SKI-Ⅱ增敏顺铂对SGC7901/DDP细胞周期的阻滞作用研究

目的探讨神经鞘鞍醇激酶1(Sphk1)抑制剂SKI-Ⅱ增敏顺铂(DDP)对SGC7901/DDP细胞周期的阻滞作用,并探讨其可能作用机制。方法将人胃腺癌耐DDP细胞株SGC7901/DDP进行体外培养后,分对照组、DDP组(DDP 2.50 mg/L)、SKI-Ⅱa组(SKI-Ⅱ1.25μmoL/L)、SKI-Ⅱb组(SKI-Ⅱ10.00μmoL/L)、SKI-Ⅱc组(SKI-Ⅱ1.25μmoL/L+DDP 2.50 mg/L)、SKI-Ⅱd组(SKI-Ⅱ10.00μmoL/L+DDP 2.50 mg/L)进行实验。采用MTT、流式细胞技术检测各组细胞生长、周期阻滞情况;免疫组化染色、Western blot法检测细胞Sphk1、P-gp、p27蛋白表达;并分析Sphk1与P-gp、p27蛋白的相关性。结果 DDP组、SKI-Ⅱa组对细胞生长、细胞周期无影响;与对照组比较,SKI-Ⅱc组可抑制细胞生长,使停滞于G0/G1的细胞增加、S期细胞降低(P<0.05)。与对照组比较,DDP组的Sphk1、P-gp、p27蛋白阳性表达率无统计学差异,SKI-Ⅱa组p27蛋白阳性表达率升高(P<0.05)。Pearson相关分析显示,Sphk1与P-gp呈正相关(r=0.550,P<0.01),与p27呈负相关(r=-0.663,P<0.01)。Western blot检测显示,DDP组未见明显改变,SKI-Ⅱb组、SKI-Ⅱd组的Sphk1、P-gp表达减弱,p27表达增强。结论 SKI-Ⅱ可通过抑制Sphk1蛋白下调P-gp蛋白、上调p27蛋白表达,增敏DDP对SGC7901/DDP细胞的周期阻滞作用。