离体灌流肺模型建立过程中模拟方法学的应用

离体灌流肺(Isolated perfused lung IPL)是将动物的肺脏(或与心脏同时)与自体血液循环断离,在体外通过人工灌流,使肺的活性在一定时间内得以保持,

利用兔离体灌流肺模型评价肺毛细血管压力及血管抵抗分布

目的：介绍一个理想的动物离体灌流肺模型，评价肺血管各部位的压力及血管抵抗纵向分布比率。方法：利用兔离体灌流肺模型，采用肺血流阻断法进行测定。结果：测定值分别为肺动脉压力：２０８６±１８２ ｋ Ｐａ；肺静脉压力：９８７±０６１ ｋ Ｐａ；毛细血管动脉侧压力：１６６３±１０４ ｋ Ｐａ；毛细血管压力：１４３５±１２０ ｋ Ｐａ；毛细血管静脉侧压力：１２１６±１２３ ｋ Ｐａ。通过大动脉、小动脉、小静脉、大静脉各段的抵抗分配比率分别为：３８％ 、２１％ 、２０％ 、２１％ 。结论：这种评价肺血管压力及抵抗分配的方法具有操作简便、测定时间短、定位准确的优点，是一种新型的实验方法。

氯气染毒致兔高体肺灌流液组织胺含量增高及肺水肿

利用负压通气的离休兔肺灌流模型研究高浓度氯气（5000ppm）急性染毒引起肺损伤及肺水肿的病理生理机理．方法：9只自体血灌注、负压通气（吸入950mL／LO2及50mL／LCO2）的离体兔肺灌流模型为对照组；10只吸入5000ppm的氯气，染毒20min．在控制回流压力的情况下，动态监测灌流压力、肺重量的变化；荧光光度法测定灌流血液血浆中组织胺、5-羟色胺含量；测定肺湿／干重比值等．结果：在控制回流压力与灌流液流速（133．3mL／min）不变的情况下，染毒10min后，与未染毒的离体灌流肺相比肺重量迅速增加继而灌流压力开始增高；灌流液血球压积值显著增高；灌流血液的血浆中组织胺含量增高，而5-羟色胺含量未见明显增加；肺湿／干重比值显著增加．外观见明显肺水肿、大量粉红色泡沫自气管涌出；光镜见肺充血、肺水肿及肺气肿．结论：高浓度氯气染毒可导致肺水肿，其发生机制主要是由于微血管渗透性的增加，而后者可能与组织胺的增加有关．

中药764—3对内毒素所致离体大鼠灌流肺损伤的保护作用探讨

本研究观察了大肠杆菌内毒素对大鼠离体灌流肺的氧化性损伤作用，并探讨了中药７６４－３对该损伤的保护作用。结果发现单纯离体灌流肺给予内毒素刺激未能引起肺动脉压升高，这与在体情况下的反应不同。内毒素组的肺泡灌洗液中蛋白质含量和肺组织湿干重比值分别比其它组为高（Ｐ＜０．０５），该组肺组织匀浆和肺泡灌洗液中丙二醛（ＭＤＡ）含量也显著高于其它组（Ｐ＜０．０１）。中药７６４—３能够显著地减轻肺水肿（Ｐ＜０．０５），降低灌洗液和肺组织ＭＤＡ水平（Ｐ＜０．０１）。结果提示大肠杆菌内毒素对肺组织的损伤作用部分是通过刺激产生氧自由基的途径实现的。中药７６４－３具有较强的抗氧化能力，对肺组织具有较好的保护作用。

利用兔离体肺灌流模型评价肺微小血管通透性

目的 :准确、定量的评价肺微小血管通透性。方法 :利用兔离体肺灌流模型 ,采用肺重量分析法测定肺毛细血管滤过系数 (Kf)。结果 :肺毛细血管滤过系数测定值为 4 .78± 0 .73mg·min-1.cmH2 O-1·g-1。结论 :这种利用离体肺灌流模型定量评价肺微小血管通透性的方法具有直接、测定准确的优点 ,对于了解肺的生理状态、评价急性肺损伤和肺水肿程度具有重要意义 ,是一种新型的实验方法。

家兔离体肺恒流灌流负压通气模型的建立

作者用9只家兔,取出肺脏,于体外用自体稀释抗凝血液进行灌流,采用负压通气方法,在控制灌流液流量率(133.33ml/min)恒定的条件下,在70min的灌流期内,灌流压力略有上升,但均不超过227kPa,肺重量略下降。模型稳定后10min测定灌流液pH值为7.58±0.13,Po_2:36.57±9.43kPA,Pco_2:233±0.45kPa;灌流血液血球压积开始为24.13％±3.12％,结束为24.12％±3.04％,无明显改变(P>0.05);肺湿/干重比值(对照组为4.74±0.16;离体肺值为4.75±0.12,P>0.05);肺水含量与正常在体肺的相应值比较无显著性差别。灌流70min内肺的外观形态大体现正常。上述结果表明,本实验所建立的模型在灌流期间内是稳定的,可信的。

自制肺灌流液在猪离体肺灌流中的应用

目的:研究自制肺灌流液在猪离体肺灌流中的应用。方法:7个供体猪肺体外灌流6h,灌流过程中每小时测定灌流液的pH值、电解质浓度、渗透压等,同时测定供体肺的肺功能指标,并计算动静脉氧分压差、肺循环阻力和氧合指数,以评价供肺质量。结果:自制灌流液的pH值、电解质浓度、渗透压在6h灌流过程中保持稳定。灌流4h时,供肺动静脉氧分压差、氧合指数最高,而肺循环阻力未见明显升高。结论:自制肺灌流液可用于猪离体肺灌流,对供肺具有一定的保护和修复作用。

大鼠原位离体肺灌流模型在肺毛细血管通透性研究中的应用

目的在传统大鼠离体肺灌流模型基础上,建立改良的原位离体肺灌流模型,以研究评价肺毛细血管通透性.方法建立并利用大鼠原位离体肺灌流模型及内毒素诱导的肺损伤模型,测定伊文思蓝(EB)标记蛋白分子的血管外漏出量,计算肺白蛋白通透性表面积乘积(PS),定量评价肺毛细血管通透性.结果测定大鼠原位离体肺灌流的正常组、内毒素致肺损伤组中肺组织的PS值分别为5.37±0.94、25.00±8.8×10-2cm3/(min.g),二者间比较有统计学意义(P<0.05).结论该评价肺微小血管通透性的模型操作简单,定位准确,是一种可行的改良方法.

尾吊对大鼠离体肺循环的影响及NOS抑制剂的对抗作用

目的研究尾吊模拟失重对大鼠离体肺循环的影响和NOS抑制剂的对抗作用,为模拟失重对肺循环局部调节和立位耐力和运动能力降低机制研究积累资料。方法 -30°尾吊(TS)模拟失重的生理效应,Wistar雄性大鼠被随机分成3组:对照组(Con,n=8)、7 d尾吊组(TS7,n=10)和14 d尾吊组(TS14,n=11)。在人工胸腔内,采用离体肺灌流技术,超声流量计和恒流蠕动泵将肺循环流量控制在13.58 mL/min。PowerLab/4SP生理记录系统检测模拟失重对大鼠最大肺动脉压、静脉压和阻力影响和10-5 mol/L L-NAME的对抗作用。结果 TS7,TS14组大鼠离体灌流的肺动脉压最大值显著降低(P<0.01),肺动脉端阻力和肺循环阻力显著降低(P<0.01),10-5 mol/L L-NAME能较好对抗模拟失重对肺循环的影响。结论 NOS抑制剂对抗立位耐力和运动能力降低有应用前景。

内皮素-1对肺表面活性物质分泌的调控

采用离体大鼠非灌流肺，观察生理浓度内皮素-1（ET-1）对肺表面活性物质（PS）分泌的影响。结果表明，10－12和10－10mol／L的ET-1可促进PS磷脂及其主要组分磷脂酰胆碱（PC）的基础分泌；在间歇性肺扩张刺激基础上，ET－1可进一步加强磷脂和PC的分泌。蛋白激酶C（PKC）抑制剂H7可阻断ET-1的促PS分泌效应。培养的肺组织暴露于ET-1（10－12和10－10mol／L）1和4h后，肺组织ET含量显著高于对照组。结果提示，生理水平的ET-1通过PKC的介导参与肺PS分泌的调控；ET-1可诱导肺组织产生ET。

还原型谷胱甘肽对离体肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的利用德国HSE公司IL-2型肺离体灌流系统观察还原型谷胱甘肽（GSH）对离体肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立大鼠离体肺缺血再灌注损伤模型，分为正常对照组（Control组）、缺血再灌注组（I／R组）、还原型谷胱甘肽治疗组（GSH组），每组各8只。Control组只进行1h的肺离体灌流；I／R组缺血45min，复灌60min；GSH组灌流液中加入4mmol／LGSH，缺血45min，复灌60min。灌流过程中，通过IL-2型灌流系统检测潮气量、顺应性、气道阻力。灌流结束后，检测肺组织湿／干重比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性；苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理形态变化。结果在复灌20、40和60min时，与I／R组比较，GSH组潮气量、顺应性均增高（P〈0．05）；湿／干重比和气道阻力均下降（P〈0．01）。同时，与I／R组比较，GSH组超氧化物歧化酶活性增加[（73．27±9．59）U／mg蛋白比（55．13±8．37）U／mg蛋白，P〈0．05]，髓过氧化物酶[（0．30±0．03）U／g比（0．37±0．09）U／g，P〈0．05）和丙二醛含量降低[（1．54±0．36）nmol／mg蛋白比（1．79±0．37）nmol／mg蛋白，P〈0．05]。与I／R组比较，GSH组肺组织损伤程度明显减轻，湿／干重比（6．70±0．66比8．69±1．57，P〈0．05）。结论GSH能有效减轻肺缺血再灌注损伤。