过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞促进小鼠皮肤创面愈合

背景:神经调节蛋白1具有促进细胞增殖、分化以及血管生长等特性。人羊膜间充质干细胞是组织工程领域重要的种子细胞,已被证实参与组织修复及再生过程。目的:构建过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞,探究其增殖、迁移能力以及对创面愈合的影响。方法:(1)体外分离培养人羊膜间充质干细胞并对其进行鉴定;(2)构建神经调节蛋白1过表达慢病毒,将人羊膜间充质干细胞分为空载组、神经调节蛋白1组、对照组,分别转染空载慢病毒、过表达神经调节蛋白1慢病毒,对照组不进行转染;(3)EdU实验检测各组细胞增殖能力,Transwell实验检测各组细胞迁移能力;(4)构建C57BL/6小鼠创面损伤模型,随机分成对照组、空载组和神经调节蛋白1组,每组8只,分别在创面局部多点均匀注射1 mL转染空载慢病毒或转染过表达神经调节蛋白1慢病毒的人羊膜间充质干细胞,对照组注射等量的生理盐水;(5)造模后1,7,14 d观察创面愈合情况,苏木精-伊红染色观察创面愈合组织学变化,免疫组化观察创面CD31的表达。结果与结论:(1)成功构建过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞,细胞内神经调节蛋白1的mRNA、蛋白表达较空载组明显上调(P<0.05);(2)过表达神经调节蛋白1促进了人羊膜间充质干细胞的迁移(P<0.01)和增殖(P<0.05);(3)过表达神经调节蛋白1的人羊膜间充质干细胞促进了小鼠创面愈合(P<0.05)和创面的血管生成(P<0.05)。结果表明,过表达神经调节蛋白1提高了人羊膜间充质干细胞的增殖和迁移能力,以及增强了促进创面愈合和创面血管生成的能力。

伏立诺他调节高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4信号通路对脑出血小鼠神经功能损伤的影响

目的 探讨伏立诺他(SAHA)调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路对脑出血(ICH)小鼠神经功能损伤的影响。方法 通过注射Ⅶ型胶原酶建立ICH小鼠模型。将造模小鼠随机分为ICH组、SAHA组(15 mg/kg SAHA)、重组高迁移率组蛋白B1(rHMGB1)组(16μg/kg rHMGB1)、SAHA+rHMGB1组(16μg/kg rHMGB1+15 mg/kg SAHA),每组10只;以不注射Ⅶ型胶原酶的10只小鼠为假手术组。干预结束后,对小鼠进行神经功能缺损评分(NDS),检测小鼠认知障碍状况及脑水肿变化、血清TNF-α及IL-1β水平、神经元细胞凋亡数量、血肿周围组织中HMGB1/TLR4通路相关蛋白的表达。结果 与ICH组比较,假手术组、SAHA组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著降低,分辨指数显著升高(均P<0.05),rHMGB1组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著升高,分辨指数显著降低(均P<0.05)。与SAHA+rHMGB1组比较,SAHA组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著降低,分辨指数显著升高(均P<0.05),rHMGB1组NDS评分、脑水肿率、神经元凋亡数量、TNF-α水平、IL-1β水平及HMGB1、TLR4蛋白表达显著升高,分辨指数显著降低(均P<0.05)。结论 SAHA抑制HMGB1/TLR4信号通路的炎症反应,改善ICH小鼠神经功能。

中风活心软胶囊通过靶向微小RNA-126诱导缺氧诱导因子-1α/促凋亡调节蛋白BNIP3信号通路促进自噬减轻脑缺血再灌注损伤大鼠神经损伤的作用机制研究

目的探讨中风活心软胶囊通过靶向微小RNA(miRNA)-126诱导缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/促凋亡调节蛋白BNIP3信号通路促进自噬减轻脑缺血再灌注损伤大鼠神经损伤的作用机制。方法选取30只无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组与治疗组,每组10只。采用Zea Longa法建立右侧大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠模型。治疗组给予中风活心软胶囊。采用改良神经功能损害评分(mNSS)评估大鼠神经功能缺损情况,透射电镜观察缺血半暗区皮质神经元及自噬囊泡超微结构,蛋白质免疫印迹(WB)法和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法分别检测缺血半暗区皮质雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、HIF-1α蛋白及其mRNA和miR-126的表达水平。结果模型组、治疗组mNSS评分均高于对照组,但治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、治疗组缺血半暗区皮质mTOR、HIF-1α蛋白表达水平均高于对照组,但治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、治疗组缺血半暗区皮质mTOR、HIF-1αmRNA表达水平均高于对照组,miR-126表达水平低于对照组,但治疗组mTOR、HIF-1αmRNA表达水平低于模型组,miR-126表达水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组缺血半暗区皮质神经元及电镜下自噬囊泡数量明显增加,细胞结构损坏减轻。结论中风活心软胶囊可显著提高脑缺血大鼠缺血半暗区皮质mTOR、HIF-1α因子表达,其作用机制可能是通过激活miR-126表达进而靶向调控mTOR/HIF-1α信号通路,促进自噬,从而发挥其脑保护效应。

血清IL-33和神经调节蛋白1与帕金森病患者认知障碍的相关性分析

目的探讨帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清IL-33、神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRG1)水平与认知障碍(cognitive impairment,CI)的相关性。方法选取2021年9月至2023年9月邯郸市中医院PD患者115例,根据蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment scale,MoCA)评分将患者分为非CI组(≥26分)69例和CI组(<26分)46例,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-33、NRG1水平,采用Spearman法分析PD患者血清IL-33、NRG1水平与MoCA评分、帕金森病评定量表第Ⅲ部分(unified Parkinson's disease rating scaleⅢ,UPDRSⅢ)评分的相关性,采用多因素logistic回归方程分析PD患者发生CI的影响因素。结果115例患者中男68例、女47例;年龄45~80岁,平均年龄(65.3±8.5)岁。PD患者血清IL-33、NRG1水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.472、-0.601,均P<0.001),与UPDRSⅢ评分呈正相关(r=0.654、0.739,均P<0.001)。多因素logistic回归分析结果显示,年龄越大(OR=2.694,95%CI:1.242~5.843,P=0.012)、受教育年限越低(OR=0.706,95%CI:0.544~0.916,P=0.009)、IL-33水平越高(OR=3.528,95%CI:1.389~8.968,P=0.008)、NRG1水平越高(OR=2.831,95%CI:1.382~5.801,P=0.004)的患者更容易发生CI。结论PD患者血清IL-33、NRG1水平显著升高,且与CI的发生密切相关。可通过动态监测PD患者IL-33、NRG1水平,评估CI的发生风险。

神经调节蛋白1在孤独症谱系障碍发病中的作用

孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)是儿童时期常见的神经发育障碍性疾病,其特征是社交行为障碍,重复的行为和兴趣。ASD的病因尚未明确。神经调节蛋白1(neuregulin1,NRG1)参与ASD发病的过程越来越引起学者重视。NRG1在神经发育、可塑性和修复中起重要作用。NRG1通过影响γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)能神经元及雪旺细胞参与ASD的发病过程,这可能与其参与调节突触可塑性、神经元兴奋性、髓鞘形成及神经系统发育与修复等作用有关。

早期糖尿病肾病患者血清鸢尾素、高迁移率族蛋白Box1、神经调节蛋白4水平变化及临床意义

目的探讨早期糖尿病肾病(DKD)患者血清鸢尾素、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、神经调节蛋白4(NRG4)水平变化及临床意义。方法选取2022年3月至2024年3月郑州大学第一附属医院收治的80例早期DKD患者作为早期DKD组,选取同期50例健康体检人员作为健康对照组,对两组人口学特征、临床资料进行收集,对血清鸢尾素、HMGB1、NRG4水平进行检测,进行单因素与多因素Logistic回归分析,明确早期DKD发生的危险因素。结果两组患者年龄、性别、饮酒史、冠心病史、吸烟史、高血压史、舒张压、收缩压、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);早期DKD组的血清鸢尾素、NRG4水平更低,HMGB1水平更高,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素二元Logistic回归分析结果显示,血清鸢尾素(OR=0.568;95%CI:0.389~0.829)、NRG4(OR=0.456;95%CI:0.246~0.845)是影响早期DKD发生的保护性因素,差异具有统计学意义(P<0.05),HMGB1(OR=2.976;95%CI:2.664~3.325)是独立危险因素,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论早期DKD患者血清鸢尾素、NRG4水平更低,HMGB1水平更高,临床可用血清鸢尾素、HMGB1、NRG4水平对早期DKD发生进行评估。

心肌营养素-1在窒息新生大鼠心肌和外周血血浆中的表达及神经调节蛋白-1的干预作用

目的探讨心肌营养素-1(CT-1)在窒息新生大鼠心肌和外周血血浆中的表达,以及神经调节蛋白-1(NRG-1)的干预作用。方法新生7日龄大鼠90只,随机分成窒息组(n=40)、正常对照组(n=10)和NRG-1预处理组(n=40)。采用颈动脉结扎联合缺氧法制备新生大鼠窒息模型。NRG-1预处理组在缺氧缺血前30min腹腔注射1mg/kgNRG-1。分别在造模后6、12、24、48h各时间点取其外周血和左心室前壁心肌,酶联免疫吸附法检测其外周血血浆CT-1蛋白的表达。采用Western blot检测其心肌CT-1蛋白表达。结果窒息组新生大鼠外周血血浆CT-1的表达在各时间点均显著高于正常对照组,24h达到高峰(Pa<0.05);窒息后24h,新生大鼠外周血血浆CT-1的表达与CK-MB水平呈显著正相关(r=0.733P<0.01)。窒息后新生大鼠心肌中CT-1的表达逐渐增加,在各时间点均显著高于正常对照组(Pa<0.05)。其心肌中CT-1蛋白表达量在24h达高峰(4176.5±341.6),显著高于正常对照组(1211.9±237.7)(P<0.05);窒息后24h,NRG-1预处理组外周血血浆CT-1蛋白表达[(1287.7±18.9)ng/L]显著高于窒息组[(712.5±24.6)ng/L](P<0.05)。结论窒息可导致新生大鼠心肌和外周血血浆CT-1的表达增加。CT-1可能为心肌细胞损害的诊断提供一个新的检测指标。NRG-1可通过诱导CT-1表达上调,产生保护心肌的作用。

神经调节蛋白1β联合卡托普利对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:探讨神经调节蛋白1β(neuregulin-1,NRG-1β)与卡托普利单用及联合应用对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:将青年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、心衰组、NRG-1β干预组、卡托普利干预组和联合用药组。采用腹主动脉-腔静脉穿刺造瘘法制备心衰模型。通过血流动力学和血浆BNP水平评价大鼠心功能,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数;Western blot检测各组大鼠左心室心肌p-Akt、Bax和Bcl-2的蛋白水平。结果:与心衰组比较,NRG-1β组、卡托普利组及联合用药组左心室舒张末压、心肌凋亡指数明显降低,±dp/dt_(max)明显升高差异有统计学意义(P<0.05);Bax蛋白表达明显降低,p-Akt和Bcl-2蛋白水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。而与NRG-1β组和卡托普利组相比,联合用药组效果更加显著(P<0.05)。结论:神经调节蛋白1β与卡托普利单用及联合应用均可有效改善心功能、抑制心肌细胞凋亡,联合用药的疗效优于单独用药。

阿司匹林对局灶性脑缺血-再灌注大鼠神经调节蛋白1和存活素表达的影响

目的观察大鼠局灶性脑缺血-再灌注后(CI/RP)神经调节蛋白1(NRG-1)和存活素(Survivin)的表达规律及阿司匹林对其表达的影响。方法取健康雄性SD大鼠60只,将其随机分为阿司匹林组和对照组,每组30只。每组按再灌注时间分为6、24h及3、5、7d亚组,每个亚组6只大鼠。采用线栓法制作大脑中动脉阻塞(2h)模型。阿司匹林组于再灌注后即刻及每日清晨腹腔注射阿司匹林(80mg/kg,溶解于1.5ml的10%L-赖氨酸等渗盐水溶液中)1次。对照组在相同时间点注射10%L-赖氨酸1.5ml。观察再灌注后不同时间大鼠神经功能缺损评分及NRG-1、存活素的表达。结果①再灌注后24h,3、5、7d神经功能缺损评分,阿司匹林组分别为1.47±0.11、1.22±0.08、0.85±0.15、0.59±0.12,对照组为1.87±0.18、1.45±0.14、1.05±0.08、0.75±0.15,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。②CI/RP后各时间点阿司匹林组和对照组大鼠梗死侧神经元的细胞核及细胞质均有NRG-1和存活素的表达。梗死中心区两种阳性细胞表达数在再灌注后6h最多,随后逐渐减少,7d最少;梗死周边区6h后仅有少量的NRG-1和存活素阳性细胞,3d达高峰,以后逐渐减少,各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。阿司匹林组各时间点NRG-1和存活素阳性细胞数较对照组均多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺血可诱导大鼠神经元NRG-1和存活素的表达;阿司匹林上调缺血后NRG-1的存活素表达,可能是其神经保护作用机制之一。

心肌营养素-1在大鼠缺血再灌注心肌中的表达及神经调节蛋白-1对其表达的促进作用

目的研究大鼠缺血再灌注心肌中心肌营养素-1(CT-1)的表达及神经调节蛋白-1(NRG-1)对其表达的影响。方法制备大鼠缺血再灌注心肌模型,分为模型组(n=8),NRG-1预处理组(n=9),假手术组(n=8)和正常对照组(n=10)。利用RT-PCR技术检测各组CT-1 mRNA表达,计算CT-1 mRNA相对量,并作统计学处理。结果模型组CT-1 mRNA结果(63.96±9.34)高于假手术组(36.16±5.43)和正常对照组(36.84±4.64),三者比较差异有显著性(F=47.37 P<0.01);NRG-1预处理组(89.49±6.99)高于模型组,差异有显著性(t=6.43 P<0.01)。结论大鼠心肌缺血再灌注后CT-1 mRNA表达升高,其原因可能是缺血再灌注激活机体内源性保护机制,NRG-1预处理对心肌的保护作用可能与提高心肌细胞中CT-1的表达有关。实用儿科临床杂志,2006,21(1)

高糖对心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1的影响

背景:糖尿病心肌病的发病机制尚不清楚,神经调节蛋白1具有促进血管再生等作用,糖尿病心肌病的发病是否和心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1下降有关值得进一步研究。目的:观察高糖对心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1的影响。方法:取生长良好的第2代心肌微血管内皮细胞,高糖组加入10mmol/L的葡萄糖,高糖+胰岛素组加入10mmol/L的葡萄糖及10-5U/L的胰岛素,对照组正常培养。培养24h后收集细胞,RT-PCR及Westernblot方法检测神经调节蛋白1mRNA和蛋白的表达。结果与结论:与对照组比较,高糖组心肌微血管内皮细胞神经调节蛋白1mRNA和蛋白的表达明显下降(P<0.05);与高糖组比较,高糖+胰岛素组心肌微血管内皮细胞神经调节蛋白1mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05),与对照组间差异无显著性意义(P>0.05)。说明高糖可抑制心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1mRNA和蛋白,而胰岛素可拮抗此作用。

银杏叶提取物对帕金森患者血清黑质DMT1、葡萄糖调节蛋白75及神经功能的影响研究

目的探讨银杏叶提取物对帕金森患者血清黑质二价金属离子转运蛋白(divalent metal transporter1,DMT1)、葡萄糖调节蛋白75(glucose regulated protein 75,grp75)及神经功能的影响。方法帕金森患者38例,根据用药不同分为对照组和实验组,每组各19例,对照组患者给予多巴丝肼片,实验组在对照组的基础上给予银杏叶提取物片,治疗连续4周。治疗结束后,对所有患者黑质DMT1、grp75及认知功能进行检测。结果与治疗前相比,治疗后2组患者的黑质DMT1水平较低(P<0.05);与对照组相比,实验组患者治疗后黑质DMT1水平较低(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后2组患者的grp75水平较高(P<0.05),与对照组相比,实验组患者治疗后grp75水平较高(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后2组患者的Mo CA评分较高(P<0.05),HAMD评分较低(P<0.05);与对照组相比,实验组患者治疗后Mo CA评分较高(P<0.05),HAMD评分较低(P<0.05)。结论银杏叶提取物能够显著降低帕金森患者黑质DMT1水平,升高grp75水平,改善认知功能。

首发精神分裂症血清神经调节蛋白-1、脑电图γ活动及认知功能相关研究

目的研究首发精神分裂症患者血清中神经调节蛋白-1(NRG-1)水平、脑电图γ活动及认知功能的相关性。方法随机选取2018年1月—2019年8月于山东省青岛市精神卫生中心(以下简称“我院”)就诊的首发精神分裂症患者80例作为研究组,另选取同期我院健康体检人群50名作为对照组。检测两组血清NRG-1水平及脑电图γ活动情况,使用阳性和阴性症状量表(PANSS)评估研究组病情,采用MATRICS公认认知成套测验(MCCB)评估两组认知功能,分析研究组NRG-1水平、脑电图γ活动及认知功能的关系。结果研究组血清NRG-1水平和脑电图γ活动阳性比例高于对照组,而MCCB中的处理速度、注意警觉、工作记忆、语言记忆、视觉记忆及推理解决得分均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与脑电图γ活动阴性患者比较,脑电图γ活动阳性患者NRG-1水平及MCCB各因子得分(处理速度、注意警觉、工作记忆、语言记忆、视觉记忆及推理解决)均降低,而PANSS阳性症状、阴性症状、一般精神病理及总分均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。研究组NRG-1水平与语言记忆及推理解决得分呈正相关(r=0.433、0.554,P<0.01),与PANSS总分呈负相关(r=-0.584,P<0.01)。研究组脑电图γ活动与NRG-1水平、语言记忆及推理解决得分呈负相关(r=-0.520、-0.610、-0.541,P<0.01),与PANSS总分呈正相关(r=0.687,P<0.01)。结论首发精神分裂症患者血清NRG-1水平明显降低,脑电图γ活动明显增多,且二者与患者病情及认知功能均有明显的相关性,临床可据此给予患者早期个性化治疗。

神经调节蛋白1β与卡托普利对慢性心衰大鼠心肌纤维化及转化生长因子β1的影响

目的:探讨神经调节蛋白1β(neuregulin-1β,NRG-1β)与卡托普利联合应用对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化及转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法:将青年雄性SpragueDawley大鼠随机分为假手术组、心衰组、NRG组、卡托普利组和联合用药组,采用腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘法制备心衰模型。通过超声心动图评价大鼠心功能;Masson染色检测心肌纤维化程度,并计算胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);放射免疫法检测血浆中血管紧张素II(Ang II)的浓度;Western blot检测各组大鼠左心室心肌组织中TGF-β1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平;透射电镜观察左室心肌的超微结构。结果:与心衰组比较,NRG组、卡托普利组及联合用药组左心室舒张末直径和心肌纤维化程度明显降低,射血分数明显升高(P<0.05);TGF-β1和α-SMA蛋白表达明显降低(P<0.05);电镜下显示,NRG组、卡托普利组及联合用药组心肌纤维化程度较心衰组明显减轻,而与NRG组和卡托普利组相比,联合用药组效果更加显著(P<0.05)。结论:神经调节蛋白1β与卡托普利单用及联合应用均可有效改善心功能、抑制心肌纤维化,且联合用药的疗效优于单独用药。

神经调节蛋白-1对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

神经调节蛋白-1(neuregulin-1,NRG-1)最早被发现在神经系统发育中起着重要的调节作用。目前研究发现NRG-1及其受体Erb B(erythroblastic leukemia viral oncogene homolog,Erb B)在心肌及血管细胞中高表达,在慢性心衰,扩张性心肌病及心肌梗死中均起到明显的保护作用。近来研究发现NRG-1/Erb B通路在心肌缺血再灌注损伤中也起到保护作用,有望成为治疗心肌缺血再灌注损伤的新药物靶点。多种机制可能参与其中,例如:减少心肌细胞凋亡;减轻心脏氧化应激损伤;抑制炎症反应等。本文将对NRG-1在心肌缺血再灌注损伤中的治疗作用及可能机制进行综述。

首发精神分裂症血清神经调节蛋白-1、脑电图γ活动及认知功能相关研究

目的探讨首发精神分裂症患者血清神经调节蛋白-1(neuregulin-1,NRG-1)浓度变化及静息状态前额叶脑电图γ活动与临床症状和认知功能的相互关系。方法纳入53例首发精神分裂症患者和58名健康对照者,检测其血清NRG-1浓度,使用时频分析法采集脑电图位于前额叶FP1、FP2导联中的γ活动,采用阳性与阴性症状量表(positive and negative syndrome,PANSS)评估患者临床症状,MATRICS公认认知成套测验(MATRICS consensus cognitive battery,MCCB)进行认知功能评估。结果患者组血清NRG-1浓度低于对照组[(7.36±3.96)pg/mL vs.(11.02±8.78) pg/mL],差异有统计学意义(P=0.006)。两组间脑电图γ活动有统计学差异[39(73.6%) vs.14(26.4%),P<0.001]。MCCB测试中患者组连线测验评分高于对照组(P=0.006),符号编码、言语记忆、迷宫、视觉记忆、语义流畅性评分低于对照组(P<0.001)。患者组血清NRG-1浓度与脑电图γ活动(r=-0.542,P<0.001)、PANSS(r=-0.360,P=0.009)及言语记忆(r=0.332,P=0.016)评分相关。脑电图γ活动与PANSS(r=0.278,P=0.046)、言语记忆(r=-0.442,P=0.001)、迷宫测验(r=-0.307,P=0.027)评分分别相关。结论血清NRG-1浓度、脑电图γ活动与首发精神分裂症患者的临床症状及部分认知功能障碍有一定相关性,提示精神分裂症早期即存在神经生化及神经电生理方面的异常反应,且两者相关。

难治性癫痫患者神经调节蛋白1、microRNA-221-3p表达与认知功能的关系

目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本院70例健康体检者纳入对照组。采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估难治性癫痫患者的认知功能受损程度,并根据MoCA总分将难治性癫痫患者分为CD组40例和非CD组24例。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-221-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清NRG1水平,并采用Pearson相关性分析探讨miR-221-3p、NRG1水平与MoCA总分的相关性,采用多因素Logistic回归分析探讨难治性癫痫患者发生CD的影响因素。结果难治性癫痫组血清miR-221-3p、NRG1水平高于对照组、药物控制良好组,差异有统计学意义(P<0.05);CD组血清miR-221-3p、NRG1水平高于非CD组,MoCA总分、空间与执行能力评分、语言评分、延迟记忆评分、计算力与定向评分低于非CD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,难治性癫痫CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平均与MoCA总分呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,NRG1、miR-221-3p均为难治性癫痫患者发生CD的影响因素(P<0.05)。结论难治性癫痫合并CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平较高,且miR-221-3p、NRG1均与难治性癫痫患者CD进程密切相关。

神经调节蛋白1/转化生长因子β1对血管平滑肌细胞骨架的作用

目的探讨神经调节蛋白1/转化生长因子β1(NRG-1/TGF-β1)对血管平滑肌细胞骨架的作用。方法取小鼠血管组织,采用免疫荧光法对NRG-1干预后细胞收缩功能变化进行分析,采用鬼笔环肽、免疫荧光共定位分析NRG-1/TGF-β1表达,采用GST融合蛋白沉降技术检测分析NRG-1-ICD与α-肌动蛋白(α-SMA)的共位性。结果 TGF-β1在人主动脉血管平滑肌细胞中可上调NRG-1表达,经免疫荧光染色可发现平滑肌细胞标志蛋白α-SMA与NRG-1存在共位性;经RT-PCR及Western blot检测分析发现,在大鼠平滑肌细胞、人平滑肌细胞以及人内皮细胞中均存在NRG-1的mRNA表达。结论在转录和翻译水平上TGF-β1可上调NRG-1的表达;在细胞收缩中,TGF-β1对于α-SMA与NRG-1-ICD之间的表达可以起到促进作用。

氯氮平对地卓西平马来酸盐诱导的精神分裂症大鼠前额叶皮质神经调节蛋白1基因表达的影响

目的观察地卓西平马来酸盐(MK-801)诱导的精神分裂症模型大鼠前额叶皮质神经调节蛋白1(NRG-1)的表达及氯氮平干预后的变化,分析NRG-1基因mRNA的表达水平和动物行为之间的关系。方法 79只大鼠分为对照组(n=31)、模型组(n=36)和干预组(n=12)。对照组腹腔注射生理盐水,模型组和干预组大鼠腹腔注射MK-801,干预组大鼠在注射MK-801 5 min后给予氯氮平进行干预。采用自发活动、共济失调、刻板行为、前脉冲抑制(PPI)测试评定大鼠的精神分裂样行为。应用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠前额叶皮质NRG-1mRNA基因各亚型(Hrg、Ggf、Smdf)的表达水平。结果 3组大鼠自发活动90 min总路程、总共济失调评分、总刻板行为评分两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);3组72、74、78 dB下PPI结果两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在药物作用90 min时,模型组大鼠前额叶皮质Hrg mRNA的表达高于对照组和干预组(P<0.05),模型组Smdf mRNA的表达高于干预组(P<0.05)。模型组大鼠前额叶皮质Hrg mRNA在末次药物注射120 min时的表达低于其在0、30、60、90 min的表达(P<0.05)。大鼠前额叶皮质总NRG-1、Hrg和Smdf mRNA表达水平与自发活动的移动路程存在显著相关(P<0.05);Hrg mRNA的表达与刻板行为评分存在相关性(P<0.05)。结论 MK-801和氯氮平可影响大鼠前额叶皮质总NRG-1、Hrg、Smdf mRNA的表达,大鼠前额皮质NRG-1、Hrg、Smdf mRNA的表达水平与精神分裂样行为之间存在相关性;总NRG-1、Hrg、Smdf mRNA可能参与精神分裂症的发病。

精神分裂症与神经调节素1、G72及G-蛋白信号转导调节子4基因的关联研究

目的 探索神经调节素1（NRG1）、G72、G-蛋白信号转导调节子4（RGS4）基因变异的独立或联合作用与精神分裂症的关联。方法 采用酶切或测序方法,对315例精神分裂症患者和347例正常对照者NRG1、G72、RGS4基因的13个单核苷酸多态性（SNPs）位点进行基因型检测和遗传关联分析。应用Lo-gistic回归分析和风险或保护基因型分层后卡方检验评估三基因的交互作用。结果 单位点关联分析发现,NRG1的5个SNPs、G72的1个SNP、RGS4的2个SNPs与精神分裂症关联（P〈0.05）。Logistic回归分析构建了三个基因交互作用模型,各自变量的OR分别为：nrg1=3.58,rgs4=1.24,g72_rs947267=1.45,nrg1＊rgs4=3.03,nrg1＊g72_rs947267=1.06。应用基因型分层后卡方检验表明,三基因存在协同风险效应（OR=2.35～4.05;P〈0.05）。结论 NRG1、G72及RGS4基因的单独或交互作用与精神分裂症关联。