副猪嗜血杆菌感染禁食初乳仔猪实验动物模型的构建

为了利用禁食初乳（colostrum-deprived,CD）仔猪构建可靠的猪格拉泽氏病实验动物模型,本研究分别选取12头新生通城仔猪和15头新生杜长大仔猪,母猪自然分娩后对新生仔猪立即隔离并做必要消毒处理后实施人工喂养;45～46日龄,CD仔猪经气管内接种致死剂量（109 CFU）的副猪嗜血杆菌（0165菌株,血清型5）。结果显示：⑴利用本研究优化、建立的饲喂方案使得CD仔猪攻毒前存活率达到80%～83.3%;⑵所有通城CD仔猪经攻毒后临床上表现出典型的格拉泽氏病病征,其中66.7%的CD仔猪可于攻毒后存活3d;而杜长大CD仔猪可能由于存在猪胸膜肺炎放线杆菌感染导致攻毒后无明显病征;⑶通城CD仔猪剖检后明显可见纤维素性心包炎、腹膜炎、关节炎等病症,并在血液和肺脏组织中成功鉴定到细菌;⑷组织病理分析发现,细菌感染导致心脏等多种组织存在纤维蛋白沉积伴随血管肿胀和血栓,脾脏组织淋巴细胞数量减少;⑸感染可能抑制淋巴细胞增殖并导致外周血中单核细胞数量减少。以上结果表明,本研究利用通城CD仔猪成功建立了副猪嗜血杆菌感染的实验动物模型;副猪嗜血杆菌和猪胸膜肺炎放线杆菌双阴性是保证模型构建成功的关键。

副猪嗜血杆菌感染禁食初乳CD仔猪模型及感染相关表型组构建

研究旨在围绕副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis,Gps)感染优化制备禁食初乳(Colostrum-Deprived Piglet,CD Piglet)仔猪,并构建Gps感染相关表型组。对同一家系的2头母猪经同一头公猪精液配种后,从2窝中选取体重相近的15头1日龄杜×长×大新生仔猪制备CD仔猪模型。攻毒前记录仔猪饲喂数据,并对Gps及其他易混合感染病原进行鉴定。30日龄实施攻毒,实验组(n=6)经气管接种2×10^(8)CFU细菌,对照组(n=3)注射等体积TSB培养基。攻毒前后,采集CD仔猪基础生长数据、血液参数及体温数据;攻毒后记录仔猪临床症状;剖检后对肺脏等关键组织进行Gps分菌鉴定和病理分析;qRT-PCR法检测肺脏等4个组织中细胞因子和肝脏、肺脏中急性期蛋白的表达情况。结果表明,攻毒前CD仔猪成活率达100%,各项基础指标正常;Gps感染后格拉瑟氏病症状明显。本研究建立了Gps感染的综合症状评分体系,并能够较好区分出轻重症感染猪。结合体温数据、血液参数、细胞因子和急性期蛋白检测,最终将综合症状评分、感染后体温上升至41℃以上、11项核心血液参数(MON%、MON#、WBC#、TP、ALB、ALT、CREA、GGT、GLU、LDL、LDH)、4种细胞因子(IL10、IL6、IL1B、IL8)和1种急性期蛋白(HP)初定为Gps感染的关键表型组。研究为利用实验性感染猪群开展针对Gps的抗病育种奠定了基础。