神经鞘内转染siRNA-p300对大鼠神经病理痛阈值的影响

目的:探讨神经鞘内转染p300si RNA(si RNA-p300)对大鼠神经病理痛阈值的影响。方法:成年雄性清洁级SD大鼠27只随机分为假手术组、对照组和实验组,每组9只。对照组和实验组应用坐骨神经压迫损伤建立神经病理性痛模型并鞘内置管,分别鞘内转染无关4μg si RNA和4μg si RNA-p300。假手术组单纯进行模拟手术并注射等量生理盐水。分别于转染前及注射后2、4、6、8、10、12和14 d分别检测3组大鼠痛阈分值,于注射后14 d处死大鼠,取腰段脊髓采用Western-blot法检测大鼠脊髓中p300表达水平。结果:与假手术组(21.22±1.56)比较,对照组(14.33±4.02)和实验组(13.66±2.30)大鼠疼痛阈值在转染后第2 d开始显著降低(P<0.05)。与对照组(8.98±2.89)比较,实验组(11.23±2.20)大鼠疼痛阈值在转染后第6天开始显著升高(P<0.05);假手术组、对照组和试验组p300相对表达量分别为0.11±0.03、0.67±0.18和0.22±0.04,与假手术组比较,对照组和实验组p300表达显著上调(P<0.05);与对照组比较,实验组p300表达明显下调(P<0.05)。结论:鞘内注射si RNA-p300可显著降低大鼠神经病理性疼痛,提高痛阈。

siRNA-P300鞘内注射对神经病理性疼痛大鼠模型HIF-1α/VEGF和ERK通路的影响

目的探讨神经鞘内注射P300小分子干扰RNA(siRNA-P300)对神经病理性疼痛(NP)大鼠模型低氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)及细胞外信号调节激酶(ERK)通路的影响。方法 32只鞘内置管成功的雄性SD大鼠,随机平均分为假手术组、模型组、阴性对照组(加入阴性对照质粒)、siRNA-P300组(加入siRNA-P300),每组各8只。坐骨神经慢性压迫性损伤法(CCI)构建NP大鼠模型。于术前1 d及术后1 d、3 d、5 d、7 d、9 d、14 d检测各组大鼠机械痛阈与热痛阈;qRT-PCR检测P300 mRNA水平;Western blot检测P300、Ac-H3、HIF-1α、VEGF及ERK通路相关蛋白表达;ELISA法检测脊髓液中疼痛介质及神经炎性因子水平。结果与术前相比,术后不同时间点各组大鼠机械痛阈、热痛阈降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组、阴性对照组、siR NA-P300组大鼠IL-4及IL-10水平显著降低(P<0.05),P300 mRNA和蛋白、Ac-H3蛋白、疼痛介质5-HT、SP、GABA、炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β水平、HIF-1α、VEGF、p-ERK、p-CREB及BDNF蛋白水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,siRNA-P300组大鼠IL-4及IL-10水平显著升高(P<0.05),P300 mRNA和蛋白、Ac-H3蛋白、疼痛介质5-HT、SP、GABA及炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β水平、HIF-1α、VEGF、p-ERK、p-CREB及BDNF蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论鞘内注射siRNA-P300可能通过抑制HIF-1α/VEGF和ERK通路减轻NP大鼠神经病理性疼痛。