长链非编码RNA H19促进血管钙化:基于抑制Bax抑制因子1/视神经萎缩蛋白1通路

目的探讨长链非编码RNAH19(lncRNAH19)是否通过抑制Bax抑制因子1/视神经萎缩蛋白1(BI-1/OPA1)通路促进钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,进而诱导血管钙化。方法β磷酸甘油和氯化钙药物诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)建立细胞钙化模型,将细胞分为5组:对照组(普通培养基培养14 d)、钙化组(钙化培养基培养14 d)、钙化+siH19组(敲低lncRNAH19表达后钙化培养基培养14 d)、钙化+siH19+BI-1-/-组(敲低lncRNA H19和BI-1表达后钙化培养基培养14 d)和钙化+siH19+OPA1-/-组(敲低lncRNA H19和OPA1表达后钙化培养基培养14 d)。另ApoE-/-糖尿病小鼠使用高脂饲料喂养32周建立动物钙化模型。通过茜素红S染色和von Kossa染色检测钙沉积,通过Western blotting测定Runt相关转录因子2(Runx-2)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)观察细胞骨型分化,通过TUNEL染色和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3检测观察细胞凋亡情况。结果血管钙化后,lncRNAH19表达明显上升,BI-1和OPA1表达明显下降,而siRNA敲低lncRNAH19表达后,BI-1和OPA1蛋白表达明显上升;抑制BI-1后,OPA1再次下降(P<0.001)。siRNA敲低lncRNA H19表达后,钙化结节消失,钙含量、Runx-2、BMP-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和细胞凋亡率均显著降低(P<0.001)。siRNA敲低lncRNAH19基础上再抑制BI-1或OPA1蛋白,钙化结节出现,钙含量、Runx-2、BMP-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和细胞凋亡率均显著增加(P<0.001)。结论LncRNAH19通过抑制BI-1/OPA1蛋白通路诱导血管钙化,其可能机制和促进钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡有关。

丝氨酸蛋白酶抑制因子serpins在神经退行性疾病中作用的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制因子(serpins)是一类丝氨酸蛋白酶活性调节剂,可控制炎症因子表达,对补体系统、凝血与免疫反应过程中的蛋白酶具有抑制作用。Serpin家族可在中枢神经系统中表达,参与胚胎发育过程中的轴突发生和突触发生,以及成年突触可塑性和情绪行为控制等生理过程。常见的神经退行性疾病包含帕金森病(PD)、阿尔茨海默病(AD)、肌萎缩侧索硬化(ALS)、亨廷顿病(HD)。本文综述了serpins的基因表达和抑制作用,及其与PD、AD、ALS、HD神经退行性疾病进展的关系。Serpins参与了多种神经退行性疾病进程,靶向调控serpins有望成为治疗神经退行性疾病的一种新策略。

神经纤毛蛋白-1与膜相关转化生长因子-β共表达对调节性T细胞免疫抑制功能的影响

目的探讨神经纤毛蛋白-1（Nrp-1）与膜相关转化生长因子-β（TGF-β）共表达对CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）免疫抑制功能的影响。方法体外培养Balb/c小鼠CD4＋CD25＋Treg细胞，在抗CD3/CD28和脂多糖（LPS）诱导下，给予不同浓度的抗Nrp-1抗体（Ab-Nrp-1）封闭24 h后收集细胞，采用流式细胞分析仪检测细胞表面Nrp-1与膜相关TGF-β表达。分别将不同浓度Ab-Nrp-1封闭1 h后的Treg与小鼠正常CD4＋CD25-T淋巴细胞共培养，观察抗CD3/CD28和LPS诱导下12、24和48 h后对CD4＋CD25-T淋巴细胞增殖能力的影响。结果在抗CD3/CD28和LPS诱导下，Treg表面Nrp-1与膜相关TGF-β表达率明显增加（均P＜0.05），Treg膜相关TGF-β表达随着Ab-Nrp-1浓度的增加逐渐降低，呈明显的浓度依赖性（P＜0.05）；正常Treg与CD4＋CD25-T淋巴细胞共培养后，能显著抑制CD4＋CD25-T淋巴细胞增殖功能（P＜0.05），而不同浓度Ab-Nrp-1处理能逆转抑制作用，其中5μg/ml已达最大效应（P＜0.05），且24 h后作用最强，具有明显的浓度-时间依赖性（P＜0.05）。结论 Treg通过膜相关TGF-β发挥免疫抑制功能，共表达Nrp-1能够明显增强其免疫抑制作用。

鼠神经生长因子对弥漫性轴索损伤患者MBP和S100β蛋白的影响及疗效观察

目的探讨鼠神经生长因子对弥漫性轴索损伤(DAI)患者血清中髓鞘碱性蛋白(MBP)和S100β蛋白的影响及脑保护作用。方法收录符合诊断标准的60例DAI患者并随机分为鼠神经生长因子治疗组和对照组各30例,用ELISA法分别检测2组患者治疗前及治疗后各时间点血清中MBP和S100β蛋白水平,于治疗后的第7、14天对2组患者进行格拉斯哥昏迷评分(GCS),90d后格拉斯哥预后评分(GOS)评判疗效。结果治疗组血清中MBP和S100β蛋白水平显著低于对照组,且治疗组格拉斯哥昏迷评分、预后评分明显高于对照组(P<0.05)。结论鼠神经生长因子可显著降低DAI患者血清中MBP和S100β蛋白表达水平,具有明显神经保护作用。

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂在中枢神经系统免疫性疾病中的研究进展

中枢神经系统免疫性疾病泛指一类由免疫机制介导的神经系统疾病,其发病机制十分复杂,血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)的破坏在其中起着重要的作用。基质金属蛋白酶(matrix metallopro-teinases, MMPs)家族可通过降解基底膜及紧密连接等成分而破坏BBB,近年来研究发现MMP-9及抑制剂组织金属蛋白酶抑制因子-1 (Tissue inhibitor of metalloproteinase-1, TIMP-1)可通过破坏BBB而参与多种中枢神经系统免疫性疾病的疾病进程,并与疾病的严重程度与预后等相关。本文就MMP-9及TIMP-1在几种中枢神经系统免疫性疾病的研究进展做一综述。

组织因子途径抑制物-2和γ-神经突触核蛋白在食管癌中的表达及其与肿瘤细胞浸润、转移和凋亡之间的关系

目的:探讨组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)和γ-神经突触核蛋白(synuclein gamma,SNCG)在食管癌组织中的表达及其与肿瘤浸润、转移和细胞凋亡之间的关系。方法:应用免疫组织化学法检测82例食管癌组织及20例相应癌旁不典型增生组织和54例相应癌旁正常食管组织中TFPI-2、SNCG和基质金属蛋白酶-9(matrix metallo-proteinase-9,MMP-9)的表达,应用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡并计算细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果:TFPI-2和SNCG在食管癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管组织中的阳性表达率分别为30.4%、60.0%、87.0%和63.4%、30.0%、3.7%,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。TFPI-2和SNCG的表达与肿瘤淋巴结转移、浸润深度、TNM分期和分化程度密切相关(P<0.01),但与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位和肿瘤大体分型无关(P>0.05)。食管癌组织中TFPI-2与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.636,P=0.000),而SNCG与MMP-9的表达呈正相关(r=0.393,P=0.000)。TFPI-2和SNCG的表达与AI有关(P<0.05)。结论:TFPI-2可能通过抑制MMP-9的表达诱导细胞凋亡,抑制食管癌细胞的生长和转移,而SNCG可能在此过程中起着相反的作用,TFPI-2和SNCG有望成为有效的肿瘤标志物和肿瘤基因治疗的新靶点。

Bax抑制因子1通过促进视神经萎缩蛋白1表达抑制小鼠动脉血管钙化

目的探讨Bax抑制因子1(BI-1)和视神经萎缩蛋白1(OPA1)蛋白对血管钙化的影响。方法ApoE^(-/-)糖尿病小鼠高脂喂养12周后予以腹腔注射Nε-(1-羧甲基)-L-赖氨酸16周建立血管钙化模型,实验将小鼠分为4组,6只/组:对照组(ApoE^(-/-)小鼠普通饲料喂养)、钙化组(ApoE^(-/-)小鼠建立钙化模型)、钙化+BI-1^(TG)组(血管特异性过表达BI-1的ApoE^(-/-)小鼠建立钙化模型)和钙化+BI-1TG+OPA1-/-组(血管特异性过表达BI-1和基因敲除OPA1的ApoE^(-/-)小鼠建立钙化模型)。另β磷酸甘油诱导血管平滑肌细胞建立细胞钙化模型。使用von Kossa染色检测血管钙化程度,使用ELISA检测主动脉钙含量,使用免疫组织化学方法检测Runt相关转录因子2和骨形态发生蛋白2表达、使用TUNEL检测细胞凋亡率,使用Westernblot检测BI-1、OPA1、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3水平的表达。结果血管钙化后,BI-1和OPA1蛋白表达均下降(P=0.0044),钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达增加(P=0.0041)。过表达BI-1促进OPA1蛋白表达,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达均减少(P=0.0006)。基因敲除OPA1蛋白后,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3又明显增多(P=0.0007)。结论BI-1可能通过促进OPA1表达,减轻钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,继而抑制血管钙化。

医用臭氧通过下调神经病理性痛大鼠核因子κB/核因子κB抑制蛋白α/核因子κB抑制蛋白激酶β的表达发挥镇痛效应

目的观察医用臭氧(OZ)对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)致神经病理性痛大鼠的镇痛作用及对核因子κB(NF-κB)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)及核因子κB抑制蛋白激酶β(IKKβ)表达水平的影响。方法采用CCI法复制大鼠神经病理性痛动物模型,同时给予不同剂量(0.8、0.4、0.2ml)的OZ予以干预,用Von Frey纤维丝机械刺激触痛仪及冷板测痛仪测定不同剂量OZ对CCI大鼠的机械缩足反射阈值与冷缩足反射阈值的影响;用RT-PCR法和Western blotting法检测不同剂量OZ对CCI大鼠脊髓组织NF-κB p65、IκBα及IKKβmRNA和蛋白表达水平的影响。结果与CCI神经病理性痛模型组比较,OZ 0.8、0.4ml剂量升高CCI大鼠机械缩足反射阈值,降低冷缩足反射阈值(P<0.05,P<0.01);OZ 0.8、0.4ml剂量可下调CCI大鼠脊髓组织NF-κB p65、IκBα及IKKβmRNA和蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论 OZ对CCI致神经病理性痛大鼠有镇痛作用,其机制可能与下调NF-κB p65、IκBα及IKKβ的表达有关。

血纤维蛋白溶酶原激活因子及其抑制因子在神经系统的作用

血纤维蛋白溶酶原激活因子（ＰＡ）和血纤维蛋白溶酶原激活因子的抑制因子（ＰＡＩ）与神经肌肉系统的生长发育有十分密切关系。ＰＡ对神经细胞的增殖、迁移、神经的变性与再生和对肌肉卫星细胞的融合以及对神经肌肉间突触的构成和可塑性都有明显的作用。而ＰＡ和ＰＡＩ间的平衡失调，对早老性痴呆、脑瘤、肌萎缩性侧索硬化症的发生发展有关。

血清脑源性神经营养因子、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1水平与高血压脑出血患者神经功能的相关性

目的探讨血清脑源性神经营养因子(BDNF)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1 (TIMP-1)水平与高血压脑出血(HICH)患者神经功能的相关性。方法采用前瞻性随机试验方法,选取开封市人民医院2018年2月至2019年6月收治的92例HICH患者作为研究对象,所有患者均接受脑卒中量表(NIHSS)评估,根据NIHSS评分分为轻度组和中、重度组,对两组BDNF、TIMP-1水平进行检测,比较两组水平差异,分析BDNF、TIMP-1水平与神经功能的相关性。结果 92例HICH患者中有64例患者NIHSS评分<5分,占69.57%,将其纳入轻度组;有28例患者NIHSS评分≥5分,占30.43%,将其纳入中、重度组;两组年龄、性别、BMI对比,差异无统计学意义(P>0.05);中、重度组BDNF水平低于轻度组,TIMP-1水平高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistics回归分析结果显示,BDNF水平降低、TIMP-1水平升高是导致HICH患者神经功能缺损的影响因素(OR>1,P<0.05)。结论 HICH患者BDNF、TIMP-1水平与神经功能密切相关,其中BDNF水平降低,TIMP-1水平升高,均会加重患者神经功能损伤,故临床可通过调节BDNF、TIMP-1水平改善患者神经功能,促进其预后。

神经生长抑制因子A、高迁移率蛋白-1、Adropin蛋白对脑出血的诊断价值

目的分析神经生长抑制因子A(Nogo-A)、高迁移率蛋白-1(HMGB-1)、Adropin蛋白对脑出血的诊断价值。方法选取2018年5月-2020年5月浙江省温州市人民医院收治的脑出血患者51例为脑出血组,另选取同时期在该院体检的体检健康者50例为健康对照组,采用酶联免疫吸附法检测Nogo-A、HMGB-1、Adropin表达水平,分析Nogo-A、HMGB-1、Adropin水平对脑出血的诊断价值。结果与健康对照组相比,脑出血组Nogo-A、HMGB-1表达量较高,Adropin表达量较低,差异有统计学意义(P<0.05)。血清Nogo-A、HMGB-1、Adropin诊断脑出血的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.761(95%CI:0.883~1.00,P<0.01),0.844(95%CI:0.816~0.985,P<0.01),0.892(95%CI:0.869~0.984,P<0.01),三者联合诊断的AUC为0.944(95%CI:0.883~1.964,P<0.01)。结论Nogo-A、HMGB-1在脑出血患者血清中表达升高,Adropin蛋白在脑出血患者血清中表达降低,对脑出血具有一定的诊断价值,其中三项联合对脑出血的诊断价值较高。

针灸督脉经穴对血管性痴呆大鼠神经再生抑制蛋白Nogo及其受体复合体影响

目的:观察比较针刺疗法、艾灸疗法和针刺联合艾灸疗法对血管性痴呆大鼠学习、记忆功能是否有改善的作用及神经再生抑制因子勿动蛋白(Nogo-A)、勿动蛋白受体(Ng R)、其受体复合体(LINGO-1)的调控作用。探讨针刺联合艾灸疗法,对血管性痴呆的学习、记忆改善作用的疗效较单一疗法差异及各自优势。方法:采用双侧颈总动脉同时反复夹闭、腹腔注射硝普钠注射液法复制大鼠模型,造模术后的大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺治疗组、艾灸组、针刺联合艾灸治疗组5组,各组分为脑缺血术后7、14、21 d 3个亚组。对每组进行学习、记忆功能评定,于术后3个不同时间点,应用免疫组织化学显色法、Western Blot检测技术,检测分析Nogo-A蛋白、Ng R及LINGO-1在大鼠海马中的表达情况。结果:针刺治疗组,艾灸治疗组,针刺联合艾灸治疗组大鼠学习、记忆功能均得到改善,海马区的Nogo-A、受体Ng R蛋白及其受体复合体(LINGO-1)的表达均降低;且针刺联合艾灸治疗组学习、记忆改善较针刺治疗、艾灸治疗更加显著,Nogo-A、Ng R蛋白及LINGO-1蛋白表达也较针刺治疗、艾灸治疗组低。结论:针刺疗法、艾灸疗法能改善血管性痴呆大鼠学习记忆功能,且针刺联合艾灸治疗优于单纯针刺治疗和艾灸治疗。

神经生长抑制因子研究进展

神经生长抑制因子 (neuronalgrowthinhibitoryfactor,GIF)又名金属硫蛋白 Ⅲ (metallothionein Ⅲ ,MT Ⅲ ) ,特异分布于中枢神经系统 (CNS) ,是神经系统中第一个被鉴定的具有神经元生长抑制功能的蛋白 .GIF一级序列、高级结构、金属结合特性类似于其他MTs,基因结构也与其他MTs高度同源 ,但表达调控途径相异 .GIF可能以其 β结构域的CPCP区 ,与脑组织提取物中的相关因子结合 ,进而表现其生物学功能 .

热休克蛋白70大鼠脑弥漫性轴索损伤后神经元保护及修复作用研究

目的探讨大鼠脑弥漫性轴索损伤(diffuseaxonalinjuries,DAI)后不同时期脑皮层组织中热休克蛋白(heatshockproteins,HSP)70的表达,为临床治疗脑损伤寻求有效手段。方法制作大鼠DAI模型,分别在伤后6、24、48、72h,7d以免疫组织化学方法检测大鼠脑皮层成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达,分析其含量变化特点。结果DAI后24hHSP表达增加,48h达高峰,7d后仍维持较高水平。结论bFGF在各时间点表达有明显差异,提示其参与脑损伤后神经元保护及修复过程。

电针联合右侧正中神经刺激对弥漫性轴索损伤患者动作运用及视运动组织障碍的影响

目的探索电针联合右侧正中神经刺激治疗对弥漫性轴索损伤(DAI)Ⅱ型患者动作运用及视运动组织障碍的疗效和可能的作用机制。方法采用随机数字表法将97例DAIⅡ型青少年患者分为治疗组49例和对照组48例。对照组采用西医常规治疗,连续6周。治疗组在常规治疗基础上加用电针联合右侧正中神经刺激,每次30 min,每日2次,7 d为1个疗程,共4个疗程,疗程间隔1 d。比较2组治疗前后第2版洛文斯顿作业疗法认知量表(LOTCA)动作运用及视运动组织评分、P3潜伏期和波幅;比较2组治疗前后血清脑源性神经营养因子(BDNF)、微管相关蛋白(Tau)、核因子E2相关因子2(Nrf2)及乙酰胆碱脂酶(AchE)浓度和活性。结果治疗过程中治疗组脱落4例,对照组脱落6例。与本组治疗前比较,2组治疗后LOTCA动作运用及视运动组织评分升高,P3潜伏期缩短,血清BDNF、Tau、Nrf2浓度升高,AchE浓度下降(P<0.05),P3波幅、AchE活性比较差异无统计学意义(P>0.05);2组治疗后比较,治疗组LOTCA动作运用及视运动组织评分均显著高于对照组(P<0.05),P3潜伏期显著短于对照组(P<0.05),血清BDNF、Tau、Nrf2浓度均显著高于对照组(P<0.05),AchE浓度显著低于对照组(P<0.05),P3波幅、AchE活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针联合右侧正中神经刺激对DAIⅡ型患者动作运用及视运动组织功能障碍有明显改善作用,Tau、Nrf2、BDNF、AchE可能在其机制中发挥一定作用。

基质金属蛋白酶-2及其抑制因子TIMP-2在脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子TIMP-2的表达及其与脑胶质瘤恶性程度之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测并比较了67例不同级别胶质瘤组织和10例正常脑组织中MMP-2和TIMP-2蛋白的表达情况。结果随着肿瘤恶性程度的增加,MMP-2蛋白表达增高而TIMP-2蛋白表达降低。结论MMP-2及TIMP-2对胶质瘤恶性程度的评估有重要的意义。

神经突再生抑制因子Nogo研究进展

髓磷脂所表达的Nogo蛋白可能是阻止中枢神经再生的关键因素。nogo基因的克隆成功是近年神经再生研究的一个重要进展。nogo基因至少编码三种蛋白质 ,分别称为Nogo A、Nogo B和Nogo C。Nogo A即以前所指的NI 2 5 0。Nogo A的单克隆抗体IN 1,能中和Nogo对神经突起再生的抑制作用 ,促使受损的神经纤维再生 ,并使神经功能得到部分恢复。本文介绍Nogo的研究概况。

核因子κB抑制物在糖尿病周围神经病变中的研究进展

对于糖尿病周围神经病变(DPN),目前只是对症治疗,还没有具体的预防或治疗措施。而炎症参与了DPN的发生、发展且涉及一个复杂的分子网络和过程。在DPN动物模型和临床试验中,抗炎药物的应用逐渐受到重视。且Toll样受体4、核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制剂蛋白和NF-κB抑制剂激酶等髓样分化蛋白88依赖型/非依赖型信号通路中的关键蛋白分子也参与了DPN的病程进展,其中NF-κB主要调控炎症反应。可见,使用NF-κB抑制物对于减缓DPN有重要作用,通过抑制NF-κB炎症信号通路来缓解糖尿病神经病理病变可能是未来治疗DPN的一个新方向。

细胞因子信号传导抑制蛋白-3(SOCS-3)作用的研究进展

细胞因子信号传导抑制蛋白-3(SOCS-3)可以对多种细胞因子和激素(包括LIF,IL-11,生长激素,胰岛素和瘦素)产生的信号传导过程进行负性调节,这些信号传导过程的作用涉及到启动免疫反应,控制炎症过程,调节生长发育以及淋巴细胞的分化等方面。最新研究表明,SOCS-3与中枢神经系统的免疫、炎症反应和人体肥胖等有着重要的联系,本文主要就SOCS-3这两方面的作用作一综述。