大鼠单克隆抗体——Ⅶ.用降植烷和福氏佐剂预处理大鼠后腹水产生及单克隆抗体产量的增加

作者研究了腹腔注射降植烷、福氏不完全佐剂(IFA)以及上述两种佐剂的混合物(V/V)(称PIFA)对Louvain大鼠腹水产生及单克隆抗体(McAb)产量的影响。当腹腔注射杂交瘤或免疫细胞瘤细胞的同时注射2ml PIFA可获得最佳结果。若与未经处理的对照大鼠相比,腹水产生增加4.7倍,单克隆抗体产量增加6倍多。 大鼠-大鼠杂交瘤系统有以下优点:①在小鼠系统不适宜的情况下。

彩超引导下肝穿刺碘伏联合完全福氏佐剂硬化治疗肝囊肿40例疗效观察

目的探讨彩超引导下肝穿刺碘伏联合完全福氏佐剂硬化治疗肝囊肿的疗效和安全性。方法 80例肝囊肿患者均在彩超引导下接受肝囊肿穿刺硬化治疗,按注入硬化剂的不同随机分成对照组40例和观察组40例,对照组注入无水乙醇,观察组注入碘伏联合完全福氏佐剂,术后6个月应用彩超观察术后囊肿萎缩情况。结果 80例患者均一次穿刺成功,术后6个月,观察组的治愈率和总有效率均显著高于对照组(P<0.05);观察组的不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论彩超引导下肝穿刺碘伏联合完全福氏佐剂硬化治疗肝囊肿疗效优于无水乙醇法,且安全性更好。

Wistar大鼠福氏佐剂性类风湿关节炎动物模型研究

①目的探讨Wistar大鼠佐剂性类风湿关节炎造模效果,为类风湿关节炎发生机制及治疗效果等相关研究中动物模型的应用提供实验依据。②方法将大鼠随机分为两组,分别为模型组和正常对照组,每组各20只。模型组于大鼠右足趾皮下注射福氏完全佐剂(CFA)0.15mL,造模后第7、14、21、28天对两组大鼠进行关节炎评分。测量每组大鼠右足趾关节肿胀度,分离脾脏并制备脾细胞悬液,计算脾细胞增殖率,ELISA法检测血清中IL-10与IL-17的含量。③结果模型组致炎后7天足趾肿胀达峰值,14天后再度肿胀,21天出现皮肤溃疡,28天后溃疡面进一步扩大。大鼠模型组第14天脾细胞增殖率高于第7天和第21天,差异有统计学意义(P<0.05),模型组不同时期脾细胞增殖率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组第7、28天关节炎评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);第7、14、28天血清中IL-10与IL-17的含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。④结论模型组关节肿胀明显,大鼠表现接近于人体的类风湿关节炎(RA),且造模过程简单、稳定,是研究RA的较理想模型。

福氏完全佐剂包裹 IL-2及(或)5-FU 对小鼠 S180肿瘤抑瘤作用的初步研究

福氏完全佐剂(FCA)通常用来包裹抗原免疫动物制备抗体,而 FCA 本身还有刺激动物细胞免疫和体液免疫的功能。Ito 等人率先用福氏佐剂包裹化疗药物,配合肝动脉栓塞,肌注 IL-2,来治疗原发性肝癌,并取得较好效果。而用 FCA包裹 IL-2,或同时包裹化疗药物及 IL-2进行抗肿瘤实验者,目前尚未见报道。我们进行了有关的实验研究,现将结果报道如下。

福氏不完全佐剂与pristane在腹水型单抗制备中的联合应用

为提高腹水型单抗的产量 ,在采用 pristane常规致敏BALB/c小鼠的基础上 ,于注射杂交瘤细胞的同时 ,再少量注入福氏不完全佐剂 (IncompleteFreund’Adjuvant ,IFA) ,7～ 10d后收获腹水 ;ProteinG免疫亲和层析法及紫外分光光度法对腹水型单抗进行纯化及蛋白定量 ;间接免疫荧光法对纯化的抗体蛋白进行效价分析。实验结果表明 :腹水形成的阳性率为 80 % ,腹水的平均收获量为 6.2ml/只小鼠。纯化后腹水中抗体蛋白的含量为 2 .5～ 5mg/ml ,纯化的抗体蛋白用于间接免疫荧光分析的用量为每 5× 10 5 个细胞 0 .5～ 1.0 μg。结果表明 。

福氏完全佐剂包裹白细胞介素2和肿瘤坏死因子对小鼠S180肿瘤的抑制作用

本文报道一种新的免疫治疗方法。用福氏完全佐剂（Ｆｒｅｕｎｄ＇ｓ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ａｄｊｕｖｅｎｔ，ＦＣＡ）包裹白细胞介素２（ｌｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ２，ＩＬ－２）及／或肿瘤坏死因子（Ｔｕｍｏｒ Ｎｅｃｒｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）作了抗Ｓ１８Ｏ肉瘤的体内抗瘤实验。结果表明：ＩＬ－２及／或ＴＮＦ经佐剂包裹后，可明显减轻其毒副作用，并显著提高ＩＬ－２及／或ＴＮＦ的抗瘤作用。

CT引导下注射碘伏及福氏完全佐剂硬化治疗肾囊肿疗效观察

目的观察碘伏及福氏完全佐剂作为肾囊肿硬化剂治疗肾囊肿的效果。方法将肾囊肿患者随机分为A、B、C 3组,分别以无水乙醇、碘伏、碘伏联合福氏完全佐剂作为硬化剂,在CT引导下穿刺抽净囊液后注入囊内,留置20 min后再抽净。结果 A组囊腔消失率为65%,B组囊腔消失率为60%,C组囊腔消失率为88%。A组和B组比较无显著性差异,C组与A组和B组比较均有显著性差异。A组出现明显疼痛比例为22%,B组及C组患者未出现明显疼痛。结论碘伏联合福氏完全佐剂作为硬化剂治疗肾囊肿效果好,不良反应小,患者疼痛轻。

5－Fu佐剂包裹物的抗肿瘤作用的实验研究

本文作了福氏完全佐剂（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓｃｏｍｐｌｅｔｅａｄｊｕｖａｎｔ，ＦＣＡ）包裹５－Ｆｕ的抗肿瘤作用的实验研究。在对小鼠Ｓ１８０肿瘤（腹水型），ＥＡＣ肿瘤（腹水型）及Ｈ２２肝癌（腹水型）荷瘤鼠的治疗实验中，一次性腹腔注射２ｍｇ～６ｍｇ的５－Ｆｕ（相当于７０公斤人给予７７８～２３３４ｍｇ的剂量）均不能显著延长荷瘤鼠的存活期，盐水ＦＣＡ亦无治疗作用，而５－ＦｕＦＣＡ却显示出显著的治疗效果。４次实验，５－ＦＵ－ＦＣＡ治疗组荷瘤鼠平均存活期３０．６天～４８．３天，均显著长于同次实验的各对照组，且每次实验都有２／８至３／８的荷瘤鼠可完全治愈。

5－Fu佐剂包裹物的抗肿瘤机理的实验研究

本文较系统地作了福氏完全佐剂（Ｆｒｅｕｎｄ＇ｓｃｏｍｐｌｅｔｅａｄｊｕｖａｎｔ，ＦＣＡ）包裹５－Ｆｕ的抗肿瘤机理的实验研究。ＦＣＡ包裹５－Ｆｕ相的对包封率平均为：８４．５％。５－Ｆｕ－ＦＣＡ体外缓释试验结果和Ｗｉｓｔａｒ大鼠体内５－Ｆｕ及５－Ｆｕ－ＰＣＡ吸收试验均表明：５－Ｆｕ用ＦＣＡ包裹后，在体内外具有缓慢释放的作用。５０～２００μｇ浓度的５－Ｆｕ在不同作用时间里对肿瘤细胞增殖抑制率随作用时间延长而增加，统计三次实验结果（对Ｈ＿（２２）肝癌细胞），５－Ｆｕ２００μｇ／ｍｌ作用１０分钟对肿瘤细胞增殖抑制率为３４．６６±６．０２；５０μｇ／ｍｌ作用２４小时的抑制率为６１．３５±７．１７。两者比较差别显著（Ｐ＜０．０８）。结果提示：在肿瘤局部低浓度５－Ｆｕ的持续存在，在一定情况下，对肿瘤的抑制作用更强。

逆灸对随后佐剂性关节炎大鼠早期及继发期炎性细胞因子和局部足肿胀的影响

目的:观察逆灸对随后佐剂性关节炎大鼠早期、继发期关节局部肿胀和炎症因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的影响。方法:实验于2004-08/12在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室进行。以随机数字表法将48只Wistar大鼠分6组:正常组、模型早期组、逆灸早期组、模型继发组、逆灸继发组和逆灸正常组各8只。正常组:不造模,不预灸;模型早期组:大鼠右后足掌皮下注射福氏完全佐剂0.1mL造成佐剂性关节炎模型,造模第3天取材;逆灸早期组:于造模前进行艾灸,大椎穴处施灸,每次1壮,隔日灸1次,共灸8次,并于灸结束后造模,造模第3天取材;模型继发组:造模,造模第16天取材;逆灸继发组:于造模前进行艾灸,并于灸结束后造模,造模第16天取材;逆灸正常组:正常大鼠进行艾灸,灸结束后取材。采用放射免疫、鼠足容积测量法,观察逆灸对随后佐剂性关节炎大鼠早期和继发期足肿胀率及血清的白细胞介素1β,肿瘤坏死因子α的影响。结果:48只大鼠均进入结果分析。①足肿胀率:模型组和逆灸组右足早期肿胀率均高于正常组(2.128±0.262)%,(1.301±0.250)%,(0.011±0.018)%,F=26.001,P<0.01,且逆灸组肿胀较正常组明显减轻(P<0.05);模型组和逆灸组右足继发期肿胀率均高于正常组(1.736±0.165)%,(1.156±0.230)%,(0.009±0.018)%,P<0.01,且逆灸?

逐痹胶囊对大鼠佐剂性关节炎的影响

目的:观察逐痹胶囊对大鼠佐剂性关节炎(adjuvantarthritis,AA)的影响及作用机制。方法:用福氏完全佐剂(CFA)诱导大鼠AA模型,MTT法检测脾淋巴细胞增殖能力,免疫组织化学方法检测踝关节滑膜白细胞介素1(IL-1),白细胞介素6(IL-6)含量,并且测量原发及继发性关节肿胀程度。结果:生药52,26,13g·kg-1体重灌胃大鼠,逐痹胶囊显著抑制AA大鼠原发及继发踝关节炎性肿胀;降低脾淋巴细胞增殖能力及踝关节滑膜内IL1,IL-6含量。结论:逐痹胶囊对大鼠AA有一定抑制作用。

佐剂在弓形虫疫苗中的应用

弓形虫病是人兽共患寄生虫病，对人类危害极大，尤其对孕妇，可影响胎儿的发育，严重者可致畸，致死。目前弓形虫病尚无理想的防治方法，弓形虫疫苗研究经历了灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗及核酸疫苗等多种探索，但均存在不同的问题，如免疫原性弱，安全性差，因此，研制弓形虫疫苗，除需优化抗原外，非常需要用佐剂来增强疫苗免疫原性和诱导产生免疫活性分子，调节免疫应答强度和类型，产生更有效和持久的保护性免疫。本文综述福氏佐剂、霍乱毒素、脂质体、拟菌颗粒、蜂胶、细胞因子、CpGDNA等佐剂在弓形虫疫苗中的应用。

对佐剂性关节炎大鼠血清、肝中微量元素含量的研究

目的 :研究关节炎大鼠血清、肝中微量元素含量与病情的关系。方法 :用福氏佐剂诱导大鼠关节炎后 ,将大鼠分成未治疗组与治疗组 ,用原子吸收分光光度法测定各组大鼠血清、肝中微量元素含量。结果 :未治疗组血清、肝中微量元素Cu、Zn、Fe均低于治疗组。而且随病情的好转 ,体内微量元素含量也趋于正常。结论 :佐剂性关节炎时 ,大鼠血清。

新佐剂——Montanide ISA 50V2在马免疫中的应用研究

目的研究新佐剂-Montanide ISA 50V2在马免疫中的应用,制定合理的免疫程序,提高马免疫血清效价。方法用Montanide ISA 50V2乳化A型和F型肉毒类毒素制备成油乳抗原,免疫家兔和马,并与福氏不完全佐剂进行对比。结果在马免疫程序中,Montanide ISA 50V2与福氏不完全佐剂交替使用效果更好,免疫效价较高。结论在进一步试验确证后,将Montanide ISA 50V2作为佐剂应用于马免疫中,以获得更高的免疫血清的效价。

艾灸治疗关节痛的疗效与神经组织内P物质和脑啡肽的关系

我们用福氏佐剂诱发的关节炎大鼠作为病理模型，观察艾灸对患关节的压痛闽，局部皮肤温度，足容积，以及坐骨神经内的和腰髓内的P-物质和亮-脑啡肽的影响，试图探索艾灸治疗关节痛的作用机理。

日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白重组抗原的免疫保护性研究

目的探讨日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白(SVLBP)重组抗原的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导克隆菌大量表达SVLBP重组抗原,以镍-次氮基三乙酸琼脂糖树脂(Ni-NTA)亲和层析法纯化制备SVLBP重组抗原;将纯化的重组抗原加福氏佐剂经皮下免疫C57BL/6小鼠,每隔2周免疫1次,在第3次免疫后10d,经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴35±1条,感染后45d剖杀,计数检获虫数和每克肝虫卵数(LEPG)。小鼠在免疫前和攻击感染后分别采眶窦血,用ELISA测定特异性IgG及其亚群抗体水平。结果相对于佐剂对照组,免疫组小鼠的减虫率为33.4%,减卵率为47.6%;免疫后小鼠产生高水平的特异性IgG(>1:6400);抗体亚类检测结果显示,免疫组小鼠IgG2a、IgG2b、IgG1明显高于免疫前和佐剂对照组。结论日本血吸虫皮层蛋白SVLBP重组抗原能诱导小鼠产生一定的保护性免疫,是潜在的疫苗候选抗原分子。

牛颈静脉经不同方法交联改性后的免疫原性

目的:研究牛颈静脉带瓣管道经不同方法交联后免疫原性的变化。方法:将牛颈静脉随机分为4组(n=10):多聚环氧化合物(PC)交联组、染料介导光氧化(DMP)交联组、戊二醛(GA)交联组及新鲜牛颈静脉对照组。制备牛颈静脉匀浆,与完全福氏佐剂混合制成复合乳剂抗原,免疫新西兰大白兔。采用双向免疫扩散法测定兔血清抗体滴度。取新鲜牛颈静脉免疫的兔血清,采用免疫印迹法(Westernblotting)体外检测交联后的牛颈静脉组织匀浆的抗原组分。结果:免疫印迹显示新鲜牛颈静脉组织有特异性重复出现的阳性条带,经PC,DMP交联处理的牛颈静脉均未出现明显阳性条带,经GA交联处理的牛颈静脉中1例出现阳性条带,但无特异性重复出现的条带,各交联处理组间免疫原性无明显差异。结论: PC,DMP及GA交联处理的牛颈静脉可有效地灭活其免疫原性,适合临床应用要求。