离体法在饲料复合酶配方筛选中的应用

通过模拟动物消化生理规律 ,采用胃蛋白酶盐酸溶液 ( PPS)和猪小肠液 ( PIF)两步处理为特点的离体法分别测定 9种鸡复合酶饲料和 9种猪复合酶饲料的能量消化率 ,从而筛选出最佳复合酶组合。结果表明 ,最佳鸡饲料复合酶组合为纤维素酶 1号 +植酸酶 2号 +蛋白酶 3号 +淀粉酶 2号 ,最佳猪饲料复合酶组合为纤维素酶 3号 +植酸酶 3号 +蛋白酶 3号 +淀粉酶 3号。肉鸡饲养试验结果表明 ,最佳复合酶试验组较对照组平均日增重提高 9.60 % ,料肉比降低 2 6.10 % ;仔猪饲养试验结果表明 ,最佳复合酶试验组较对照组平均日增重提高 12 .4 7% ,料肉比降低3.2 1%。

离体法测定鸡饲料代谢能值方法的探讨

前言 随着现代化畜牧业的发展,饲料工业对饲料营养价值评定方法的精度和效率提出了愈来愈高的要求,而饲料中的有效能值是饲料品质检验的一个重要指标,测定鸡饲料代谢能的方法很多,但测试手段耗时费力,其结果还受试验动物各种因素的影响,很难适应饲料工业提出的快速评定的要求。

用离体法测定猪对牧草草粉消化率的研究

用胃蛋白酶/猪小肠液冻干粉两步酶解法测定猪对牧草草粉的消化率,并与全收粪比较测定.结果表明:干物质消化率两法测值吻合,总能消化率两法测值相近.用粗纤维和粗蛋白两指标均能较好预测草粉消化率,但粗纤维的r值更高.槐叶粉消化率两法测值差异较大.

猪饲料消化率的离体法测值与全收粪法测值的对比及其精度检验

按照中国农科院畜牧所提供的离体消化试验方法,用21种不同营养水平的饲料分别进行了离体消化试验和全收粪法消化试验。结果表明,两法的能量消化率测值间呈强相关关系(r=0.99,P<0.01),但两法测值间差异显著(P<0.01),说明离体法测值不能直接代替实测值应用,需经过回归校正。选用12个样品建立回归方程,对余下9介样品进行校正,结果校正值与实测值相当接近,差异均不显著(P>0.05)。用两批小肠液对10种样品同步进行离体消化试验,结果表明,不同批次小肠液的处理结果存在显著差异(0.05>P>0.01),必须对每批小肠液都进行标定。

用离体法评定鸡饲料代谢能的研究

本研究以快速测定代谢能的方法为对照,按 L_9(3~4)正交试验设计,对用猪小肠液离体消化测定向日葵仁饼、粕的离体消化能的条件进行了选优,用优选的条件对46个向日葵仁饼、粕的 IVDE 进行了测定。结果表明:pH=7.6、时间为4小时、温度为39℃时,测定的向日葵仁饼、粕的 IVDE 与实测的表观代谢能(AME)符合度较好.向日葵仁饼的 IVDE 与 AME 呈强相关关系(r=0.96),向日葵仁粕的 IVDE 与 AME 亦呈强相关关系(r=0.91).

离体法及在体法对黄连水煎液中肠吸收多成分的初步研究

药物药效的发挥与其在机体内始终处在吸收、分布、代谢、排泄这种动态变化的过程密不可分,而吸收作为口服药物进入机体的首要环节格外受到重视。中药作为多成分与多靶点的药物,单一成分的性质与其在多成分环境中所表现出来的性质会有差别。该文以黄连提取物中的生物碱为主要研究对象,建立黄连中生物碱成分含量测定的分析方法。并通过离体翻转肠囊实验及肠道灌流并行采血实验初步锁定黄连水提液中可透过肠壁吸收并吸收入血的成分,为后续对黄连多成分的吸收代谢研究提供数据参考与支持。

两种海洋微藻硝酸还原酶活性测定方法的比较研究

对6种常见海洋微藻的硝酸还原酶活性测定方法进行了初步研究。确立了离体法和活体法的提取(振荡)时间及酶促反应时间,分别为:5 min,30 min(离体法)和6 min,10 min(活体法),并对2种方法进行了对比。结果表明:在本文条件下,离体法较活体法更适于进行塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)、强壮前沟藻(Amphidinium carterae)、中肋骨条藻(Skeletonema costatum)、新月菱形藻(Nitzchia closterium)和旋链角毛藻(Chaetoceros curvisetus)的硝酸还原酶活性的测定;活体法更适于东海原甲藻(Prorocentrum donghainase)硝酸还原酶活性的测定。

鸭的空肠食糜连续采集方法及其空肠套管的设计

食糜的采集是离体法测定代谢能值的方法中影响其代表性的主要因素。为此,本研究以鸭为禽类代表动物,设计了可连续采集空肠食糜的套管及具有保鲜功能的食糜样本瓶,在可操作性方面取得了满意的结果。

几种酶制剂对肉鸭稻谷离体消化能的影响

模拟肉鸭胃肠道内环境,采用两步离体消化法,分别研究了三种酶制剂(β-葡聚糖酶、纤维素酶和木聚糖酶)的6个水平(0、100、300、500、700、900μg/g)对稻谷离体消化能值的影响。结果表明:β-葡聚糖酶(x1)、纤维素酶(x2)、木聚糖酶(x3)的添加水平显著提高了稻谷离体消化能值(Y)(P<0.05),其二次回归关系分别为Y=-1E-06 x12+0.001 2 x1+6.695 9(R2=0.863 8,n=6,P<0.05),Y=-1E-06 x22+0.0018 x2+6.7502(R2=0.8668,n=6,P<0.05),Y=-1E-06 x32+0.0016 x3+6.6634(R2=0.954 8,n=6,P<0.05),从而确定出在试验条件下,β-葡聚糖酶、纤维素酶和木聚糖酶的最适添加量分别为600、900和800μg/g。

几种海洋微藻硝酸还原酶特性的初步研究

确定了离体法提取时间，并采用离体法对5种海洋微藻硝酸还原酶的特性进行了初步研究。结果表明，离体法的最佳提取时间为5min；在pH7．9及20℃条件下，各藻硝酸还原酶的酶促反应恒速时间及以KNO。为底物的米氏常数存在差异，但以NADH为底物的米氏常数基本相同。酶促反应恒速时间顺序为锥状斯氏藻〈尖刺拟菱形藻〈东海原甲藻〈中肋骨条藻〈旋链角毛藻，以KNO。为底物的米氏常数大小顺序为旋链角毛藻〈东海原甲藻～中肋骨条藻〈锥状斯氏藻～尖刺拟菱形藻。此外，FAD对各藻硝酸还原酶活性的影响存在种属差异。

盐酸纳美芬鼻腔喷雾剂纤毛毒性影响因素的考察与评价

目的:考察盐酸纳美芬鼻腔喷雾剂纤毛毒性的影响因素并对其进行评价。方法:应用离体蟾蜍上颚黏膜为实验模型,同时应用光学显微镜观察不同因素对纤毛摆动时间的影响。结果:药物浓度、溶液pH值和羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)在一定范围内或浓度下对纤毛摆动时间无显著性影响,而渗透压和三氯叔丁醇对纤毛摆动时间有显著性影响,并且HP-β-CD和三氯叔丁醇之间存在相互作用,两者合用时,三氯叔丁醇的纤毛毒性明显下降。结论:在一定范围内或浓度下,鼻腔给药的纤毛毒性受药物浓度、溶液pH值和HP-β-CD的影响较小,受渗透压、三氯叔丁醇影响较大,HP-β-CD可以降低三氯叔丁醇的纤毛毒性。

几种非淀粉多糖酶对肉仔鸡日粮能量的当量调控

选用木聚糖酶(x_1)、β-葡聚糖酶(x_2)、纤维素酶(x_3)和果胶酶(x_4)4种非淀粉多糖(NSP)酶,利用离体消化技术,分别研究它们对肉仔鸡日粮能量的当量调控效应。结果表明,4种NSP酶的添加水平与离体消化能(y)进行S曲线拟合的回归方程分别为:y=10.9542-0.3391/{1+exp[(x1-470.8)/115.5]}(R^2=0.9812),y=10.9453-0.3499/{1+exp[(x_2-336.9)/114.8]}(R^2=0.9851),y=10.8849-0.2733/{1+exp[(x_3-308.0)/88.2]}(R2=0.9805),y=10.8450-0.2236/{1+exp[(x_4-543.5)/104.4]}(R2=0.9875);对日粮能量调控效应的主次顺序为木聚糖酶>β-葡聚糖酶>纤维素酶>果胶酶。

蛙坐骨神经-腓肠肌标本制备方法的改进

采用“先离体法”和“后离体法”两种方法制备蛙坐骨神经 -腓肠肌标本 ,通过实验记录 ,对标本的收缩机能进行了比较 .结果表明后离体法制备的标本单收缩幅度高 ,潜伏期和舒张期时程缩短 ,并对其原因进行了分析与讨论 .

降钙素基因相关肽对鼻粘膜及纤毛毒性的研究

目的 :考察降钙素基因相关肽 (CGRP)及其吸收促进剂二甲倍他环糊精 (MDβCD)对鼻粘膜纤毛的毒性。方法 :以生理盐水和盐酸麻黄碱作阴性对照 ,采用离体法考察 CGRP及不同浓度的 MDβCD对离体蛙上腭粘膜纤毛运动影响 ,采用在体法及电镜技术考察了 CGRP滴鼻剂对家兔鼻粘膜长期毒性。结果 :降钙素基因相关肽及 4 %以下 MDβCD对纤毛的毒性较低 ,5 % MDβCD对纤毛的毒性较大。CGRP滴鼻剂对家兔鼻粘膜长期毒性较小。结论 :CGRP可以用于鼻腔给药 ,其吸收促进剂初步确定为 4 % MDβCD。

离体方法在饲料用高粱代谢能值(鸡)评定上的应用

用生物学法和离体法分别对30个饲料用高梁样品进行了测定,以离体法干物质消化率(IVDMD)或离体法消化能(IVDE)为估测因子,对高梁的表现代谢能(AME)的估测可行性进行了探讨,并用15个高粱样品对估测值的精度进行了检验。结果得出:样品IVDE与AME间的相关系数为0.972(P<0.01),残余标准差(RSD)为0.2469 MJ/kg,回归公式为:AME1(MJ/kg)=1.1460+3.5815 IVDE。 IVDMD与AME间的相关系数为0.945(P<0.01),残余标准差(RSD)为0.3473MJ/kg,回归方程为:AME2(MJ/kg)=0.8033+0.1435 IVDMD。精度检验结果,估测值与实测值都才目当接近(P>0.05)。 试用公式1对大麦(江苏农学院提供)、稻谷(湖南农学院提供)、小麦、米糠(湖南省畜牧兽医所提供)等能量饲料的AME进行估测,前两样估测值与实测值比较近似(P>0.05),而后两样的估测值与实测值则差异较大(P<0.01)。试用估测肉鸡或蛋鸡配合饲料的AME的回归公式估测高梁,估测值与实测值差异均较大。

鸭的空肠食糜连续采集方法及其空肠套管的设计

食糜的采集是离体法测定代谢能值的方法中影响其代表性的主要因素。为此，本研究以鸭为禽类代表动物，设计了可连续采集空肠食糜的套管及具有保鲜功能的食糜样本瓶，在可操作性方面取得了满意的结果。

不同添加剂对菊芋茎叶青贮品质及营养价值的影响

为了合理开发和利用菊芋(Helianthus tuberosus)茎叶资源,本研究以成熟期菊芋茎叶为原料,研究添加0.28%乳酸菌(乳酸菌组)和0.28%菊粉(菊粉组)对菊芋茎叶青贮品质的影响。采用两极离体法评定其营养价值,以期为菊芋茎叶的饲料化利用提供参考依据。试验结果表明,1)与对照组(无添加剂)相比,乳酸菌组和菊粉组的感官评定为优级。2)与对照组相比,乳酸菌组pH、丁酸、氨态氮占总氮量(NH3-N/TN)均显著低于对照组(P<0.05),而乙酸、乳酸含量显著高于对照组;菊粉组pH显著低于对照组(P<0.05),乙酸、乳酸含量显著高于对照组;乳酸菌组与菊粉组相比,乳酸菌组pH、丁酸含量显著低于菊粉组(P<0.05),而乙酸含量和NH3-N/TN则显著高于菊粉组。3)与对照组相比,乳酸菌组和菊粉组的粗灰分含量显著降低(P<0.05),水溶性碳水化合物显著升高。4)与对照组相比,乳酸菌组干物质、中性洗涤纤维消化率显著升高(P<0.05),菊粉组干物质消化率显著升高而酸性洗涤纤维消化率显著降低;乳酸菌组中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维消化率显著高于菊粉组,而干物质消化率差异不明显(P>0.05);综上所述,添加0.28%乳酸菌和0.28%菊粉均可提高菊芋茎叶青贮饲料的发酵品质和营养价值,且同等浓度下,乳酸菌的改善效果更优。

简化ALS活性测定方法的可行性探讨

为探讨在离体法测试ALS活性实验中简化提取ALS蛋白步骤和廉价易购的二硫苏糖醇(DTT)替代黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)可行性,以暗培养的玉米幼苗为ALS提取材料,测定了粗蛋白、半精蛋白、精蛋白提取方法提取的ALS蛋白对ALS活性的酶促反应效果;分析了DTT替代FAD辅酶的可行性。试验结果,ALS蛋白提取过程中,可用缓冲液代替液氮碾磨材料,离心速度可降至为10,000 r/min;酶促反应效果粗蛋白酶好于半精蛋白酶、半精蛋白好于精蛋白酶。在离体法测定ALS活性体系中,DTT替代黄素腺嘌呤二核苷酸FAD配制的缓冲液对ALS蛋白的提取及酶促反应效果类似于FAD缓冲液,但由于提取ALS蛋白中携带痕量FAD分子,所以尚未证明在酶促反应中DTT分子完全替代FAD分子起到了ALS辅酶作用。

螺旋藻硝酸还原酶Km值的比较研究

采用离体法对鄂尔多斯高原碱湖的钝顶螺旋藻S1、引进的钝顶螺旋藻S2和极大螺旋藻S3硝酸还原酶(NR)的活性进行测定,用4种作图法研究该酶的Km和Vmax。结果表明:4种作图法得出的Km和Vmax值均在同一个数量级,方差分析不同的作图法之间无显著差异,但3个样品间差异显著,S1的最高,S3的次之,S2的最低。在30℃±1℃、pH7.5下,以KNO3为底物,Eadie-Hofstee作图法得出的S1、S2和S3NR的Km值分别为2.729 1μmol/L、1.080 7μmol/L和1.627 4μmol/L,Vmax分别为0.017 2μmol/min、0.007 0μmol/min和0.009 8μmol/min。与某些生物比较,螺旋藻NR的Km值相对较低,对NO3-亲和力较高。