一种冠脉灌注和后负荷完全分离的离体工作心脏模型

作者建立了一种新的离体工作心脏灌流模型。其特点是冠脉灌注和体循环的完全分离,使其可以各自独立变化,这种新模型不仅可以完成目前离体工作心脏模型所能做的一切实验,而且可以单独观察冠脉中物理及化学因素变化对心脏功能的影响。

离体糖尿病大鼠心肌对缺血再灌注损伤的耐受性研究

目的探讨离体糖尿病大鼠心肌对缺血再灌注损伤的耐受性。方法将44只SD大鼠完全随机分为非糖尿病对照组、非糖尿病托马斯停搏液（STH-2）组和糖尿病对照组、糖尿病STH-2组，各11只，糖尿病对照组和糖尿病STH-2组均建立糖尿病大鼠模型。4组大鼠均使用离体心脏灌流装置测定心功能指数及冠状动脉肌钙蛋白漏出含量，并观察心肌组织超微结构改变。结果非糖尿病STH-2组心脏保存4h后左心室形成压（LVDP）及左心室内压变化最大速率（±dp／dtmax）均明显低于非糖尿病对照组[LVDP：（162±41）mmHg（1mmHg=0．133kPa）比（344±37）mmHg；dp／dtmax：（4340±156）mmHg／s比（10438±252）mmHg／s；-dp／dtmax：（2440±152）mmHg／s比（4942±78）mmHg／s]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；糖尿病STH-2组心脏保存4h后LVDP、±dp／dtmax亦有不同程度的下降[分别为（148±13）mmHg、（2586±34）mmHg/s、（2135±82）mmHg／s]，但与糖尿病对照组相比差异均无统计学意义（均P〉0．05）；糖尿病组LVDP、±dp／dtmax均低于对应的非糖尿病组（均P〈0．05）。非糖尿病STH-2组肌钙蛋白漏出含量明显高于非糖尿病对照组[（0．190±0．020）μg/L比（0．020±0．001）μg/L，P〈0．05]；糖尿病STH-2组肌钙蛋白漏出含量明显高于糖尿病对照组[（0．360±0．050）μg/L比（0．140±0．030）μg/L，P〈0．05]；非糖尿病STH-2组肌钙蛋白漏出量低于糖尿病STH-2组，差异有统计学意义（P〈0．01）。电镜观察显示，非糖尿病对照组心肌结构基本正常，而非糖尿病STH-2组变化明显。糖尿病组较非糖尿病组心肌结构变化明显，心肌纤维化、线粒体增生数量明显增多。结论糖尿病大鼠心肌对缺血再灌注损伤的耐受性优于非糖尿病大鼠。

基于PI3K/AKT信号通路调控NLRP3炎症小体途径探讨龙牙楤木总皂苷抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的:基于磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体途径探讨龙牙楤木总皂苷抗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法:将60只大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、龙牙楤木总皂苷组、龙牙楤木总皂苷+LY29004组、LY29004组,每组12只。采用Langendorff离体心脏灌流装置,通过结扎左冠状动脉前降支30 min,复灌75 min,构建大鼠离体心脏MIRI模型,假手术组只穿线不结扎,余操作同模型组。采用Western Blot检测心肌组织中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)蛋白的表达含量,运用实时荧光定量PCR测NLRP3炎症小体组成基因NLRP3、凋亡相关点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬酶1(caspase-1)mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组心肌组织中IL-1β、IL-18、ASC mRNA、NLRP3 mRNA、caspase-1 mRNA表达均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,龙牙楤木总皂苷组IL-1β、IL-18显著下降(P<0.01,P<0.05),NLRP3 mRNA、caspase-1 mRNA、ASC mRNA表达亦显著下降(P<0.01);龙牙楤木总皂苷组较龙牙楤木总皂苷+LY29004组IL-1β、IL-18、NLRP3 mRNA、ASC mRNA、caspase-1 mRNA均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:龙牙楤木总皂苷可以通过调控PI3K/AKT信号通路,使心肌组织中IL-1β和IL-18降低,使NLRP炎症小体组成基因NLRP3、ASC和caspase-1的基因表达下降,表明龙牙楤木总皂苷有抗MIRI的作用。