一种测定福寿花浸膏中虾青素含量的酶解-正相高效液相色谱法研究

福寿花浸膏中所含的虾青素主要以脂肪酸酯的形式存在,为了应用液相色谱法准确测定其虾青素的含量,需要将虾青素酯定量转化为虾青素。由于虾青素在碱皂化过程中容易降解,所以要求严格的测定多采用胆固醇酯酶催化水解预处理结合高效液相色谱的方法进行。但胆固醇酯酶法检测虾青素的成本很高,难以在日常检测中推广应用。本文以福寿花浸膏样品为研究对象,对比了价格低廉的商品化南极假丝酵母脂肪酶(CALB)和胆固醇酯酶在相同条件下进行催化水解预处理进而以正相高效色谱法测定虾青素含量的结果。研究表明,采用6 U/mL南极假丝酵母脂肪酶在pH 7.0的TRIS缓冲溶液中水解福寿花浸膏样品60 min,再经正相高效液相色谱测算其虾青素含量达到9.194%,其60 min酶解程度与胆固醇酯酶水解50min相当且已水解完全,酶解120 min与60 min基本保持不变。由于商品化南极假丝酵母脂肪酶相对胆固醇酯酶使用成本低得多,用南极假丝酵母脂肪酶代替胆固醇酯酶解决了酶解法测定天然虾青素含量的高成本问题,该方法同时具有用时短、操作简便、重复性好的优点,有望广泛应用到福寿花、虾壳、雨生红球藻等天然虾青素原料及饲料中的虾青素测定。