督脉电针结合超短波疗法对大鼠脊髓全横断损伤后脑源性神经生长因子和神经轴突生长抑制剂-A表达的影响

目的:通过检测大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复情况和脑源性神经生长因子(BDNF)、神经轴突生长抑制剂-A(Nogo-A)的表达来探讨联合应用督脉电针和超短波疗法对SCI的作用机制。方法:复制并评价脊髓全横断损伤大鼠模型,100只雌性大鼠随机分为5组:假手术组、SCI组、SCI+督脉电针组、SCI+超短波组、SCI+督脉电针+超短波组(n=20),检测各组7d、14d、21d、28d这4个时间点BDNF和Nogo-A表达,对各组大鼠进行BBB评分。结果:与模型组相比,各治疗组的BBB评分显著增加,联合组在术后第7d、14d、21d、28d较超短波组和督电组BBB评分显著增加,具有显著性差异(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组BDNF的表达均显著增加,Nogo-A的表达均显著减少,联合组在术后第7d、14d、21d、28d较超短波组和督电组BDNF的表达显著增加,Nogo-A的表达显著减少,具有显著性差异(P<0.01)。结论:(1)联合应用督脉电针与超短波治疗,能够提高SCI后BDNF的表达及抑制Nogo-A的表达来促进神经的修复。(2)联合疗法对大鼠运动功能恢复更佳。

神经生长因子及抑制因子对鸡胚背根神经节轴突生长的影响

目的 研究神经生长因子 (NGF)和神经生长抑制因子 (NGI)对鸡胚背根神经节 (DRG)轴突生长的影响。方法 分离培养鸡胚 DRG,加入 NGF、NGI并观察它们对轴突生长的影响。结果 DRG轴突在含 NGF的培养液中迅速生长 ,加入 NGI后这种生长被抑制。结论 NGF可促进 DRG轴突的生长 ,而 NGI抑制它的生长。

中风前抗轴突生长抑制因子DNA免疫促进脑缺血后神经再生(英文)

目的为了澄清中风前抗轴突生长抑制因子DNA免疫对局部脑缺血神经再生的促进作用。方法经腓肠肌注射抗轴突生长抑制因子DNA疫苗免疫动物,每周一次,共6w;血清中检测出相关抗体后,采用永久性阻断大脑中动脉的方法制备左侧局部脑缺血模型,通过立体定向脑内注射生物素化葡聚糖胺(BDA)追踪皮质红核束的新生轴索。结果中风前接受抗轴突生长抑制因子DNA免疫,局部脑缺血后皮质红核束的代偿性新生轴索明显增多。结论中风前抗轴突生长抑制因子DNA免疫可提高永久性局部脑缺血后的神经再生。

髓磷脂相关性轴突生长抑制因子与中枢神经再生

中枢神经系统(CNS)损伤后的再生情况一直是人们比较关注的问题,近几年来,随着髓磷脂(Nogo)等的发现,人们越来越认识到中枢神经髓磷脂中的一些成分在轴突再生中发挥着重要的抑制作用,笔者将与髓磷脂相关的几种轴突生长抑制因子(Nogo,MAG,OMgp,NgR)以及它们对中枢神经轴突再生的抑制作用的研究进展情况作如下综述。

中风后抗轴突生长抑制因子DNA免疫促进局部脑缺血后神经再生(英文)

目的评价中风后给予轴突生长抑制因子DNA疫苗对局部脑缺血后神经再生的促进作用。方法采用阻断大脑中动脉血流成功诱导左侧局部脑缺血后,经腓肠肌注射轴突生长抑制因子DNA疫苗。立体定向注射生物素葡聚糖胺追踪皮质红核投射的新生轴突。结果中风后给予轴突生长抑制因子DNA疫苗可增加跨过中线终止于对侧红核相应区域的生物素葡聚糖胺标记阳性交叉纤维(P<0.05)。结论中风后给予轴突生长抑制因子DNA疫苗可促进局部脑缺血后的轴突再生。

轴突生长抑制因子DNA疫苗对大鼠脑缺血后神经再生的影响

目的研究大鼠轴突生长抑制因子的DNA疫苗(pcDNA3.1(+)-neurite growth inhibitors,pcDNA-NGIs)对局部脑缺血神经再生的影响。方法采用永久性阻断大脑中动脉血流的方法制备雄性SD大鼠左侧局部脑缺血模型,分别在阻断血流前后经腓肠肌注射pcDNA-NGIs免疫动物,每周一次,共6周;血清中检出特异性抗体6周后,立体定向脑内注射生物素化葡聚糖胺追踪皮质红核投射的新生轴索。结果无论是阻断血流前还是阻断血流后给予pcDNA-NGIs,局部脑缺血后皮质红核投射的代偿性新生轴索都明显增多。结论本研究提示,阻断血流前或阻断血流后给予pcDNA-NGIs均可提高局部脑缺血后的神经再生。

基于RhoA/ROCK通路探讨电针心包经穴对急性脑缺血大鼠神经轴突生长抑制因子的影响

目的基于RhoA/ROCK通路观察电针心包经穴对脑缺血大鼠的调控作用,探讨其对急性脑缺血后神经修复的作用机制。方法将90只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、心包经组、肺经组,除空白组和假手术组外,采用颈外动脉插入线栓法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,造模成功后次日,心包经组、肺经组予电针治疗,分别于电针7、14、21 d后取材。HE染色观察梗死区脑组织病理变化,ELISA检测血清Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)Ⅱ含量,免疫组化检测梗死区脑组织RhoA、ROCKⅡ表达,RT-qPCR和Western blot检测梗死区脑组织RhoA、ROCKⅡmRNA和蛋白表达。结果与空白组、假手术组同一时点比较,模型组大鼠梗死区脑组织神经细胞数量减少,细胞核固缩,各时点血清RhoA、ROCKⅡ含量及梗死区脑组织RhoA、ROCKⅡmRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01);与模型组同一时点比较,心包经组大鼠梗死区脑组织神经细胞数量增加,形态结构改善,除7 d血清ROCKⅡ含量外,各时点血清RhoA、ROCKⅡ含量及梗死区脑组织RhoA、ROCKⅡmRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.01,P<0.05),且心包经组作用优于肺经组(P<0.01,P<0.05)。结论电针心包经穴可下调急性脑缺血大鼠神经轴突生长抑制因子表达,其机制可能与抑制RhoA/ROCK通路相关。

不同强度运动预处理对全脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白-43、轴突生长抑制因子Nogo-A表达的影响

目的:探讨不同强度运动预处理对脑缺血大鼠脑组织海马区生长相关蛋白-43(GAP-43)、轴突生长抑制因子-A(Nogo-A)表达的影响。方法:用改良的Pulsinelli四血管阻断(4-VO)法制备SD大鼠全脑缺血再灌注模型,大鼠分为假手术组、脑缺血再灌注组、运动强度1预处理组、运动强度2预处理组。分别在缺血6h、1d、3d、7d时应用H-E染色观察大鼠脑组织海马CA1区神经细胞形态变化;免疫组织化学检测GAP-43、Nogo-A的表达;RT-PCR法检测GAP-43、Nogo-A mRNA的表达。结果:全脑缺血再灌注组神经元密度显著低于运动强度1预处理组,高于运动强度2预处理组;脑缺血再灌注组GAP-43的表达水平显著低于运动强度1预处理组,高于运动强度2预处理组;脑缺血再灌注组Nogo-A的表达水平显著高于运动强度1预处理组,低于运动强度2预处理组。结论:运动强度1预处理可促进神经元细胞的存活;而运动强度2预处理加重神经元细胞的损伤和丢失,其机制与调控脑缺血再灌注大鼠脑组织海马区GAP-43、Nogo-A的表达有关。

急性一氧化碳中毒致迟发性脑病大鼠胼胝体损伤及神经生长抑制因子A的表达

目的：研究急性一氧化碳（ carbon monoxide ， CO ）中毒致迟发性脑病（ delayed neuropsychologic sequelae ， DNS ）大鼠胼胝体的损伤及神经生长抑制因子 A （ neurite outgrowth inhibitor-A， Nogo-A）的表达情况。方法腹腔内分次注射CO气体造成DNS模型，于不同时间点取胼胝体。HE染色观察细胞形态，变色酸染色观察脱髓鞘改变，免疫组化检测观察Nogo-A蛋白表达，荧光定量聚合酶链式反应（ real time polymerase chain reaction ， RT-PCR）检测Nogo-A mRNA表达，电镜观察胼胝体超微结构变化。结果中毒组光镜下胼胝体出现脱髓鞘等变化，以造模成功后0 h变化较明显。免疫组化显示，Nogo-A在各时间点均高表达（P＜0．05）。 RT-PCR于造模成功后0、12、24 h高表达（P＜0．05），0 h为高峰，其后逐渐下降，第3天与对照组比较差异无统计学意义，中毒组第7天表达再次升高（P＜0．05）。电镜下，胼胝体出现相应改变。结论 CO中毒后大鼠胼胝体出现脱髓鞘损伤，且与Nogo-A表达相关。

依达拉奉联合鼠神经生长因子对颅脑外伤患者神经功能损伤修复的效果

目的分析依达拉奉联合鼠神经生长因子(mNGF)对颅脑外伤患者神经功能损伤修复的效果及对血中神经元特异性烯醇化酶(NSE)和轴索过度生长抑制因子-A(Nogo-A)表达水平的影响。方法将收治的105例颅脑外伤患者分为观察组和对照组;对照组采用依达拉奉治疗,观察组采用依达拉奉联合mNGF治疗;治疗前后采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分对患者神经功能及颅脑损伤严重程度进行调查,并检测患者血中神经功能、神经损伤指标、神经递质、炎症因子和应激激素水平;治疗前后检测患者血中NSE和Nogo-A表达水平。结果治疗后,观察组患者NIHSS评分显著低于对照组(P<0.05),GCS评分显著高于对照组(P<0.05);治疗后观察组脑源性神经营养因子(BDNF)水平高于对照组,髓鞘碱性蛋白(MBP)和缺血修饰白蛋白(IMA)水平低于对照组(P<0.05);治疗后观察组血中血管黏附蛋白-1(VAP-1)、强啡肽(Dny-A)、神经肽Y(NPY)、C反应蛋白(CRP)、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、皮质醇(Cor)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、去甲肾上腺素(NE)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平、血中NSE及Nogo-A水平明显低于对照组(P<0.05)。结论依达拉奉联合mNGF治疗颅脑外伤患者可有效改善患者神经功能,加速损伤修复,并有效降低患者血中NSE和Nogo-A表达水平。

针刺阳陵泉穴对缺血性脑卒中大鼠神经功能及血管再生因子Nogo-A、VEGF表达影响

目的 观察针刺阳陵泉穴对缺血性脑卒中大鼠神经功能及血管再生因子轴突生长抑制因子(Nogo-A)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨针刺促进脑重塑的作用机制。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组,采用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型,其中假手术组与模型组无治疗措施,针刺组给予电针双侧阳陵泉穴治疗14 d,各组基于造模术后1 d、术后14 d分为2个亚组,每个亚组各8只,采用TTC染色法检测造模情况,观察各组在不同时点神经功能缺损评分变化,通过ELISA法、RT-PCR技术、免疫组化法分别检测各组大鼠血清、脑组织中Nogo-A、VEGF表达水平。结果 与模型组比较,治疗14 d后针刺组大鼠神经功能缺损评分有所降低(P<0.01);针刺组能明显下调MCAO大鼠血清及脑组织中Nogo-A表达(P<0.05),同时可显著上调VEGF表达(P<0.05)。结论 针刺阳陵泉穴可改善MCAO大鼠神经功能缺损,且其机制可能与抑制Nogo-A表达、上调VEGF表达、促进血管再生有关。

游泳及转笼训练对脑缺血再灌注大鼠神经功能及梗死灶Nogo-A、NgR表达的影响

目的:观察不同强度游泳及转笼训练对脑缺血再灌注大鼠神经轴突生长抑制剂-A(neurite outgrowth inhibitor-A,Nogo-A)、神经轴突生长抑制剂(Nogo receptor,Ng R)表达的影响。方法:将105只Wistar雄性大鼠随机均分为假手术组、对照组和游泳及转笼训练1、2、3组,后4组采用线栓法建立大脑中动脉闭塞实验动物模型,假手术组方法同上,但不阻塞大脑中动脉血流。在造模成功后24h进行游泳及转笼训练,游泳及转笼训练1、2、3组分别于训练后第3天、第7天、第14天行神经功能评分,后处死大鼠取脑免疫组化测定Nogo-A、Ng R阳性蛋白的表达。假手术组、对照组不进行训练。结果:游泳及转笼训练组Bederson行为学评分分别于训练后第3天、第7天、第14天较对照组降低(P<0.05或P<0.01),游泳及转笼训练1、2、3组行为学评分组间比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。对照组脑梗死体积与假手术组比较明显增大(P<0.01),游泳及转笼训练1、2、3组大鼠与对照组比较,脑梗死体积明显减小(P<0.01)。对照组脑梗死组织中Nogo-A表达均明显高于假手术组(P<0.05)。训练后第3天,游泳及转笼训练3组Nogo-A表达明显低于对照组(P<0.05);第7天,游泳及转笼训练1、2、3组Nogo-A表达均明显低于对照组(P<0.05),游泳及转笼训练3组Nogo-A表达明显低于游泳及转笼训练2组(P<0.05);训练后第3天、第7天,游泳及转笼训练2、3组Ng R表达均明显低于对照组(P<0.05),游泳及转笼训练3组Ng R表达明显低于游泳及转笼训练2组(P<0.05);第14天,游泳及转笼训练3组Ng R表达明显低于对照组(P<0.05)及游泳和转笼训练2组(P<0.05)。结论:游泳及转笼训练能促进脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复,且神经功能恢复与康复训练强度呈正相关,其对脑功能的保护作用可能与降低Nogo-A、Ng R表达有关。

神经营养因子与脊髓损伤

脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后局部微环境的改变导致轴突再生困难、患者功能恢复有限,因而,再生策略成为目前该领域的研究热点。常用的再生策略包括：局部神经营养因子（neurotrophic factor,NTF）及轴突生长抑制因子阻滞剂的应用、细胞移植、免疫治疗、组织工程等。其中,NTF因能促进轴突生长而备受关注。

神经轴突生长抑制因子Nogo家族的研究进展

Nogo家族是一类神经轴突生长抑制因子家族,目前成员包括Nogo-A,Nogo-B,Nogo-C三个亚型。Nogo家族成员因C末端具有保守的RHD结构域而归属于RTNs家族,表明它们的分布和功能与内质网密切相关。Nogo家族C末端还具有一个进化保守的66氨基酸的功能段称为Nogo-66,体外表达的Nogo-66片段具有抑制神经突生长的作用。Nogo家族成员结构上的区别主要表现在不同剪切长短的N末端序列。Nogo-A主要在中枢和外周神经系统中广泛分布,Nogo-C主要分布在骨骼肌,而Nogo-B则几乎遍布于各种组织与细胞之中。目前,发现可介导Nogo胞内信号转导通路的受体主要是膜外糖蛋白偶联的NgR和跨膜受体p75NTR组成的共受体,但NgR与Nogo-A在胚胎发育中时空表达并不同步提示可能还有其它受体存在。虽然Nogo家族作为神经轴突生长抑制因子被发现,但越来越多的研究表明其可能在胚胎发育、细胞凋亡或神经退行性变等重大事件中扮演重要角色。本文拟就Nogo家族迄今为止突出的研究进展作一综述,旨在为下一步的功能研究工作提供理论参考和依据。

枳术汤对急性脑梗死大鼠神经功能及海马组织Nogo-A及LPA蛋白表达的影响

目的:探讨枳术汤对急性脑梗死(ACI)大鼠神经功能及海马组织神经轴突生长抑制因子-A (Nogo-A)及溶血磷脂酸(LPA)蛋白表达的影响。方法:采用线栓法制备急性脑梗死大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分成模型组、枳术汤低(6.9 g/kg)、中(13.8 g/kg)、高(27.6 g/kg)剂量组,每组14只。取14只大鼠(只分离血管,不阻塞血流)作为假手术组,枳术汤低、中、高剂量组分别灌胃6.9 g/kg、13.8 g/kg和27.6 g/kg的枳术汤,假手术组和模型组灌胃给予等体积0.9%氯化钠溶液。连续给药14 d后,测定大鼠神经功能缺损评分、血清乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量、脑梗死体积比例、脑含水量和海马组织中Nogo-A和LPA蛋白水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积比例、血清LDH、海马组织Nogo-A和LPA蛋白水平显著增加,血清GSH-Px含量显著降低(P<0.05);与模型组相比,枳术汤低、中、高剂量组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积比例、血清LDH、海马组织Nogo-A和LPA蛋白水平降低,血清GSH-Px含量增加,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:枳术汤能改善ACI大鼠神经功能,减少脑梗死体积比例,其机制可能与枳术汤抑制海马组织Nogo-A和LPA蛋白表达有关。

神经丝氨酸蛋白酶抑制剂(NSP)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后神经功能的修复作用

目的通过检测脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、胶质细胞源性神经生长因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)和轴突生长抑制因子(neurite outgrowth inhibitor A,Nogo-A)的表达情况,来评估神经丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)对急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠神经功能的恢复情况并对其机制进行初步探索。方法 130只成年雄性SD大鼠随机分成3组:SCI组(n=60),用改良Allen′s重物打击法制备SCI模型,鞘内注射生理盐水25μL。NSP组(n=60),大鼠SCI后立即鞘内注射NSP 25μL。正常对照组(n=10),只去除椎板,暴露脊髓,不造成SCI。各组定期行为学观察(BBB评分),Western blot检测SCI局部GDNF和Nogo-A的表达,real-time PCR检测SCI局部BDNF、GDNF和NogoA的表达情况。结果随时间延长,术后SCI组和NSP组大鼠BBB评分均逐渐升高,但是两组并无明显差异。Western blot和real-time PCR显示:急性SCI后1天GDNF表达明显升高,且随时间延长其表达量逐渐降低,同时,在1、3、7和14天各时间点NSP组GDNF表达量均高于SCI组。急性SCI后Nogo-A表达成逐渐升高趋势,同时,NSP组在各时间点的Nogo-A表达量均低于SCI组。real-time PCR显示:SCI 1天后BDNF表达水平显著提高,随时间推移,表达水平逐渐下降;同时,NSP组在1、3、7和14天各时间点BDNF水平均明显低于SCI组。结论急性SCI后,大鼠内源性BDNF、GDNF和Nogo-A的表达水平均升高。外源性给予NSP对大鼠急性SCI后的运动功能无明显改善,但在基因和蛋白质水平对大鼠的神经功能恢复有一定的促进作用。

MCAO大鼠梗死灶对侧皮层Nogo-A的动态变化及电针干预

目的观察脑缺血再灌注大鼠梗死灶对侧皮层不同时期轴突生长抑制因子Nogo-A的动态变化,并探讨电针对梗死灶对侧皮层Nogo-A的调节作用。方法采用改良Zea Longa法制备左侧大脑中动脉闭塞再灌注模型。采用免疫组织化学染色法及透射电镜技术观察电针对IR后1、7、28d各组大鼠脑梗死对侧皮层轴突再生抑制因子Nogo-A表达及神经元细胞形态、超微结构的影响。结果 (1)电针、假穴位、模型3组大鼠与假手术组大鼠相比,在IR后1d、7d梗死对侧皮层Nogo-A的表达均升高(P<0.05),7d最明显,第28天下降至基础水平(P>0.05);电针组大鼠IR后1d、7d脑梗死对侧皮层Nogo-A的表达均低于同期模型组和假穴位组,差异有统计学意义(P<0.05),但假穴位组与模型组同期对比差异无统计学意义(P>0.05)。(2)电针、假穴位、模型3组各时间点大鼠脑梗死对侧皮层出现神经元细胞胞体肿胀、细胞器水肿、核染色质轻度溶解、毛细血管内皮细胞肿胀、管腔狭窄等轻度病理改变,以缺血再灌注后第7天最明显,28d明显减轻。上述病理改变均较同期脑缺血区病变程度明显减轻,且不足以引起支配侧肢体神经功能缺失。电针组大鼠脑梗死对侧皮层神经元细胞、超微结构的改变均较同期模型组、假穴位组减轻。结论电针治疗脑梗死的有效机制可能与其减轻脑细胞超微结构的损害、下调中枢神经轴突生长抑制因子Nogo-A的表达、诱导神经轴突再生、减轻脑梗死后的远隔损害等密切相关。

红景天苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用

目的探讨红景天苷(salidroside,Sal)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(sham)、模型对照组(MCAO组)、红景天苷给药组(MCAO+Sal组)。通过线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,Longa评分法对大鼠神经功能损伤评分,焦油紫染色法对神经细胞内尼氏(Nissl)小体染色,RT-q PCR技术检测大鼠缺血侧脑组织Neun、Nogo-A与Ng R m RNA的表达,Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织Bcl-2、Neun、BDNF、NGF、Nogo-A与Ng R蛋白的表达。结果与MCAO组比较,红景天苷能明显降低神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞的数量,促进Bcl-2、Neun、NGF、BDNF的蛋白表达,降低Nogo-A及其受体Ng R的m RNA及蛋白表达。结论红景天苷能够降低MCAO模型大鼠神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞数目,提高Neun的表达,具有神经保护作用,此作用是通过促进抗凋亡因子Bcl-2及神经营养因子NGF、BDNF的蛋白表达,下调轴突生长抑制因子Nogo-A及其受体Ng R的蛋白表达所实现。

脊髓损伤后轴突再生的研究进展

轴突再生并与靶细胞形成功能性突触是脊髓损伤修复的目标．也是脊髓损伤患者功能恢复的基础。一般来说．脊髓损伤后。损伤神经再生或／和芽生并不少见，但是，因为脊髓损伤后环境中出现一系列不利因素（营养因子减少、抑制因子的释放、瘢痕形成等）使轴突再生或芽生的距离有限，难以穿越损伤部位与残存或未受损的神经形成功能性突触。促进轴突再生的原则是改善抑制再生的环境和提高轴突生长能力．措施主要有轴突生长抑制因子阻滞剂和神经营养因子应用以及免疫治疗等。