戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素和神经营养因子-4表达的变化及灵芝孢子粉的干预作用

目的:观察戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素(N-cadherin)和神经营养因子-4(NT-4)表达的变化及灵芝孢子粉的干预治疗作用,研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法:健康雄性Wistar实验大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组均用致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化和Westernblotting检测皮质和海马区N-cadherin和NT-4的变化。结果:实验性癫痫大鼠模型制作成功,灵芝孢子粉组和癫痫模型组实验动物均达到点燃标准,与癫痫模型组动物相比,灵芝孢子粉组大鼠潜伏期明显延长,但持续时间无显著差异。免疫组化和Western blotting检测实验结果表明:癫痫模型组实验大鼠脑海马和皮质N-cadherin含量比正常对照组增高(P<0.01);灵芝孢子粉组N-cadherins含量比癫痫模型组下降(P<0.01)。同时癫痫模型组大脑海马和皮质NT-4含量比正常对照组增加(P<0.05);灵芝孢子粉组NT-4含量比癫痫模型组增加(P<0.01)。结论:灵芝孢子粉能够降低N-cadherin的表达,调整病变神经元兴奋性,起到抗癫痫作用,还能增强NT-4的表达从而减轻癫痫发作对神经系统的损伤。

大鼠纤维化心肌组织中神经钙黏附素蛋白的表达变化

目的研究异丙肾上腺素致大鼠心肌纤维化中神经钙黏附素(N-cadherin)蛋白在心肌组织中的表达,为探讨心肌纤维化的信号转导机制和逆转心肌纤维化提供形态学资料。方法健康成年SD大鼠注射ISO,造成心肌纤维化模型;取心肌组织,常规石蜡切片,Masson染色,观察心肌组织胶原纤维改变;免疫组织化学和免疫荧光染色检测N-cadherin的表达及分布;RT-PCR方法检测大鼠心肌组织的N-cadherin蛋白的m RNA的表达变化;利用图像分析软件对N-cadherin蛋白的免疫组化结果进行定量分析。结果免疫组化和免疫荧光结果显示,实验组与对照组相比N-cadherin蛋白表达位置存在动态变化,表达量无显著差异;RT-PCR方法检测大鼠心肌组织的N-cadherin m RNA的表达与免疫组化结果具有一致性。结论 N-cadherin蛋白可能是维持心肌结构和生理功能所必需的。

神经钙黏素、可溶性细胞间黏附分子-1与血管内皮生长因子在多发性骨髓瘤患者中的表达及临床意义

目的探讨神经钙黏素(N-Cadherin)、可溶性细胞间黏附分子-1(s ICAM-1),以及血管内皮生长因子(VEGF)在多发性骨髓瘤患者中的表达及临床意义。方法选取70例多发性骨髓瘤患者(观察组)和同期70名健康志愿者(对照组)作为研究对象,采用流式细胞术检测2组血清N-Cadherin阳性细胞在CD138^+/CD38^+细胞中的比例以表示N-Cadherin的表达水平,采用ELISA测定2组血清s ICAM-1和VEGF的表达水平,比较N-Cadherin、s ICAM-1及VEGF在不同临床分期患者中的差异。结果观察组血清N-Cadherin、s ICAM-1和VEGF表达水平均高于对照组(P均<0.05);不同临床分期患者血清N-Cadherin表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);不同临床分期患者血清s ICAM-1及VEGF表达水平比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论 N-Cadherin在多发性骨髓瘤患者中呈高表达,但与疾病分期无关,而s ICAM-1及VEGF水平的检测对于判断多发性骨髓瘤的发生及病程进展可能有重要参考意义。

宫颈癌患者中神经钙黏素和转铁蛋白受体1的表达情况及临床意义

目的探讨宫颈癌患者中神经钙黏素(N-cad)和转铁蛋白受体1(TfR1)的表达情况及临床意义。方法选择65例宫颈癌患者、38例慢性宫颈炎患者、37例健康体检者分别作为宫颈癌组、慢性宫颈炎组、对照组。检测并比较3组研究对象的N-cad和TfR1表达情况,分析不同临床特征宫颈癌患者宫颈癌组织中N-cad和TfR1的表达情况。采用Logistic回归模型分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果宫颈癌患者中N-cad和TfR1的阳性表达率均高于慢性宫颈炎组和对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同临床分期、淋巴结转移情况、病理分化程度的宫颈癌患者宫颈癌组织中N-cad和TfR1的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Spearman相关性分析结果显示,宫颈癌患者中N-cad、TfR1的表达与淋巴结转移和临床分期均呈正相关,与病理分化程度均呈负相关(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,低分化、临床分期为Ⅱ期、有淋巴结转移、N-cad阳性、TfR1阳性均是宫颈癌患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论宫颈癌患者中N-cad和TfR1的阳性表达率较高,且其表达与宫颈癌患者的淋巴结转移情况、病理分化程度、临床分期有关。

上皮钙黏素/连环素复合体对大鼠神经干细胞增殖作用的影响

目的探讨E-钙黏素/连环素(E-cadherin/catenin)复合体对神经干细胞(NSCs)增殖作用的影响。方法从胎鼠脑组织中分离、培养NSCs,制备细胞悬液,随机分为正常组、实验1组、实验2组。克隆大鼠E-cadherin全长于慢病毒(Lentivirus),转染至实验1组NSCs;采用si RNA法将E-cadherin对应片段克隆进入Lentivirus载体,转染至实验2组。RT-PCR及Western印迹方法检测各组细胞E-cadherin、β-catenin、p120-ctn的m RNA及蛋白表达水平。以MTT法绘制细胞生长曲线,免疫荧光染色标记计数Nestin、Brd U阳性细胞数目。结果实验1组E-cadherin、β-catenin、p120-ctn的m RNA及蛋白表达水平均显著高于正常组,但NSCs增长率及Brd U阳性细胞数目显著低于正常组(P<0.05);实验2组E-cadherin、β-catenin、p120-ctn的m RNA及蛋白表达水平显著低于正常组,但NSCs增长率及Nestin、Brd U阳性细胞数目均显著高于正常组(P<0.05)。结论下调E-cadherin/catenin复合体的表达可能促进体外培养的NSCs增殖。

神经上皮钙黏素蛋白转换对膀胱癌患者术后生存状况的预测价值

目的探讨神经上皮(N-E)钙黏素蛋白转换对预测膀胱癌患者术后复发及预后的价值。方法选取膀胱癌患者50例作为临床研究对象。所有患者术前、术后均采用免疫组织化学SP法检测膀胱癌组织N-钙黏素蛋白、E-钙黏素蛋白的表达及N-E钙黏素蛋白转换情况。结果患者术后N-钙黏素蛋白表达阳性率为24.00%,较术前N-钙黏素蛋白表达阳性率明显降低;E-钙黏素蛋白的阴性表达率为64.00%,较术前E-钙黏素蛋白的阴性率明显升高;且N-E钙黏素蛋白转换率为26.00%,较术前N-E钙黏素蛋白转换率明显降低。N-钙黏素蛋白的表达阳性率、E-钙黏素蛋白阴性表达及N-E钙黏素蛋白转换与肿瘤低分化、高临床分期呈正相关。术后6个月、1年、3年后N-E钙黏素蛋白转换患者肿瘤复发率分别16.67%、33.33%、66.67%,均明显高于N-E钙黏素蛋白未转换患者,且术后1年、3年后生存率较N-E钙黏素蛋白未转换组低。N-E钙黏素蛋白转换患者术后肿瘤复发的平均间隔时间及肿瘤相关总生存期明显短于N-E钙黏素蛋白未转换患者,P<0.05,具有统计学意义。结论 N-E钙黏素蛋白转换是影响膀胱癌患者术后复发率、复发间隔时间及总生存期的重要因素,是预测膀胱癌术后生存状况的有效生化指标。

MMP-19在胃腺癌中的表达及与神经型钙黏素的相关性

目的:检测胃腺癌组织中基质金属蛋白酶-19(matrix metalloproteinase-19,MMP-19)的表达,探讨其与神经型钙黏素(N-cadherin,N-cad)的关联性,分析其预后价值。方法:收集在华北理工大学附属医院确诊为胃腺癌并行根治性手术治疗的患者64例作为研究对象,留取肿瘤组织作为观察组,留取正常胃黏膜组织作为对照组。采用免疫组化法检测2组中MMP-19、胃腺癌中N-cad的表达,采用Western blot检测2组中MMP-19蛋白的半定量表达情况。选择胃癌MGC803细胞系,建立siMMP-19组、空载体转染组和空白对照组,应用Western blot检测N-cad的表达。结果:免疫组化结果显示,MMP-19在胃腺癌组织中表达的阳性率明显高于正常胃黏膜组织(57.8%vs.23.4%,χ^(2)=15.68,P=0.001)。MMP-19在不同浸润深度(57.8%vs.37.9%,χ^(2)=8.59,P=0.001)、有无癌栓(83.3%vs.47.80%,χ^(2)=6.69,P=0.010)、淋巴结转移分组(27.7%%vs.47.6%,χ^(2)=5.21,P=0.023)中的表达差别有统计学意义。生存分析显示MMP-19的表达与生存时间有关(P=0.020)。Pearson相关分析显示MMP-19与N-cad正相关(r=0.62,P=0.013)。Western blot结果显示观察组中MMP-19的半定量表达明显高于对照组(1.68±0.23 vs.1.10±0.24,χ^(2)=5.32,P=0.020)。siMMP-19组中N-cad的表达明显低于空载体转染组及空白对照组。结论:MMP-19在胃腺癌组织中表达升高,参与肿瘤的形成和进展。胃腺癌组织中MMP-19与N-cad正相关。检测MMP-19的表达可能对判断胃腺癌的预后有一定价值。

电针对面神经损伤后上皮钙黏素和钙调素在面神经元中表达的影响

目的观察兔面神经周围支损伤后,电针对上皮钙黏素(E-cad)和钙调素(CaM)在中枢面神经元表达的影响及两者的相关性,探讨电针促进周围面神经再生可能的作用方式和途径。方法新西兰大白兔52只,设立正常组(4只,不做任何处理)、手术组(24只,建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型)和电针组(24只,建模后穴位电针治疗)。手术组和电针组于术后1、4、7、14、21、28 d取材,采用免疫组化法和实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测面神经元中E-cad和CaM的表达,分析其相关性。结果电针组兔周围性面瘫症状较手术组恢复快且完全。免疫组化显示,除术后14 d(E-cad)和术后21 d(CaM),电针组E-Cad和CaM阳性细胞数均明显多于手术组(P <0.001,P <0.05)。电针组面神经元E-cad和CaM的相对表达量均较手术组及正常组高(P <0.05)。2组E-cad和CaM的表达有关联性。结论电针能有效治疗周围性面瘫,并可能通过促进面神经元中E-cad和CaM的高表达,使表达高峰提前并延长,发挥面神经元保护的作用,从而促进周围面神经再生。

电针对面神经损伤后面神经元中神经型钙黏素、上皮型钙黏素和胎盘型钙黏素表达的影响

背景:作者所在课题组前期研究发现周围性面神经损伤能引起神经元中黏附分子的表达变化,而电针穴位治疗周围性面神经损伤的机制尚不清楚。目的:探讨电针穴位在面神经外周部受损后对中枢面神经元的形态学变化及面神经元中神经型钙黏素、上皮型钙黏素及胎盘型钙黏素表达的影响。方法:将新西兰大白兔随机分为正常对照组(n=4)、面神经损伤组(n=24)和电针组(n=24)。面神经损伤组与电针组均建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型。造模成功后每天对电针组实验兔颊车、地仓、翳风、颧缪、四白、阳白电刺激,选择频率为18-20 Hz、电压为1.5 V的疏密波,另外埋针合谷穴不予以电刺激,针灸每次30 min,1次/d。结果与结论:(1)原位杂交结果显示各组兔面神经元中均未见上皮型钙黏素和胎盘型钙黏素mRNA表达,且正常对照组兔面神经元中未见神经型钙黏素mRNA表达,而面神经损伤组和电针组兔面神经元中出现神经型钙黏素mRNA的阳性表达,电针组兔面神经元中神经型钙黏素mRNA阳性细胞数均多于面神经损伤组(P<0.05);(2)免疫组化染色可见正常对照组兔面神经元中神经型钙黏素、上皮型钙黏素和胎盘型钙黏素蛋白表达;损伤后1 d时三者表达下降(电针组神经型钙黏素蛋白除外);损伤后1,4,14 d时电针组兔面神经元中神经型钙黏素和胎盘型钙黏素蛋白表达高于面神经损伤组(P<0.05);损伤后各时间点,电针组上皮型钙黏素蛋白表达均高于面神经损伤组(1 d时除外)(P<0.05);(3)苏木精-伊红染色可见面神经损伤组逐渐出现面神经元变性及类似神经元死亡表现,21 d时神经元开始恢复。电针组变性及类似死亡表现的神经元较面神经损伤组少,且14 d时神经元开始恢复,28 d时2组神经元形态均基本恢复;(4)提示面神经损伤引起了钙黏素的表达变化,电针治疗减轻了面神经元的变性并促进神经元恢复,这可能与电针促进面神经元中经典钙黏素的高表达密切相关。

EGFR敏感突变晚期NSCLC患者应用盐酸埃克替尼靶向治疗对患者神经钙黏素表达的影响

目的:探究表皮生长因子受体(EGFR)敏感突变晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者应用盐酸埃克替尼靶向治疗对患者神经钙黏素表达的干预。方法:选取2015年4月~2018年7月某院收治的EGFR敏感突变晚期NSCLC患者80例,根据治疗方式不同,将其分为观察组和对照组各40例,对照组给予吉非替尼,观察组采用盐酸埃克替尼。治疗8周后,记录两组神经钙黏素mRNA表达量、卡氏(KPS)评分、疾病进展时间与平均生存时间、不良反应。结果:与治疗前比,两组治疗后神经钙黏素mRNA下降,且观察组低于对照组(P<0.01);治疗后两组患者KFS评分明显升高,且观察组明显高于对照组(P<0.01)。观察组平均生存时间较对照组延长(P<0.01)。观察组不良反应发生率为55.00%,低于对照组的77.50%(P<0.05)。结论:盐酸埃克替尼可以降低EGFR敏感突变晚期NSCLC患者神经钙黏素mRNA的表达,可以延长患者生存时间,安全性较好。

磷酸化神经型钙黏素和磷酸化连环蛋白在胃癌中的共表达及临床意义

目的 观察磷酸化神经型钙黏素（ p-N-cadherin ）（ p-β-catenin） 蛋白在胃癌组织中表达水平，探讨其与临床病理参数的相关性及其临床意义。方法 选择手术切除的78例胃癌组织标本为试验组，胃癌旁组织68例，以及正常胃黏膜组织36例为对照组。应用免疫组织化学法检测胃癌组织、癌旁组织和正常组织中的p-N-cadherin 和p-β-catenin蛋白的表达情况，用SPSS13.0统计软件对p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白的表达差异及其与患者的临床病理特征进行统计学分析。结果 p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白在胃癌中阳性表达率分别为82.1 % （ 64 / 78 ） 和84.6 % （ 66 / 78 ） ，与癌旁组织76.5 % （ 52 / 68 ） 和75 % （ 51 / 68 ）比较无明显差异 （ P 〉 0.05 ），但两者与对照组11.1 % （ 4 / 36 ） 和13.9 % （ 5 / 36 ）比较有明显统计学差异（P 〈 0.01 ）。在试验组中，p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白表达与患者的年龄、性别和类型均无明显统计学差异，而与肿瘤的分化程度、TNM 分期和淋巴结转移相关[ p-N-cadherin： 74.4% vs 91.4 % ，73.3 % vs 87.5 % ，73.6 % vs 90.0 %; p-β-catenin： 76.7 % vs 94.2 % , 73.3 % vs 91.7 %, 76.3 % vs 92.5 % （ P均 〈 0.05 ）]。结论 p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白在胃癌组织中表达明显上调，二者呈正相关，可联合作为评估胃癌恶性生物学行为和预后指标。

乳腺癌中乙醛脱氢酶1与上皮性钙黏蛋白、神经性钙黏蛋白关系的研究

乳腺癌干细胞是一类具有自我更新及多向分化潜能的原始细胞，在一定条件下可以分化成多种不同功能的细胞，从而影响乳腺癌的发生、发展、转移、耐药及复发等生物学行为[1]。上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition， EMT）在乳腺癌浸润转移过程中起着重要作用。本实验应用免疫组织化学方法研究乳腺癌干细胞标志物乙醛脱氢酶1（ALDH1）蛋白与 EMT 标志蛋白上皮性钙黏蛋白（E-cadherin）、神经性钙黏蛋白（N-cadherin）在正常乳腺组织、乳腺癌、转移性淋巴组织中的表达情况，探讨乳腺癌干细胞与乳腺癌浸润转移的关系。

急性缺血性脑卒中患者GAL-3、MCP-1、VE-cad表达水平及其与神经功能缺损的相关性分析

目的探讨急性缺血性脑卒中患者半乳糖凝集素-3(GAL-3)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和血管内皮钙黏蛋白(VE-cad)的表达水平,以及这些水平与神经功能缺失之间的相关性。方法回顾性收集2019年1月至2021年2月我院接诊的113名急性缺血性脑卒中患者的临床资料作为观察组,另选同期在我院进行体检的113例健康体检者体检资料作为对照组,比较两组血清GAL-3、MCP-1、VE-cad水平。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,将急性缺血性脑卒中患者分为轻度缺损组(42例)、中度缺损组(44例)及重度缺损组(27例),比较3组血清GAL-3、MCP-1、VE-cad水平,并采用Spearman相关性检验来探究血清GAL-3、MCP-1、VE-cad水平与急性缺血性脑卒中患者神经功能缺损程度之间的相关性。结果观察组的血清GAL-3、MCP-1、VE-cad水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。同时,轻度缺损组的血清GAL-3、MCP-1、VE-cad水平低于中度和重度缺损组,差异有统计学意义(P<0.05),中度缺损组则低于重度缺损组。血清GAL-3、MCP-1、VE-cad水平与神经功能缺损程度均呈显著正相关(r=0.826、0.883、0.923,P<0.05)。结论血清GAL-3、MCP-1、VE-cad水平与急性缺血性脑卒中患者神经功能缺损程度呈显著正相关关系。

Twist 和N-cadherin 在人脑神经胶质瘤中的表达及意义

探讨人脑胶质瘤中,转录因子Twist 、神经钙黏素( N-cadherin)表达特点及意义。方法:抽取43例胶质瘤患者,设定为胶质瘤组;32例颅脑损伤患者为对照组(手术中将相对正常组织切除),应用实时荧光定量PCR法检测,记录Twist、N-cadherin mRNA的表达(脑组织中)情况,并分析与临床病例特征的关系。结果:相比对照组,胶质瘤组Twist、N-cadherinm RNA相对表达量更高(P<0.01) ,较Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者(WHO为分级依据)脑组织中Twist、N-cadherin m RNA的表达量,Ⅱ级脑胶质瘤患者表达量更低(P<0.01)胶质瘤组织中Twist表达与N-cadherin表达呈正相关( r =0.681,P<0.01)。结论:Twist及N-cadherin与脑胶质瘤的分期相关。此过程中二者有协同作用。

敲低阿霉素心肌病大鼠心肌细胞ADAM10后大鼠心功能的改善及机制

目的建立阿霉素心肌病动物模型,观察解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)小干涉RNA(siRNA)重组慢病毒对神经钙黏素(N-cadherin)加工水解途径的调控。方法 SD大鼠腹腔注射阿霉素,建立阿霉素心肌病大鼠模型。将ADAM10 siRNA重组慢病毒进行心内注射,分为模型组、重组慢病毒治疗组、空白载体组及正常对照组。分离原代心肌细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,确定感染效率。超声检测各组大鼠心功能,HE染色观察心肌组织病变情况,Western blot法检测心肌细胞N-cadherin在ADAM10水解后产生的C末端片段1(CTF1)的蛋白水平,免疫组织化学染色检测心肌组织N-cadherin的表达和分布。结果原代培养的感染后心肌细胞可见大量GFP表达,说明慢病毒成功感染心肌细胞;与阿霉素心肌病组相比,ADAM10 siRNA重组慢病毒治疗组死亡率下降,心功能及心肌组织形态明显改善,心肌细胞N-cadherin蛋白水平增加并主要定位于细胞表面、CTF1蛋白水平降低。结论敲低ADAM10水平,增加阿霉素心肌病大鼠心肌细胞N-cadherin的表达、降低CTF1的表达,改善心功能。

非小细胞肺癌组织中Snail、E-cadherin及N-cadherin的表达及临床意义

目的探讨指转录因子Snail、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)及神经钙黏素(N-cadherin)在非小细胞肺癌组织中的表达及其之间的相关性。方法采用免疫组化法检测63例非小细胞肺癌(NSCLC)手术切除标本及30例癌旁组织中Snail、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达,并分析相互间关系及其临床意义。结果与癌旁组织比较,NSCLC组织中E-cadherin表达显著减少,N-cadherin和Snail表达明显增加(P<0.01)。NSCLC组织中,Snail的表达与N-cadherin呈明显的正相关(P<0.05,r=0.33),与E-cadherin呈显著负相关(P<0.05,r=-0.41),N-cadherinl的表达与E-cadheri也呈明显负相关(P<0.05,r=-0.56)。Snail表达阳性率与TNM分期和有无转移相关(P<0.05);E-cadherin表达阳性率与TNM分期和有无转移相关(P<0.05);N-cadherin表达阳性率与组织学分型、TNM分期和有无转移相关(P<0.05)。结论 NSCLC癌组织中Snail、E-cadherin和N-cadherin表达水平与肿瘤的浸润转移密切相关,可作为临床诊断和治疗靶点的参考指标。

非小细胞肺癌组织Twist、N-cadherin表达及临床意义

目的探讨转录因子Twist及神经钙黏素(N-cadherin)在非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展中的作用。方法收集75例NSCLC患者(NSCLC组)的癌组织及其对应的癌旁正常组织标本,另选12例良性病变患者(对照组)肺组织标本。采用实时荧光定量PCR法和免疫组化SP法检测Twist、N-cadherin mRNA及蛋白表达,分析NSCLC组织Twist、N-cadherin阳性表达与患者临床病理特征的关系。结果 NSCLC组癌组织Twist、N-cadherin mRNA相对表达量及蛋白阳性表达率均高于癌旁组织和对照组(P均<0.01)。NSCLC组有淋巴结转移及临床分期Ⅲ、Ⅳ期者Twist、N-cadherin阳性表达率高于无淋巴结转移及Ⅰ、Ⅱ期者(P均<0.01),Twist、N-cadherin阳性表达与患者性别、年龄及分化程度无明显相关性(P均>0.05)。NSCLC组织中Twist阳性表达与N-cadherin阳性表达呈正相关(r=0.583,P<0.01)。结论 Twist及N-cadherin可促进NSCLC的发生及发展;在此过程中二者有协同作用。

神经钙黏素表达下调对舌鳞状细胞癌细胞生物学能力的影响

目的研究神经钙黏素（N-cadhefin）表达下调对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖、细胞周期、凋亡以及迁移的影响，并探讨其可能的分子机制。方法利用Lipofectamine^TM2000将神经钙黏素siRNA转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞，将细胞分为3组：①未处理组；②对照siRNA组；③神经钙黏素siRNA组。分别收集转染后48h的细胞，采用新型的细胞计数试剂盒（cell counting kit，CCK）8试剂分析转染神经钙黏素siRNA后对细胞增殖能力的影响；运用流式细胞术检测下调神经钙黏素表达对Tca8113细胞周期及细胞凋亡的影响；采用Boyden小室实验分析下调神经钙黏素对舌鳞状细胞癌细胞Tca8113细胞迁移能力的影响；进一步采用蛋白质印迹法检测神经钙黏素表达下调对细胞增殖、细胞周期以及细胞迁移相关基因表达的影响。结果神经钙黏素siRNA能明显下调舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中神经钙黏素蛋白的表达，并显著抑制Tca8113细胞的增殖（P〈0．05）。细胞周期结果显示，神经钙黏素siRNA组中在Go／G1的细胞比率[（65．414±0．92）％]明显高于未处理组[（41．59±1．43）％]和对照siRNA组[（43．70±2．08）％]，差异有统计学意义（F=216．839，P=0．000）。神经钙黏素siRNA组中细胞凋亡的比率[（25．66±1．36）％]明显高于未处理组[（2．384±0．14）％]和对照siRNA组[（2．814±0．12）％]，差异有统计学意义（F=850．364，P=0．000）。Boyden小室体外侵袭实验结果表明，与未处理组和对照siRNA组相比，神经钙黏素siRNA组中TcaSll3细胞的迁移能力显著下降，差异有统计学意义（F=140．858，P=0．000）。蛋白质印迹法结果表明，与未处理组和对照siRNA组相比，神经钙黏素siRNA组中的基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）2和MMP-9明显下调，而021明显上调，且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论神经钙黏素在舌鳞状细胞癌的发生发展中可能具有重要的作用。

Ezrin蛋白与E钙黏素在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:研究埃兹蛋白(Ezrin)和E钙黏素(E-cadherin)在人脑胶质瘤中的表达及其意义。方法:采用SP免疫组化方法检测Ezrin、E-cadherin在40例不同级别胶质瘤及10例正常脑组织中的表达。结果:Ezrin蛋白、E-cadherin蛋白的阳性表达,在正常脑组织与胶质瘤组之间存在显著差异(P<0.01),在胶质瘤的高低级别组间也存在显著差异(P<0.05);并且它们在生存时间>2年组与生存时间≤2年组之间差异亦有显著性(P<0.01,P<0.05)。Ezrin的阳性表达随着肿瘤级别的升高而增高(P<0.05),E-cadherin的阳性表达随着肿瘤级别的升高而降低(P<0.05);Ezrin与E-cadherin的阳性表达呈明显负相关(rs=-0.685,P<0.01)。结论:Ezrin的过度表达和E-cadherin的表达下调在胶质瘤的侵袭及恶性进展中起着重要作用。Ezrin和E-cadherin的表达可能与胶质瘤患者的预后密切相关,提示可作为反映胶质瘤恶性程度与预后的指标。

下调N-cadherin对前列腺癌细胞药物敏感性、间质转化及AMPK/EGFR表达水平的作用机制

目的探究下调神经钙黏蛋白(N-cadherin)对前列腺癌细胞药物敏感性、间质转化及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/表皮生长因子受体(EGFR)表达水平的作用机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测正常前列腺细胞及4种前列腺癌细胞系中N-cadherin mRNA表达,选择N-cadherin表达最高的细胞系,将其分为前列腺癌细胞(空白)组、前列腺癌细胞+N-cadherin shRNA-CTR(阴性对照)组、前列腺癌细胞+N-cadherin shRNA(N-cadherin)组,RT-qPCR法检测N-cadherinm RNA表达,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测药物敏感性,Western印迹法检测间质转化相关蛋白及AMPK/EGFR蛋白表达。结果前列腺癌细胞系中N-cadherin mRNA表达量均显著高于正常前列腺细胞系LNCaP,其中DU145的N-cadherin mRNA表达量最高(P<0.05),因此选取DU145作为此次实验细胞;与阴性对照组相比,空白组N-cadherin mRNA表达、细胞对两种药物的敏感性、E-cadherin、AMPK、EGFR蛋白表达无明显差异(P>0.05);与阴性对照组组相比,N-cadherin组N-cadherin mRNA表达、AMPK、EGFR蛋白表达明显降低(P<0.05),细胞对两种药物的敏感性、E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论下调N-cadherin可显著提高前列腺癌细胞药物敏感性,抑制其间质转化,并抑制AMPK/EGFR表达水平。