福尔马林固定白鱀豚标本DNA提取及其遗传多样性的初步研究

福尔马林固定标本是宝贵的遗传资源,但是如何有效利用其中的遗传信息一直存在问题。本文尝试从标本预处理、消化、PCR扩增各方面综合考虑和优化改进,成功提取并扩增21头福尔马林固定白豚标本线粒体DNA控制区410bp片段。采用了3种预处理方法尽量去除固定标本中残存的甲醛,从试验结果来看,从酒精梯度+临界点干燥处理的标本中提取的DNA在扩增时具有明显优势。通过蛋白酶K消化过程中对于酶的浓度、温浴时间的比较试验,发现随着采用大幅提高酶浓度、延长消化时间等高强度的蛋白酶消化操作后,DNA的质量和产量均得到显著提高。针对标本DNA降解严重的特点,设计特异性好且长度合适的引物以及使用巢式引物扩增,均提高了标本DNA扩增的特异性和灵敏度。通过对所测得的21头白鱀豚线粒体DNA控制区部分序列的对比,发现全部个体在该片段上的序列完全一致,说明白豚遗传多样性极低。

肺外结核80例临床病理特征及几种常见结核分枝杆菌检测技术对比分析

目的探究肺外结核的临床病理特征,比较几种常见结核分枝杆菌检测技术在肺外结核诊断中的价值。方法回顾性分析2018年8月至2019年8月就诊于安徽省胸科医院经病理确诊的80例肺外结核病人的临床病理资料。结果肺外结核病人主要集中在19~84岁年龄段。80例病人中有基础疾病的8例(10.0%),合并肺结核的45例(56.3%)。肺外结核可发生在多器官、组织,其中发生在淋巴结44例(55.0%),鼻、咽、喉、声带、声门11例(13.8%),骨、关节9例(11.2%),泌尿、生殖系统8例(10.0%),消化道4例(5.0%),腹膜2例(2.5%),皮肤2例(2.5%)。多数病人首发症状以局部表现为主,结核全身中毒症状少见。不同部位的肺外结核,其常见病理改变存在差异:淋巴结结核病理改变以坏死性肉芽肿常见,32/44例(72.7%)。鼻、咽、喉、声带、声门结核病理改变以渗出性病变常见,6/11例(54.6%)。骨、关节结核病理改变以坏死性肉芽肿常见,4/9例(44.4%)。泌尿、生殖系统结核病理改变以坏死性肉芽肿常见,4/8例(50.0%)。腹膜结核和皮肤结核病理改变均以坏死性肉芽肿常见(100%)。相关实验室检查中,80例福尔马林固定-石蜡包埋(FFPE)标本中结核分枝杆菌荧光PCR法的阳性率高于分枝杆菌菌种鉴定、血液T-SPOT和血清学结核抗体检测,差异有统计学意义(P<0.001)。结论肺外结核在性别、年龄分布、临床表现方面缺乏特异性,组织学病理改变结合FFPE标本结核分枝杆菌荧光PCR检测可提高诊断效率。