丹参注射液对大鼠离体灌流肝及门静脉血管条的影响

丹参注射液对CCl_4损伤的大鼠离体灌流肝具有保护作用,可降低灌流液中GPT,减轻肝脏的病理损伤;对大鼠体外SGPT活力及门静脉血管条则无明显影响。

农药叶枯灵对大鼠离体灌流肝的影响研究

进行了叶枯灵的大鼠肝脏离体循环式灌流肝实验研究,结果表明,灌流肝正常功能至少可维持2小时,叶枯灵在500uM 时,对大鼠灌流肝有毒作用,LDH 酶活性及 K^+浓度对评价叶枯灵的有毒作用是敏感的指标。本文建立了大鼠离体灌流肝的模型,适用于化合物的毒性及代谢的研究。

催醒宁在大鼠离体灌流肝脏中的生物转化

用离体大鼠肝脏灌流方法,研究了胆碱酯酶抑制剂CXN的生物转化过程。径HPLC分离纯化及光谱分析,鉴定了CXN的六个脂溶性代谢产物的化学结构。产物Ⅰ为CXN原形,其余均为氧化产物。其中产物Ⅲ尚保留部分抑酶活力,而产物Ⅱ,Ⅴ及Ⅵ对小鼠全脑胆碱酯酶的抑酶活力明显下降。另外还观察到,代谢产物Ⅱ及Ⅴ对小鼠的急性毒性也明显减小。

以离体肝灌流技术研究当归对黄药子肝毒性的保护作用

目的:通过测定离体肝灌流液中的黄嘌呤氧化酶(XOD)及病理组织学观察,评价黄药子、当归及其相配伍后的水提取物对肝脏毒性作用。方法:采用离体肝灌流方法,分别加入各组药物,定时收集各组灌流液,测定XOD,并对灌流肝脏进行HE染色光镜观察。结果:黄药子水提取物在灌流液低浓度(1.1mg/ml)、短时间(15min以后)即可导致肝细胞损伤,并与浓度和时间呈依赖关系。黄药子:当归1∶2合煎液中低浓度未见对肝细胞有损伤。结论:黄药子单煎液有明显肝毒性,配伍当归后有明显肝保护作用。

海藻甘草及其相配伍后的水提取物的肝毒性研究——对离体大鼠肝灌流液中黄嘌呤氧化酶的影响

目的 :通过测定肝灌流液中逸出的黄嘌呤氧化酶 (XOD) ,评价海藻、甘草及其相配伍后的水提取物对肝脏毒性的影响。方法 :采用离体肝灌流方法 ,分别加入各剂量组药物 ,定时收集各组灌流液 ,供测 XOD用。结果 :甘草水提取物在灌流液中低浓度时 (0 .5 g生药 /2 0 0 ml、1 .0 g生药 /2 0 0 ml)时均未观察到明显变化 ,高浓度 (2 .0 g生药 /2 0 0 ml)、长时间 (60 min以后 )出现毒性反应。海藻水提取物在灌流液中低浓度 (0 .5 g生药 /2 0 0 ml、1 .0 g生药 /2 0 0 ml)、短时间 (1 5 min以后 )都能导致肝细胞损伤 ,并与浓度和时间呈依赖关系。甘草∶海藻 =1∶ 1合煎液未见对肝细胞有损伤 ,余下各比例合煎及单煎后混合液对肝细胞均有损伤 ,且随海藻含量增加毒性增强 ,合煎液毒性强于单煎后混合液。结论 :海藻单煎液及除甘草∶海藻 =1∶ 1合煎液外各比例合煎及单煎后混合液均有一定肝毒性 ,而甘草单煎液在低浓度。

异甜菊醇在大鼠离体肝灌流中的药代动力学研究

目的研究异甜菊醇在大鼠肝脏内的代谢情况。方法给予SD大鼠离体肝灌流（112）行异甜菊醇的初步药动学研究（体外试验）。分离5只大鼠肝脏然后用含有异甜菊醇的介质进行循环灌流，在时间为0、1、3、5、10、15、20、25、30、40、50、60rain时收集灌流液样品，每间隔10min收集胆汁样品，样品用HPLC—UV分析。尿液（前面实验收集）、灌流液和胆汁样品用β-葡萄糖醛酸酶（1-3U／μL）培养再进行HPLC—UV分析。结果40～50min后的灌流液中，HPLC法检测不到异甜菊醇，而胆汁中完全没有检测到。灌流液和胆汁分别经过β-葡萄糖醛酸酶／硫酸根培养后，色谱方法与灌流液的一样保持不变，胆汁样品中得到了明显的异甜菊醇峰。60min中的药动学参数正T1/2、AUClast、Vz（ods）、CLH、EH（肝脏提取率）和回收率（R0-60代谢率）分别为：（17．82±2．5）min、（258．18±33．2）min·μg／mL、（425．35±32．1）mL、（17．7±2．2）mL／min、（0．59±0．07）和（18．08±2．5）。结论经过40—50min灌流后异甜菊醇主要在肝脏中积累，以葡萄苷酸化形式从胆汁排泄，很可能大部分经过胆汁排泄慢慢的消除到粪便中。

离体肝灌流方法及其质量控制

采用离体肝灌流方法，在麻醉状态下，使大鼠肝脏形成体外循环。结果：灌流２ｈ后，肝脏外观呈粉红色、质地均匀，无斑块状改变，经肝切片组织学检查，其显微结构基本正常，流出液丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）活性和蛋白质含量无异常改变。提示：此法可维持肝脏正常生理、生化功能至少２ｈ；该模型可用于物质代谢和中毒机理等方面的研究。

归脾颗粒剂对肝灌流液中酶AST、ALT的影响

目的 :评价归脾颗粒剂及含药血清对大鼠肝脏的影响。方法 :采用离体肝灌流模型。结果 :归脾颗粒剂 2 .5、5 .0 g·L-1 对肝灌流液中酶AST、ALT无影响 ,与空白组比较无差异 ;大鼠灌胃不同剂量归脾颗粒剂 7d后血清对大鼠肝灌流液中酶无影响 ,与空白组比较无差异。结论 :归脾颗粒剂及其含药血清对酶AST、ALT无影响 ,提示归脾颗粒剂对肝脏无毒性。

鹅去氧胆酸对小鼠肝灌流及原代肝细胞胆汁酸代谢通路相关基因表达的影响

目的通过小鼠原代肝细胞、离体肝灌流模型和整体动物实验,比较鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)对胆汁酸代谢通路的影响。方法实验包括原代肝细胞、离体肝灌流和整体动物实验3部分,每部分均包括空白组和CDCA给药组(n=6),给药剂量分别为100μmol/L、100μmol/L和50 mg/kg。采用实时荧光定量PCR检测肝细胞或肝脏中Cyp7a1、Cyp8b1、Fxr、Shp、Bsep、Ostβ等基因表达的水平。结果在原代肝细胞的实验中,CDCA能显著上调Shp、Ostβ基因的表达(P<0.05),抑制Cyp7a1、Cyp8b1和Bsep基因的表达(P<0.05)。在离体肝灌流的实验中,CDCA能诱导Ostβ的基因表达(P<0.05),而在整体动物实验中,CDCA对Bsep基因的表达产生明显抑制(P<0.05)。结论由实验结果可知,在肝灌流及原代肝细胞中,CDCA对胆汁酸代谢通路的影响不同,在离体肝灌流模型与整体动物上的影响较一致。因此,在其开发与研究中,不能局限于体外细胞模型,还需要进一步的验证。

药物体外肝代谢研究进展

目的 介绍药物体外肝代谢方法的最新进展。方法 根据近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。分别按肝微粒体体外温孵法及基因重组P4 5 0酶系、肝细胞体外温孵法、离体肝灌流及器官组织切片法等进行介绍。结果与结论 介导药物体外代谢酶系的研究是药物体外肝代谢的研究热点 ,其在新药研究与开发及正确指导临床合并用药有着巨大的推动作用。

药物体外肝代谢研究方法

对近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。介绍肝微粒体体外温孵法、肝细胞体外温孵法、离体肝灌流及器官组织切片法。其中,肝细胞体外温孵法是当今药物体外肝代谢研究的热点,对新药研究与开发及正确指导临床合并用药有着巨大的推动作用,将对其进行重点论述。

药物体外肝代谢研究进展

目的介绍药物体外肝代谢方法的最新研究进展。方法根据近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。分别按照肝微粒体体外温孵法及基因重组P450酶系法、肝细胞体外温孵法、离体肝灌流法及器官组织切片法进行介绍。结果药物体外代谢酶系的研究是药物体外肝代谢的研究热点。结论药物体外肝代谢的研究对新药研究与开发、正确指导临床合理用药具有巨大的推动作用。

药物体外肝代谢研究方法

体外代谢研究对阐明药效物质基础及作用机制有重要意义。常见的体外肝代谢研究方法有肝微粒体体外温孵法、肝细胞体外温孵法、肝灌流技术、肝组织切片技术、基因重组P450酶系等。药物体外肝代谢不能全面反映体内药物的综合代谢情况,与体内的真实代谢情况存在差异,今后需结合体内实验等方法来完善药物在体内外的药物代谢转运的研究。目前肝灌流技术和基因重组P450酶系等体外肝代谢研究方法对设备、实验操作成本、数据处理技术等要求较高,其运用和推广仍然受到一定的约束和限制,今后需建立简单、快速、经济、高效的科学技术方法和手段。由于药物体外肝代谢对新药研究与开发、正确指导临床合并用药有着巨大的推动作用,因此该文将对其进行重点论述。

体外肝代谢系统的研究与应用

肝药酶在药物代谢中具有十分重要的作用。对肝药酶的研究方法中,以动物肝脏或肝细胞为基础,构建体外肝代谢系统是体外代谢研究中最重要的环节之一。对体外肝代谢的研究,主要是利用肝微粒体、基因重组CYP450酶系、肝细胞培养、肝组织切片及离体肝灌流系统等方法。本文综述近年国内外所应用的不同体外肝代谢系统,并对各体外代谢研究方法进行比较,指出根据各系统的特性、不同的实验要求和目的,选择适当的研究方法的重要性。

海藻、甘草及其不同比例配伍后的水提取物的肝毒性研究

目的 评价海藻、甘草及其相配伍后的水提取物对肝脏毒性的影响。方法 制备离体肝灌流模型 ,分离出完整肝脏 ,先以Krebs-Henseleit等渗缓冲液冲洗肝脏 ,再以 1 64 0缓冲灌流液冲洗灌流至流出液呈红色 ,将肝脏移至盛 1 64 0灌流液杯中 ,循环性前向性灌流 ,各剂量组药物分别缓慢注入盛 1 64 0灌流液杯中 ,定时收集灌流液供测AST、ALT用。结果 甘草水提取物在灌流液中低浓度时未观察到明显变化 ,高浓度 60MINCRG出现毒性反应 (P <0 .0 5 )。海藻水提取物在灌流液中低浓度 1 5min以后 )都能导致肝细胞损伤 ,并与浓度和时间呈依赖关系。甘草∶海藻 (1∶1 )合煎液未见对肝细胞有损伤 (P >0 .0 5 ) ,余下各比例合煎及单煎后混合液对肝细胞均有损伤 ,且随海藻含量增加毒性增强 ,合煎液毒性强于单煎后混合液。结论 海藻单煎液及除甘草∶海藻 (1∶1 )合煎液外各比例合煎及单煎后混合液均有一定肝毒性 ,而甘草单煎液在低浓度。

甘草苷对CCl_4肝脏毒性的保护作用

目的 :研究甘草苷对CCl4造成的肝脏毒性的保护作用。方法 :采用离体肝灌流技术 ,在灌流液中加入CCl4的同时 ,加入甘草苷 ,定时收集灌流液供测XOD含量用。结果 :甘草苷能显著降低灌流液中XOD含量。结论 :甘草苷对CCl4造成的肝脏毒性有保护作用。