大鼠牙周组织炎症和牙槽骨丢失的影响

目的探讨神经调节蛋白4(Nrg4)及其受体ErbB4在牙周炎患者龈沟液(GCF)中的表达情况及对牙周炎大鼠牙周组织炎症和牙槽骨丢失的影响。方法招募健康志愿者及牙周炎患者80名,分为健康组(H组)、牙周炎组(G组)、Ⅱ期B级牙周炎组(P1组)和Ⅲ期B级牙周炎组(P2组),每组20例。采集GCF,采用ELISA法检测ErbB4和Nrg4的表达量。在体外使用IFNγ+LPS刺激原代骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)和树突状细胞(BMDCs),并采用qPCR法测定胞内表皮生长因子受体(EGFR)、ErbB2、ErbB3、ErbB4 mRNA的表达情况。使用Nrg4重组蛋白处理骨髓来源M1巨噬细胞并采用CCK-8法测定其存活能力,采用Annexin V-PI双标记流式细胞术测定其凋亡情况。在体动物实验构建实验性牙周炎动物模型。15只大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)和Nrg4重组蛋白治疗组(T组),每组5只。对3组大鼠上颌骨牙周炎造模部位进行micro-CT成像分析,苏木精-伊红(H-E)染色观察组织病理学变化。结果与H组相比,牙周炎各阶段分组患者GCF中ErbB4的表达量显著升高,Nrg4的表达量显著降低(P<0.05)。在体外使用IFNγ+LPS刺激原代BMDMs引起其内ErbB4 mRNA表达显著上调(P<0.01)。使用Nrg4重组蛋白处理骨髓来源M1巨噬细胞后,其存活能力显著降低,细胞凋亡水平显著升高(P<0.01)。动物实验micro-CT成像分析表明,使用Nrg4重组蛋白治疗牙周炎大鼠模型显示出较好的疗效,与M组相比,T组釉-牙骨质界和牙槽骨嵴(CEJ-ABC)间的距离明显缩小,骨矿物质密度(BMD)和骨体积分数(BV/TV)明显升高(P<0.01);而与S组相比,T组上述4个参数的测定结果无明显变化(P>0.05)。结论GCF中ErbB4和Nrg4的表达水平能够作为潜在牙周炎患者炎症水平的标志物,Nrg4重组蛋白治疗牙周炎在在体动物模型水平上显示出了较好的疗效。

血清IL-33和神经调节蛋白1与帕金森病患者认知障碍的相关性分析

目的探讨帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清IL-33、神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRG1)水平与认知障碍(cognitive impairment,CI)的相关性。方法选取2021年9月至2023年9月邯郸市中医院PD患者115例,根据蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment scale,MoCA)评分将患者分为非CI组(≥26分)69例和CI组(<26分)46例,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-33、NRG1水平,采用Spearman法分析PD患者血清IL-33、NRG1水平与MoCA评分、帕金森病评定量表第Ⅲ部分(unified Parkinson's disease rating scaleⅢ,UPDRSⅢ)评分的相关性,采用多因素logistic回归方程分析PD患者发生CI的影响因素。结果115例患者中男68例、女47例;年龄45~80岁,平均年龄(65.3±8.5)岁。PD患者血清IL-33、NRG1水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.472、-0.601,均P<0.001),与UPDRSⅢ评分呈正相关(r=0.654、0.739,均P<0.001)。多因素logistic回归分析结果显示,年龄越大(OR=2.694,95%CI:1.242~5.843,P=0.012)、受教育年限越低(OR=0.706,95%CI:0.544~0.916,P=0.009)、IL-33水平越高(OR=3.528,95%CI:1.389~8.968,P=0.008)、NRG1水平越高(OR=2.831,95%CI:1.382~5.801,P=0.004)的患者更容易发生CI。结论PD患者血清IL-33、NRG1水平显著升高,且与CI的发生密切相关。可通过动态监测PD患者IL-33、NRG1水平,评估CI的发生风险。

神经调节蛋白1在孤独症谱系障碍发病中的作用

孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)是儿童时期常见的神经发育障碍性疾病,其特征是社交行为障碍,重复的行为和兴趣。ASD的病因尚未明确。神经调节蛋白1(neuregulin1,NRG1)参与ASD发病的过程越来越引起学者重视。NRG1在神经发育、可塑性和修复中起重要作用。NRG1通过影响γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)能神经元及雪旺细胞参与ASD的发病过程,这可能与其参与调节突触可塑性、神经元兴奋性、髓鞘形成及神经系统发育与修复等作用有关。

多囊卵巢综合征患者血清神经调节蛋白4水平与性激素及代谢水平的相关性分析

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中神经调节蛋白4(NRG4)水平与性激素及代谢水平的相关性。方法选取87例PCOS患者作为研究对象(PCOS组),另选同期健康的90例女性(无生殖系统疾病,月经正常且性激素检查正常)作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清NRG4水平、糖脂代谢指标和性激素指标。采用Pearson法及多元线性回归分析PCOS患者血清NRG4与各指标的相关性。结果PCOS组患者血清NRG4水平为(24.41±7.31)ng/mL,高于对照组的(15.43±4.26)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.001)。与对照组比较,PCOS组患者BMI、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、黄体生成素(LH)、黄体生成素/卵泡刺激激素(LH/FSH)、泌乳素及总睾酮水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。PCOS患者血清NRG4水平与BMI、hs-CRP、FBG、FINS、HOMA-IR、TG、LH、LH/FSH、总睾酮呈正相关(P<0.05);BMI、FBG、TG是血清NRG4水平的影响因素(P<0.05)。结论PCOS患者血清NRG4水平升高与糖脂代谢和性激素指标异常相关。

神经调节蛋白1-ErbB信号通路的研究进展

神经调节蛋白（neuregulin,NRG）在细胞的生存,迁移以及分化中扮演着重要的角色,它通过激活称为ErbBs蛋白的受体酪氨酸激酶（表皮生长因子受体的经典成员）进行一系列的信号转导.有四种ErbB受体：EGFR（ErbB 1/HER1）,ErbB2（neu/HER2）,ErbB3/HER3,和ErbB4/HER4..神经调节蛋白通过编码基因不同分为神经调节蛋白1-4：NRG1,NRG2,NRG3,和NRG4[1].其中NRG1已经得到大量研究,而NRG2,NRG3,NGR4的功能研究甚少.NRG1-ErbB信号通路在神经发育,细胞增殖分化等生命过程中发挥着重要作用,与精神分裂症等神经发育异常所导致的疾病以及癌症,心力衰竭,心肌梗死等疾病的发生发展密切相关.NRG1-ErbB信号通路机制的更广泛研究将有助于为大量的临床疾病提供有效的治疗措施,现就近几年来对NRG1-ErbB信号通路的最新研究进展作一综述.

神经调节蛋白1及其受体ErbB4在精神分裂症小鼠前额叶皮质中的表达变化

目的:探讨精神分裂症神经调节蛋白1(NRG-1)及其受体(ErbB4)与少突胶质细胞脱髓鞘和髓鞘再生之间的关系.方法:采用双环己酮草酰二腙(CPZ)诱导的少突胶质细胞脱髓鞘制备精神分裂症小鼠动物模型.动物分为6组,对照组(食物中未添加CPZ),CPZ喂养2周、3周、4周组,第4周后停止给予CPZ,继续正常喂养1周即5周组;停止给予CPZ后,继续正常喂养2周即6周组.通过实时定量PCR及免疫印迹检测,观察NRG-1和ErbB4在小鼠大脑额叶脱髓鞘和髓鞘再生过程中的表达变化.结果:NRG-1 mRNA和蛋白的表达在第2周、第3周和第4周CPZ组较对照组、第5周和第6周明显降低.ErbB4 mRNA和蛋白的表达在各组与对照组比较均增强.ErbB4在第5周和第6周mRNA和蛋白的表达明显高于第2周、第3周和第4周CPZ组.结论:在小鼠精神分裂症形成过程中,NRG-1和ErbB4的表达变化与少突胶质细胞的脱髓鞘和髓鞘再生有关系.

人参皂苷Rg1对帕金森病小鼠中脑黑质神经调节蛋白1-ErbB4信号通路活性的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对帕金森病(PD)小鼠中脑黑质中神经调节蛋白1(NRG1)-Erb B4信号通路活性的影响。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水对照组、1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)模型组、MPTP+Rg1组、MPTP+Rg1+N-[2-(P-溴苯丙烯盐基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺(H89)组。在注射MPTP前3 d,生理盐水对照组、MPTP模型组小鼠腹腔注射生理盐水1 m L·kg-1·d-1,MPTP+Rg1组、MPTP+Rg1+H89组小鼠腹腔注射人参皂苷Rg1 10 mg·kg-1·d-1,连续4 d,第4天在注射完人参皂苷2 h后,MPTP模型组、MPTP+Rg1组、MPTP+Rg1+H89组小鼠腹腔注射MPTP 20 mg·kg-1,均注射4次,每次间隔2 h,而MPTP+Rg1+H89组在首次注射MPTP前30 min腹腔注射H89 1 mg·kg-1。药物注射后连续7 d观察小鼠行为学变化,采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测小鼠中脑黑质中Nrg1与Erb B4基因的mRNA表达情况,采用Western blot检测NRG1受体Erb B4蛋白及磷酸化Erb B4(p-Erb B4)蛋白的表达及其磷酸化水平。结果 MPTP模型组小鼠中脑黑质内Nrg1基因mRNA表达水平低于生理盐水对照组(P=0.007 9)和MPTP+Rg1组(P=0.004 9);MPTP+Rg1+H89组与MPTP模型组相比,Nrg1 mRNA表达水平差异无统计学意义(P=0.151 3);MPTP+Rg1+H89组与MPTP+Rg1组比较,小鼠中脑黑质内Nrg1 mRNA表达水平降低(P=0.049 3)。MPTP模型组小鼠中脑黑质内的Nrg1-typeⅠ/Ⅱ的mRNA表达水平显著低于生理盐水对照组(P=0.001 9)和MPTP+Rg1组(P=0.043 2);MPTP+Rg1+H89组与MPTP模型组小鼠中脑黑质内Nrg1-typeⅠ/ⅡmRNA表达水平比较差异无统计学意义(P=0.688 5);MPTP+Rg1+H89组与MPTP+Rg1组比较,小鼠中脑黑质内Nrg1-typeⅠ/ⅡmRNA表达显著下降(P=0.029 4)。与生理盐水对照组相比,Nrg1-typeⅢmRNA在MPTP组略有降低,但差异无统计学意义(P=0.290 8);与MPTP模型组比较,MPTP+Rg1组小鼠中脑黑质内Nrg1-typeⅢmRNA表达升高(P=0.041 9),MPTP+Rg1+H89组小鼠黑质Nrg1-typeⅢmRNA表达降低(P=0.728 9);MPTP+Rg1+H89组与MPTP+Rg1组小鼠黑质Nrg1-typeⅢmRNA表达比较差异无统计学意义(P=0.164 2)。生理盐水对照组、MPTP模型组、MPTP+Rg1组、MPTP+Rg1+H89组小鼠黑质Erb B4 mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P=0.531 8)。各组小鼠中脑黑质内Erb B4蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P=0.800 5);MPTP模型组小鼠黑质内p-Erb B4蛋白表达水平低于生理盐水对照组(P=0.013 4)和MPTP+Rg1组(P=0.019 9);MPTP+Rg1+H89组p-Erb B4蛋白表达水平低于MPTP+Rg1组(P=0.047 8);MPTP+Rg1+H89组与MPTP模型组p-Erb B4表达水平比较差异无统计学意义(P=0.887 7)。结论 PD小鼠脑内的NRG1基因表达及其Erb B4受体的活性降低,而人参皂苷Rg1可能通过增强小鼠中脑黑质NRG1-Erb B4的通路活性而改善PD的症状。

硫化氢通过上调神经调节蛋白1/ErbB2抑制阿霉素诱导的大鼠心肌纤维化

目的观察硫化氢(H_2S)对阿霉素诱导的大鼠心肌纤维化及神经调节蛋白(NRG)1和ErbB2(又名HER2,NEU,CD340)蛋白表达的影响。方法取SD雄性大鼠随机分为4组:对照组,模型组,H_2S模型组,H_2S对照组。经腹腔注射阿霉素建立心肌损伤大鼠模型,对照组和H_2S对照组经腹腔注射同等剂量的生理盐水;建模后,H_2S模型组和H_2S对照组每日经腹腔注射硫氢化钠溶液;Masson染色观察心肌纤维化及计算心肌胶原容积分数(CVF);Western印迹检测NRG1和ErbB2蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组心肌细胞紊乱,心肌纤维沉积明显增多、CVF显著增高(P<0.05),心肌NRG1和ErbB2蛋白的表达明显下降(P<0.05);而与模型组相比,H_2S模型组心肌组织纤维沉积明显减少、CVF显著下降(P<0.05),NRG1和ErbB2蛋白的表达显著上调(P<0.05)。结论 H_2S可以改善阿霉素导致的心肌纤维化,其发生机制可能与通过NRG1/ErbB2通路上调NRG1和ErbB2蛋白表达有关。

C/EBPα通过结合鸡神经调节蛋白4基因外显子2正调控其表达

神经调节蛋白4(NRG4)是一个新发现的脂肪细胞因子,它在机体能量平衡、糖脂代谢等许多生理过程中发挥重要调控作用。目前,NRG 4基因的转录调控机制尚不清楚。我们前期的5′RACE分析显示,鸡NRG 4基因转录起始位点(TSS)弥散分布于一段约200 bp的区域,提示鸡NRG 4基因的启动子为分散型启动子(dispersed promoter)。本研究开展了鸡NRG 4基因近端外显子和内含子的启动子活性分析,报告基因分析显示,包含NRG 4基因外显子1、内含子1和外显子2的基因组片段(-122/+452)具有很强的双向启动子活性。生物信息学分析显示,鸡NRG 4基因外显子2上存在1个转录因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的潜在结合位点;报告基因分析发现,删除或突变C/EBPα结合位点会导致C/EBPα丧失对NRG 4基因片段(-122/+452)启动子活性的调控作用。基因表达相关性分析显示,鸡脂肪组织中C/EBPα和NRG 4基因的mRNA表达存在显著正相关(P<0.01)。进一步的脂肪组织ChIP-qPCR分析显示,C/EBPα直接结合鸡NRG 4基因的外显子2。本研究发现,鸡NRG 4基因的近端外显子和内含子具有双向启动子活性,C/EBPα通过直接结合外显子2调控鸡脂肪组织NRG 4基因的表达。

脑梗死病人血清血管生成素样蛋白3、神经调节蛋白4水平与颅内动脉狭窄程度及预后的关系

目的:探讨脑梗死病人血清血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)、神经调节蛋白4(Nrg4)水平与颅内动脉狭窄程度及预后的关系。方法:选取本院2018年12月—2022年1月收治的脑梗死病人142例,将未合并颅内动脉粥样硬化性狭窄(ICAS)的脑梗死病人纳入无狭窄组(34例),将合并ICAS的108例脑梗死病人依据颅内动脉狭窄程度分为轻度狭窄组(35例)、中度狭窄组(27例)、重度狭窄组(46例);利用酶联免疫吸附法测定血清ANGPTL3、Nrg4水平;治疗90 d后,根据Rankin评分将脑梗死病人分为预后不良组(Rankin评分≥3分)和预后良好组(Rankin评分<3分);Spearman法分析脑梗死病人血清ANGPTL3、Nrg4水平与ICAS程度、Rankin评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ANGPTL3、Nrg4水平对脑梗死病人预后不良的预测价值,血清ANGPTL3、Nrg4水平单独及联合预测的ROC曲线下面积(AUC)比较行Z检验。结果:无狭窄组、轻度狭窄组、中度狭窄组、重度狭窄组脑梗死病人血清ANGPTL3水平依次升高,血清Nrg4水平依次降低(P<0.05);预后不良组脑梗死病人血清ANGPTL3水平、治疗90 d Rankin评分高于预后良好组,血清Nrg4水平低于预后良好组(P<0.05);Spearman分析结果显示,脑梗死病人血清ANGPTL3水平与ICAS程度、治疗90 d Rankin评分均呈正相关,血清Nrg4水平与ICAS程度、治疗90 d Rankin评分均呈负相关(P<0.05);ROC曲线显示,血清ANGPTL3、Nrg4水平单独及联合预测脑梗死病人预后不良的AUC分别为0.807,0.851,0.914,敏感度分别为76.90%、70.80%、87.70%,特异度分别为84.30%、82.10%、79.20%;二者联合预测的AUC大于ANGPTL3、Nrg4单独预测的AUC(Z值分别为2.426,1.780,P<0.05)。结论:脑梗死病人血清ANGPTL3水平升高,血清Nrg4水平降低,二者与颅内动脉狭窄程度密切相关,且是不良预后的重要预测因素。

他汀类药物进展性脑梗死神经功能缺损程度及胆固醇调节元件结合蛋白表达情况的影响研究

目的 观察他汀类药物对进展性脑梗死神经功能缺损程度及胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP2)表达情况的影响。方法 本研究为前瞻性研究,病例纳入河南科技大学第二附属医院2021年1月至2023年6月收治的106例进展性脑梗死(PCI)患者,通过电脑随机分组法将其分别列为常规组(53例)和联合组(53例),所有患者实施常规药物治疗,联合组采用阿托伐他汀配合治疗,比较2组血脂水平、血清炎症因子、SREBP2蛋白表达水平、脑神经功能恢复情况;通过Spearman相关性系数检验SREBP2蛋白表达与脑神经功能缺损程度的相关性。结果 在不同治疗方案下,联合组的总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、SREBP2蛋白相对表达量均低于常规组;联合组的超敏C-反应蛋白(hsCRP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)均低于常规组;联合组的神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100钙结合蛋白β(S100β)均低于常规组;联合组的神经功能缺损量表(NIHSS)评分、中国卒中量表(CSS)评分均低于常规组;改良Bathel指数(MBI)高于常规组,差异具有统计学意义(P<0.05)。经Spearman相关性系数检验,SREBP2蛋白表达与NSE、S100β、NIHSS评分、CSS评分呈负相关,与MBI评分呈正相关。结论 SREBP2蛋白表达与PCI神经功能缺损程度密切相关;阿托伐他汀能有效改善PCI患者的血脂水平并缓解炎症反应,对促进患者神经功能恢复有积极作用。

早期糖尿病肾病患者血清鸢尾素、高迁移率族蛋白Box1、神经调节蛋白4水平变化及临床意义

目的探讨早期糖尿病肾病(DKD)患者血清鸢尾素、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、神经调节蛋白4(NRG4)水平变化及临床意义。方法选取2022年3月至2024年3月郑州大学第一附属医院收治的80例早期DKD患者作为早期DKD组,选取同期50例健康体检人员作为健康对照组,对两组人口学特征、临床资料进行收集,对血清鸢尾素、HMGB1、NRG4水平进行检测,进行单因素与多因素Logistic回归分析,明确早期DKD发生的危险因素。结果两组患者年龄、性别、饮酒史、冠心病史、吸烟史、高血压史、舒张压、收缩压、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);早期DKD组的血清鸢尾素、NRG4水平更低,HMGB1水平更高,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素二元Logistic回归分析结果显示,血清鸢尾素(OR=0.568;95%CI:0.389~0.829)、NRG4(OR=0.456;95%CI:0.246~0.845)是影响早期DKD发生的保护性因素,差异具有统计学意义(P<0.05),HMGB1(OR=2.976;95%CI:2.664~3.325)是独立危险因素,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论早期DKD患者血清鸢尾素、NRG4水平更低,HMGB1水平更高,临床可用血清鸢尾素、HMGB1、NRG4水平对早期DKD发生进行评估。

止麻消痰活血汤对老年心肌梗死大鼠神经调节蛋白-1/受体酪氨酸蛋白激酶erbB3通路及心室重构的影响

目的 探讨止麻消痰活血汤对老年心肌梗死大鼠神经调节蛋白-1(NRG-1)/受体酪氨酸蛋白激酶erbB3(ErbB3)通路及心室重构的影响。方法 研究起止时间为2019年2—10月,大鼠来源于上海邦耀生物公司。制备老年心肌梗死模型大鼠,以随机数字表法分为模型组、止麻消痰活血汤低中高剂量组(10 mL/kg、20 mL/kg、30 mL/kg)、地尔硫‰组(2.61 mg/kg),每组12只,另取12只SD老年大鼠设为假手术组,分组处理后,测定各组大鼠左心室质量指数;苏木精-伊红(HE)、马松(Mosson)染色分别检测大鼠心肌病理形态变化及心室纤维化程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白质印迹法检测大鼠心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心肌纤维扭曲、断裂,心肌细胞肥大、坏死,可见炎性细胞浸润等病理损伤,且胶原纤维显著增多,纤维化严重,血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平、左心室质量指数[(23.27±1.84)‰比(12.23±0.85)‰]显著升高(P<0.05),心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白NRG-1[(0.30±0.04)比(2.16±0.37)]、p-ErbB3/ErbB3[(0.09±0.02)比(1.02±0.20)]显著降低(P<0.05);与模型组比较,止麻消痰活血汤低、中、高剂量组、地尔硫‰组大鼠病理损伤及纤维化症状得到改善,血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平、左心室质量指数[(19.92±1.47)‰、(16.36±1.06)‰、(12.89±0.87)‰、(12.84±0.86)‰比(23.27±1.84)‰]降低(P<0.05),心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白NRG-1[(0.94±0.18)、(1.27±0.23)、(2.09±0.31)、(2.11±0.33)比(0.30±0.04)]、p-ErbB3/ErbB3[(0.27±0.04)、(0.51±0.08)、(0.92±0.16)、(0.94±0.18)比(0.09±0.02)]升高(P<0.05),且止麻消痰活血汤组间有剂量依赖性(P<0.05);与地尔硫‰组相比,止麻消痰活血汤高剂量组大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 止麻消痰活血汤可激活NRG-1/ErbB3通路,减轻心肌梗死大鼠炎症,缓解其心肌组织病理损伤及纤维化变性,改善大鼠心室重构症状。

神经调节蛋白-1对糖尿病心肌病大鼠心肌重构的影响

目的观察神经调节蛋白-1(NRG-1)对糖尿病心肌病大鼠心肌重构的影响并初步探讨其机制。方法♂SD大鼠经腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病心肌病(DCM)模型,对照组(Control)大鼠给予腹腔注射PBS溶液。成模后12周大鼠分为DCM组(隔日1次尾静脉注射PBS液)、NRG-1组(隔日1次尾经脉注射重组NRG-1)、HERCE组(隔日1次尾经脉注射重组NRG-1及Herceptin),药物干预共2周,观察2周于DCM造模后16周,采用心脏超声评估糖尿病心肌病大鼠心功能变化;原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,Masson特殊胶原染色定量检测心肌胶原纤维,实时定量RT-PCR法检测心肌组织相关基因表达情况。结果糖尿病诱导16周后,DCM组大鼠心功能降低,表现为左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(FS)、舒张早期运动速度/舒张晚期运动速度(Em/Am)较对照组下降(P<0.05)。凋亡指数(AI)、胶原容积分数(CVF)、Ⅰ/Ⅲ型胶原mRNA表达上调,bcl-2 mRNA下调而bax mRNA上调(P<0.05)。与DCM组相比,NRG-1组LVEF、FS、bcl-2 mRNA上调(P<0.05),AI、CVF、Ⅰ/Ⅲ型胶原mRNA、bax mRNA表达下调(P<0.05)。与NRG-1组比较,HERCE组以上各指标变化无统计学意义(P>0.05)。结论外源性补给NRG-1可抑制心肌细胞的凋亡、减轻心肌纤维化,从而改善DCM大鼠心功能。

cAMP反应元件结合蛋白介导磷酸化细胞外信号调节激酶在神经病理性痛形成中的作用

采用行为学、免疫组织化学和Western blot方法,观察鞘内注射细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulate kinase, ERK)信号转导通路阻滞剂对慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠痛行为及脊髓背角内磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phosphorylated cAMP response-element binding protein,pCREB)和Fos表达变化的影响,探讨ERK/CREB转导通路在神经病理性疼痛中的作用。结果表明,CCI可明显增加双侧脊髓背角pCREB、损伤侧脊髓背角浅层Fos阳性神经元表达,以CCI后3与5d时尤为显著。鞘内注射促分裂原活化蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase,MEK)阻滞剂U0126及ERK反义寡核苷酸在减轻大鼠痛行为的同时,能叫显抑制双侧脊髓背角内pCREB的表达,同时,Fos阳性神经元的表达也明显减少。大鼠痛行为及脊髓背角pCREB和Fos的表达在时相上一致。上述结果提示pCREB参与pERK介导的神经病理性疼痛。